《Journal of Ethnopharmacology》：Wenyang Xiaozheng Decoction attenuates renal fibrosis and suppresses pyroptosis-associated signaling: insights from integrated transcriptomics and serum pharmacochemistry
编辑推荐：
•WXD减轻UUO小鼠的肾纤维化及HK-2细胞的促纤维化反应。•转录组学提示NF-κB和细胞焦亡相关信号通路的参与。•基于血清药物化学的网络药理学分析支持转录组学结果。•NSA和LPS分别部分模拟和拮抗WXD的作用。引言慢性肾脏病（CKD）以肾功能逐渐且不可逆地下降并最终发展
• WXD减轻UUO小鼠的肾纤维化及HK-2细胞的促纤维化反应。
• 转录组学提示NF-κB和细胞焦亡相关信号通路的参与。
• 基于血清药物化学的网络药理学分析支持转录组学结果。
• NSA和LPS分别部分模拟和拮抗WXD的作用。
引言 慢性肾脏病（CKD）以肾功能逐渐且不可逆地下降并最终发展为终末期肾病为特征，预计将成为2050年全球第五大死因，构成全球重大的健康负担（Haynes等，2014；Herrington等，2026）。
肾纤维化被认为是CKD进展的基本病理特征和最终共同通路，最终导致肾功能不可逆丧失（Huang等，2023；Miguel等，2025）。越来越多的证据表明，代谢紊乱、炎症和免疫失调等多种损伤刺激可汇聚于纤维化信号通路，凸显肾纤维化作为CKD关键治疗靶点的重要性（Abbad等，2025；Huang等，2023；Yin等，2026）。尽管肾保护疗法已取得进展，但能够直接阻止或逆转已建立肾纤维化的有效干预手段仍然有限（Abbad等，2025）。此外，持续炎症与多种受调控的细胞死亡通路相互作用，从而在纤维化进展过程中放大肾损伤和细胞外基质沉积（Li等，2026；Tian等，2026）。
细胞焦亡是一种在肾纤维化中起关键作用的促炎型受调控细胞死亡，涉及炎症小体诱导的caspase激活和gasdermin切割，导致膜孔形成和炎症介质释放（Gao等，2025；Shi等，2015）。细胞焦亡还建立了一个自我持续的炎症-纤维化循环，其中损伤相关分子模式和细胞因子激活免疫细胞和成纤维细胞，导致细胞外基质（ECM）沉积增加和组织重塑（Song等，2021；Tian等，2026）。实验证据进一步表明，焦亡性细胞死亡还通过释放促纤维化介质促进肾纤维化（Wu等，2023；Yin等，2025），凸显其致病意义。
核因子-κB（NF-κB）信号通路对调控细胞焦亡至关重要。Toll样受体/NF-κB通路的激活启动炎症小体关键组分的转录，包括NOD样受体家族pyrin结构域富含蛋白3（NLRP3）和促炎细胞因子，促进炎症小体组装和焦亡激活（Ram等，2023）。鉴于NF-κB连接炎症信号与炎症小体激活，NF-κB-细胞焦亡轴作为连接炎症与肾纤维化的重要机制桥梁（Kaszycki和Kim，2025）。重要的是，细胞焦亡由涉及炎症反应、炎症小体激活和下游效应分子的复杂信号网络调控。这种复杂性意味着仅调控单一信号通路可能不足以实现最佳治疗效果，多靶点策略越来越多地被认为是有效干预肾纤维化的必要条件（Tian等，2026）。
中药在治疗复杂疾病方面具有独特优势，这归因于其多靶点特性。根据中医理论，进行性CKD通常与"阳虚血瘀"相关，这被认为反映了温煦和转化功能受损以及血液循环持续受阻。据此，温阳活血的治疗策略长期以来一直被用于管理具有进行性纤维化改变的慢性肾脏疾病（Xin等，2023）。温阳消癃方（WXD）是基于此治疗原则从长期临床实践中开发的用于治疗CKD的中药方剂（Lin等，2026）。在临床实践中，WXD主要以口服汤剂形式给药，并作为CKD标准治疗的辅助手段使用，尤其适用于具有传统"阳虚血瘀"证候的患者（Zhou等，2024）。既往临床和实验研究表明，WXD可改善肾功能并减轻肾纤维化，部分通过抑制转化生长因子-β（TGF-β）/Smad3信号和调节巨噬细胞极化实现（Lin等，2022，2026；Zhou等，2024）。这些发现为进一步研究WXD是否也中断肾纤维化过程中的炎症相关受调控细胞死亡提供了合理依据。
然而，既往关于WXD的研究主要集中于经典促纤维化信号和巨噬细胞介导的炎症，而其对肾小管上皮细胞受调控细胞死亡的影响仍知之甚少。特别是，WXD的抗纤维化作用与NF-κB及细胞焦亡相关信号变化之间的关系尚不清楚。此外，可能参与调控此炎症-焦亡网络的血吸收成分尚未被系统表征。解决这些空白可以为WXD在CKD相关肾纤维化中的传统和实验应用提供更完整的机制解释。
我们研究了WXD的抗纤维化作用是否与NF-κB及细胞焦亡相关信号变化有关。我们在单侧输尿管梗阻（UUO）小鼠和转化生长因子-β1（TGF-β1）/肿瘤坏死因子-α（TNF-α）刺激的HK-2细胞中评估了WXD的作用，整合了肾脏转录组学与基于血清药物化学的网络药理学，并使用坏死磺酰胺（NSA）和脂多糖（LPS）进行了药理学干扰的细胞反应研究。
章节摘要 药品和试剂 缬沙坦胶囊（80 mg/粒；Novartis Pharma AG，巴塞尔，瑞士）；戊巴比妥（PA0003，Prosperich，广州，中国）；DMEM/F12培养基（PM150310，Procell，武汉，中国）；胎牛血清（FBS，164210，Procell）；重组人TGF-β1（HY-P70543，MedChemExpress，美国新泽西州蒙茅斯交汇点）；重组人肿瘤坏死因子-α（TNF-α，HY-P78527，MedChemExpress）；青霉素-链霉素溶液（P.S.，PB180120，Procell）；脂多糖（LPS，60748 ES，Yeasen
WXD对UUO小鼠生化指标和全身炎症的影响 实验设计和治疗时间表见图1A。UUO手术后，梗阻侧肾脏表现出明显的形态增大和病理改变。同时，UUO小鼠体重显著降低。给予缬沙坦和WXD部分缓解了这些改变（图1B-D）。UUO小鼠肾脏指数显著升高，而治疗后明显降低了这一升高（图1E）。UUO小鼠脾脏重量升高
讨论 在本研究中，WXD减轻了UUO小鼠的肾组织病理损伤和ECM沉积。与既往报道一致，UUO与明显的结构损伤和纤维化重塑相关（Niu等，2025；Zhou等，2022）。WXD减轻了这些改变，为其在该模型中的抗纤维化作用提供了主要证据。治疗还降低了血清肌酐（Cre）、尿素氮（BUN）和尿蛋白浓度。值得注意的是，这些保护效果与观察到的…
结论 总之，本研究提供了临床前证据表明WXD通过与NF-κB和细胞焦亡相关信号变化相伴随而减轻肾纤维化。这一结论得到了整合转录组学和基于血清药物化学的网络药理学分析、分子检测和细胞损伤检测，以及使用NSA和LPS进行的功能干扰的支撑。综合而言，这些发现支持了WXD的临床前抗纤维化潜力，并提供了一个整合框架…
CRediT作者贡献声明 吴有： 撰写-初稿，可视化，方法学，调查，概念化。韩亦晓： 撰写-初稿，可视化，方法学，调查。王家辉： 撰写-审阅与编辑，调查。杜利静： 方法学，数据整理。Younes Zaid： 撰写-审阅与编辑。王正春： 撰写-审阅与编辑。林晓萌： 方法学，数据整理。蔡旭东： 概念化。彭鑫： 指导，资金获取，概念化。
伦理声明 本研究按照ARRIVE（动物研究：体内实验报告）指南进行。本研究经国科宁波生命科学和卫生产业研究院机构动物护理和使用委员会批准。（批准号：GK-2024-XM-1094）
伦理批准 所有动物实验均按照ARRIVE指南和《实验室动物护理和使用指南》进行，并获得了国科宁波生命科学和卫生产业研究院机构动物护理和使用委员会的批准（批准号：GK-2024-XM-1094）。
资助 本研究由以下项目资助：宁波顶尖医疗卫生研究计划 （2022030309）；浙江省"先锋"和"领雁"研发计划 （2023C03038）；中国浙江省自然科学基金联合基金 （LBZ24H270001）；宁波市重大研发计划项目 （2022Z135）以及浙江省博士后研究择优资助计划 （ZJ2025174）。
利益冲突声明 作者声明不存在任何已知的竞争性经济利益或个人关系，这些利益或关系可能影响本文所报告的工作。
致谢 作者感谢Biomarker Technologies Corporation在RNA-seq测序和分析方面提供的帮助。作者还感谢
BioRender.com 在本文章示意图创建方面提供的支持。
吴有|韩亦晓|王家辉|杜利静|Younes Zaid|王正春|林晓萌|蔡旭东|彭鑫
