意大利野生两栖类与爬行类传染病证据的系统性综述：区分宿主疾病、病原体发生与阴性调查

《International Journal for Parasitology: Parasites and Wildlife》：Infectious diseases in Italian amphibians and reptiles: state of the art and systematic review

　　

疾病证据涉及意大利的16个宿主分类单元（host taxa）和13个病原实体（pathogen entities）。两栖类（amphibians）占49项研究中的39项；仅10项涉及爬行类（reptiles）。病原体检测覆盖16个意大利地区；疾病证据仅覆盖8个。六种具有欧洲相关性的病原体在符合条件的意大利文献中缺失。证据过于不均衡，无法比较病原体、宿主或地区之间的疾病负担。

传染病（infectious diseases）日益被认为是野生动物种群下降和灭绝的重要驱动因素，也是生物多样性危机中值得关注的组成部分。两栖动物（amphibians）目前是全球最受威胁的脊椎动物类群，约41%的物种被认为面临灭绝威胁，其中 Batrachochytrium dendrobatidis (Bd，一种两栖类致病真菌)、Batrachochytrium salamandrivorans (Bsal，一种蝾螈致病真菌) 和 ranaviruses（蛙病毒）被视为主要感染威胁，其影响从亚临床感染到严重死亡事件、局部灭绝和灭绝风险升高不等。爬行动物（reptiles）在保护生物学和野生动物健康中历史上受到较少关注，但同样广泛下降，超过五分之一受评估物种全球受威胁，且真菌、病毒和细菌病原体可能对野生种群构成额外但仍未充分表征的压力。解读自由生活两栖和爬行动物传染病证据常较困难，因为疾病事件可能仅为机会性检测，尸体可能发现较晚或未被发现，病理检查并非总能实施，且不同研究诊断策略的证据强度差异很大。由此产生的文献可能代表根本不同的流行病学情况：宿主层面传染病、病原体发生但无疾病记录，或靶向监测中调查了病原体但未检出。在爬行动物中，科学文献长期偏向圈养动物，自由生活种群健康相对被忽视。即使在两栖动物中，尽管疾病导向研究体量更大，下降相关文献仍存在区域偏倚，且常未转化为有效保护行动。因此，任何野生爬虫 fauna 传染病综合必须仔细区分宿主层面疾病证据与单纯病原体检出，同时认识到发生数据和阴性调查在严格流行病学框架中的监测价值。意大利是欧洲爬虫多样性和特有性最高的国家之一，其爬虫 fauna 目前包括超过100种两栖和爬行动物。最新国家红色名录评估在意大利两栖和爬行动物中识别出2种极危、15种濒危和15种易危分类单元。然而，关于自由生活意大利两栖和爬行动物感染因子的文献在宿主类群、病原体和地区间分布不均。与更广泛的国际文献一样，意大利的两栖动物也比爬行动物受到更多关注，尤其是 Bd。即便如此，野生意大利两栖动物中 Bd 感染的流行病学意义仍存在重要不确定性，Bsal 在本地蝾螈中的证据尤其有限。同时，其他病原体的新证据开始出现，包括 Piedmont 地区 Rana temporaria 大规模死亡事件后首次对 CMTV-like ranavirus 进行地理定位检测，而全国性筛查最近才开始阐明 Ophidiomyces ophidiicola (Oo，一种蛇真菌病原体) 在意大利蛇类中的分布。意大利文献已包含关于野生爬虫 fauna 感染因子的有用信息，但分散在局部调查、机会性筛查、死亡调查和病原体聚焦研究中，这些研究在采样设计、宿主覆盖、诊断方法和证据强度方面差异显著。有些研究描述宿主疾病，另一些报告病原体检测但无相关病理表现，还有些记录靶向调查中未检测到目标病原体，或涉及对爬虫 fauna 致病意义不确定的微生物，使现有证据难以作为连贯整体解释。因此，意大利目前缺乏全国性综合，需要澄清哪些感染因子已在野生意大利爬虫 fauna 中记录，哪些与疾病相关，哪些记录更适合解释为单纯病原体发生或阴性监测发现。本研究旨在提供这一意大利综合，聚焦国家背景以最大化流行病学分辨率，并在一致的流行病学框架内组织现有文献，区分已记录的宿主层面疾病事件、病原体发生记录和未报告检测证据的调查。后两者聚焦于在欧洲爬虫 fauna 中有记录发生且对至少一个欧洲两栖或爬行动物宿主具有致病相关性的病原体。该工作还旨在澄清哪些感染因子已在意大利与野生爬虫 fauna 疾病相关。综述映射文献中的宿主分类单元、病原体、地点和诊断方法，从而识别未来监测和实地调查相关的主要分类学、地理和方法学缺口。研究人员开展了意大利聚焦的系统性综述，并前置专家信息评估的欧洲文献评价，以定义欧洲纳入框架。研究遵循 PRISMA 2020 声明，检索 Scopus、PubMed 和 Web of Science Core Collection，从数据库创建至2026年7月11日，并补充 Google Scholar 检索和参考文献手动筛选至2026年7月30日。预设三个结果类别：Category 1 为宿主层面传染病记录，Category 2 为病原体发生记录，Category 3 为无检测证据的病原体调查。纳入标准为原始研究、涉及意大利自由生活两栖和/或非海洋爬行动物，并至少含有一个符合三个预设类别之一的记录。无语言限制。圈养、宠物、养殖、动物园、康复或其他非自由生活动物研究被排除。对 Category 1 记录，研究人员另行评估病原体-疾病关联确定性，分为 confirmed、presumptive 和 suspected。方法学评估采用五个域：D1 人群报告、D2 材料与诊断报告、D3 结果报告、D4 时空可追溯性、D5 疾病描述，分别评分为 Yes=2、Partial/unclear=1、No=0，并计算适用域总分百分比，High 为至少75%，Moderate 为50-74%，Low 为低于50%。数据合成以描述性为主，未进行 meta 分析或推断性假设检验。关键技术方法不超过250字概括为：采用意大利聚焦系统性综述，前置专家信息评估欧洲文献，建立欧洲纳入框架，识别在欧洲自由生活爬虫 fauna 中有记录发生且对至少一个欧洲两栖或非海洋爬行动物宿主有致病相关性的病原实体。遵循 PRISMA 2020，检索 Scopus、PubMed、Web of Science Core Collection（数据库创建至2026年7月11日），补充 Google Scholar 和参考文献手动筛选（至2026年7月30日）。预设 Category 1、Category 2、Category 3 三类结果，并按层级分配记录。对 Category 1 进行病原体-疾病关联确定性分级。方法学评估涵盖五个域并分级 High、Moderate、Low。数据合成描述性，未做 meta 分析。研究结果如下。3.1 欧洲纳入框架：专家信息评估产生预设纳入框架，包括9个两栖类和7个非海洋爬行类宿主组条目；由于 ranaviruses 在两个宿主组部分均出现，16个条目对应15个不同病原实体。3.2 研究选择：数据库搜索识别675条记录，去重后273条进入标题和摘要筛选，排除221条，52条进行全文评估；2条无法获取，50条评估中11条排除、39条符合纳入。补充靶向搜索识别12条可能相关报告，1条无法获取、1条全文评估后排除、10条符合纳入。最终49项研究纳入系统性综述并用于数据提取。3.3 纳入证据特征：49项研究中39项（79.6%）涉及两栖类，10项（20.4%）涉及非海洋爬行类；发表时间跨度为2003-2026年，2022-2026年有19项（38.8%）。研究设计以横断面调查最常见（17/49，34.7%），其次为混合设计（10/49，20.4%）和纵向调查（9/49，18.4%）；死亡或暴发调查5项，病例报告或系列4项，档案或博物馆研究3项，其他1项。49项研究产生434条提取的流行病学记录，中位数为每项研究3条。其中63条（14.5%）为 Category 1，79条（18.2%）为 Category 2，292条（67.3%）为 Category 3。协调数据集包括52个分析宿主分类单元，其中32个两栖类和20个非海洋爬行类，以及16个分析病原实体，形成84个调查的宿主-病原体组合。21个组合（25.0%）含 Category 1 疾病证据，14个（16.7%）达 Category 2 阳性发生但无 Category 1 证据，49个（58.3%）仅由阴性调查代表。宿主水平上，52个分析分类单元中16个（30.8%）有 Category 1 证据，9个（17.3%）有阳性发生但无疾病证据，27个（51.9%）仅由阴性调查代表。研究努力集中在少数病原实体：Bd 在25/49项研究（51.0%）中调查，占434条记录中的203条（46.8%）；Bsal 在6项研究（12.2%）中调查，占23条记录（5.3%）；Oo 和 ranaviruses 各在5项研究（10.2%）中调查，分别占151条（34.8%）和6条（1.4%）记录；Amphibiocystidium spp. 在4项研究（8.2%）中调查，占13条记录（3.0%）；RaHV3-related viruses 在3项研究（6.1%）中调查，占3条记录（0.7%）；其余分析实体各由1或2项研究、1至8条记录代表。Bd 和 Oo 合计占434条提取记录中的354条（81.6%）。16个分析病原实体中13个有 Category 1 疾病证据，而 Bsal、Paranannizziopsis spp. 和 testudinid alphaherpesviruses 仅由阴性调查代表。阳性证据网络包括35个不同宿主-病原体关联，涉及25个分析宿主分类单元和13个病原实体。最强关联为 Bd-Pelophylax spp.，由7项不同纳入研究支持；Bd-Euproctus platycephalus 和 Bd-Mesotriton alpestris 各由4项研究支持。爬行类中最强阳性关联为 Oo-Natrix tessellata，由3项研究支持，其次为 Oo-Natrix helvetica/Natrix natrix，由2项支持。宿主证据基础不均：Pelophylax spp. 出现在9项研究中，Salamandra salamandra 8项，Triturus carnifex 7项，而多数分析宿主分类单元出现在明显较少研究中。3.4 证据的地理分布：409/434条记录（94.2%）可归属单一意大利地区；4条（0.9%）无地区归属，21条（4.8%）涉及多个不可分离地区。所有20个意大利地区至少有一条地区解析记录。研究努力地理分布显著异质，Sardinia 贡献研究最多（13项），其次为 Piedmont（11项）、Liguria（10项）和 Lombardy（9项），而 Aosta Valley、Apulia、Marche 和 Sicily 各仅1项。地区宿主覆盖同样不均，Piedmont 调查23个不同分析宿主分类单元，Sardinia 16个，Liguria 15个，Lombardy 13个。病原体在20个地区中的16个被检测到，而 Category 1 疾病证据仅在8个地区有地区解析记录：Friuli-Venezia Giulia、Lombardy、Piedmont、Sardinia、Trentino-Alto Adige、Tuscany、Umbria 和 Veneto。Aosta Valley、Apulia、Marche 和 Sicily 仅由阴性地区解析调查代表。Lombardy 检测到的分析病原实体多样性最高（6个），Piedmont 其次（5个），Tuscany 为3个。与 Category 1 疾病证据相关的病原实体多样性在 Lombardy 为6个，Piedmont 为5个，Sardinia、Tuscany 和 Umbria 各2个，其余有疾病证据地区各1个。欧洲纳入框架的15个病原实体中，9个（60.0%）已在自由生活意大利爬虫 fauna 中调查。6个有 Category 1 疾病证据：amphibian dermocystids、Bd、Mycoplasmopsis agassizii 及相关龟分枝杆菌、Oo、ranaviruses 和 RaHV3-related viruses。Bsal、Paranannizziopsis spp. 和 testudinid alphaherpesviruses 已被调查但仅由阴性发现代表。其余6个框架实体，即 bufonid herpesvirus 1、ranid herpesvirus 5、Saprolegnia spp.、Spirorchis spp.、Strigea robusta 和 Torchivirus atorpi，未在纳入的意大利文献中代表。3.5 传染病证据与诊断方法：协调重叠关联记录后，63条 Category 1 记录对应57个疾病证据层，涉及16个分析宿主分类单元和13个分析病原实体。这些层中23个（40.4%）为 confirmed，21个（36.8%）为 presumptive，13个（22.8%）为 suspected。Oo 占疾病证据层最多（15/57，26.3%），Bd 紧随其后（14/57，24.6%）；Amphibiocystidium spp. 占9个（15.8%），Aeromonas spp. 占5个（8.8%）；Clinostomum complanatum 和 ciliated protist-like agent 各3个，M. agassizii 及相关龟分枝杆菌2个，其余实体各1个。确定性分布因疾病相关实体而异：Amphibiocystidium spp. 的9个层全部为 confirmed；Oo 有6个 confirmed 和9个 presumptive，无 suspected；Bd 分布更广，包括4个 confirmed、3个 presumptive 和7个 suspected；Aeromonas spp. 的5个层包括4个 presumptive 和1个 suspected。疾病证据在分类学上集中但涉及多个病原体群：Rana temporaria 广度最大，Category 1 证据涉及4个不同分析病原实体，Pelophylax spp. 和 Trachemys scripta 各涉及2个实体，其余受影响分析宿主各与1个病原实体相关。诊断方法在研究水平汇总：分子技术最常报告，出现在41/49项研究（83.7%），其次为组织病理学18项（36.7%）和显微镜10项（20.4%）；培养或分离用于4项研究（8.2%），其他诊断方法3项（6.1%），免疫检测2项（4.1%）。3.6 方法学评估：49项纳入研究中44项（89.8%）总体方法学支持为 High，5项（10.2%）为 Moderate，无研究为 Low。域水平评估显示，疾病描述（D5）完全满意比例最高，26项适用研究中24项（92.3%）为 Yes，2项（7.7%）为 Partial/unclear。人群报告（D1）在43/49项研究（87.8%）中为 Yes，6项（12.2%）为 Partial/unclear。材料与诊断报告（D2）和时空可追溯性（D4）各在38项研究（77.6%）中获 Yes，11项（22.4%）为 Partial/unclear。结果报告（D3）完全满意比例最低，30项研究（61.2%）为 Yes，19项（38.8%）为 Partial/unclear。无适用研究在五个评估域中获 No。讨论部分总结：意大利自由生活爬虫 fauna 传染病研究在宿主类群和病原体间发展不均。两栖类占纳入研究近五分之四，与欧洲对两栖动物疾病关注多于自由生活爬行动物一致。研究努力也高度集中于少数病原体：Bd 在49项研究中的25项被调查，Bd 和 Oo 合计占所有提取记录的81.6%。大型或重复的病原体特异性调查解释了研究努力差异的很大部分，而许多其他感染因子和宿主类群调查远少。疾病、病原体发生和阴性调查需要不同流行病学解释。84个调查宿主-病原体组合中，21个含 Category 1 疾病证据，14个仅达阳性发生，49个仅由阴性调查代表。57个协调 Category 1 层中，23个 confirmed、21个 presumptive、13个 suspected。Amphibiocystidium spp. 的9个层全部 confirmed，反映寄生虫在特征性皮肤病变中被证明并通过组织学或超微结构检查表征。在 Rana italica 七年纵向研究中，高疾病流行率未伴随可检测的个体存活或种群趋势负面影响，尽管感染前人口数据不可用。Bd 跨越所有三个确定性水平，与意大利文献从组织学记录的 chytridiomycosis 到现场证据中感染与宿主效应相关但病理信息不完整相符。Aeromonas spp. 主要为 presumptive，与现有病例材料一致：在 Tiberti (2011) 调查的死亡事件中，Aeromonas spp. 从受影响 Rana temporaria 蝌蚪中分离，其他感染原因的可能贡献未解决。因此，一个病原体积累的记录数不能独立于其包含的证据类型和强度来解释。记录密度对研究设计和采样广度尤为敏感。Bd 在25项研究中产生203条记录，反映二十年跨不同宿主、地点和流行病学设置的调查。Oo 提供更清晰例子：151条记录仅来自5项研究，主要跟随从局部检测到更广泛意大利蛇类监测的近期扩展。Di Nicola et al. (2025b) 的全国调查采样意大利22种蛇中的17种，记录 Oo 在多个北部地区，Natrix tessellata 贡献最多阳性检测，而后续对单一 N. tessellata 种群的工作结合重复采样、组织病理学和生态数据，在更细分辨率检查感染和疾病。Bd 和 Oo 在数据集中的数值突出主要映射监测和研究努力，而病原体流行率、疾病负担和保护影响需要单独证据。对于较少调查的病原体，稀疏证据可能既反映研究努力有限，也反映发生受限。与欧洲框架比较显示，15个保留病原实体中仅9个已在自由生活意大利爬虫 fauna 中调查。6个有 Category 1 证据，而 Bsal、Paranannizziopsis spp. 和 testudinid alphaherpesviruses 仅由阴性调查代表；另有6个实体无合格意大利记录。阴性调查和缺乏调查携带不同流行病学信息。对于 Bsal，意大利蝾螈中的重复阴性调查将推断限制于实际采样的宿主种群、地点和时期，而欧洲其他地区暴发已在 Salamandra salamandra 中造成严重死亡和局部灭绝。对于 Paranannizziopsis spp.，意大利文献同样限于阴性调查，而西班牙自由生活 Vipera seoanei 中已记录严重皮肤疾病和可能致命感染。在无合格意大利记录的实体中，BfHV1 值得关注，因为 BfHV1 相关皮炎和死亡已在瑞士自由生活 Bufo bufo 中记录，而更近期欧洲评估在更广地理范围识别了分子确认或临床可疑病例。即使对 Bd，仍存在若干宿主缺口。例如，未识别到针对 Discoglossus pictus、Salamandrina perspicillata、Xenopus laevis 或 Proteus anguinus 的合格意大利 Bd 调查，也无记录专门归因于 Bufo spinosus。该缺口对 D. pictus 尤其相关，西班牙已报告 Bd 相关死亡、显著表皮受累和极高感染负荷；对 B. spinosus，长期现场数据将 Bd 感染与存活降低相关联。归化 X. laevis 因不同原因值得关注，因为引入种群可维持 Bd 感染，形成对同域本地两栖动物的潜在暴露。对于 Bsal，Dondero et al. (2023) 发现意大利19种蝾螈中仅9种有现场筛查数据，尽管15种基于实验证据或系统发育推断被认为高度易感；在特有种中，11种里的10种被分配高度易感。后续纳入本综述的意大利研究通过增加 Salamandra lanzai 和 Speleomantes ambrosii，将有合格 Bsal 现场筛查数据的蝾螈物种从9种增至11种，同时大幅增加 Mesotriton alpestris 和 Salamandra atra 采样。尽管如此，19种中仍有8种无合格 Bsal 现场调查。其中 Salamandrina perspicillata 和 Speleomantes genei 在实验暴露下显示致死易感性，而 S. flavus、S. italicus 和 S. supramontis 被推断为高度易感。生态适宜性在未采样宿主间并不等同，应与易感性一起考虑以优先进一步筛查。对于 Oo，全国意大利调查已包括22种蛇中的17种，但采样机会性且类群和地区不均，病原检测集中在5个类群，尤其是 Natrix tessellata。仅扩展 Oo 监测以完成物种覆盖不如在代表性不足种群和地理区域增加采样信息丰富，尤其当宿主发生和环境条件使病原暴露合理时。一些新兴病原体尽管具有监测相关性，仍在纳入框架之外。例如，不同于 Pathogenic Perkinsea Clade (PPC) 的 Perkinsea 谱系已在野生欧洲蝌蚪中检测到，而 PPC 与北美严重 Perkinsea 感染和大规模死亡相关，已在英国圈养繁殖的 Hyla arborea 中鉴定。因此，意大利不明原因蝌蚪死亡调查可能受益于 Perkinsea 检测，并在检测到时进行分子表征以区分 PPC 与致病性不确定谱系。地理覆盖同样不均，尽管所有20个意大利地区均有代表。贡献研究数从 Sardinia 的13项到 Aosta Valley、Apulia、Marche 和 Sicily 的各1项，宿主覆盖从 Piedmont 的23个分类单元到其他地区更窄组合。地区研究数未直接转化为更广病原证据：Lombardy 有9项贡献研究，含6个检测病原实体和6个与 Category 1 疾病证据相关实体，而 Sardinia 尽管研究数最多，病原证据基础多样性较低。许多意大利文献是病原体或宿主特异性，因此重复调查单一病原体可增加地理覆盖而不提供其他感染威胁的可比信息。Aosta Valley、Apulia、Marche 和 Sicily 尤其清楚说明相反问题：每个仅由一项报告仅阴性调查的研究代表。这些地区阴性发现仅建立所调查病原体在采样宿主和情况下未检测到，对区域规模传染病发生推断基础很少。疾病证据仅在8个地区记录，Lombardy 和 Piedmont 记录的更大多样性应在更广泛和异质调查背景下解释。现有数据未建立任一地区内在更大的病原多样性或疾病重要性。诊断方法进一步影响可推断内容。分子方法用于49项研究中的41项，使广泛监测和敏感病原检测成为可能，而组织病理学报告18项，显微镜10项。每种方法价值取决于所解决的流行病学问题。分子检测可以高分析敏感性建立宿主相关病原体发生，但疾病归因需要将病原体与观察到的病理过程联系的证据，可能来自兼容病变、病灶内检测、临床或死亡模式及流行病学一致性等不同组合。因此，丰富的分子支持发生记录本身不意味着强疾病归因；Category 1 内确定性取决于更广宿主水平证据。方法学评估总体有利，49项中44项获 High 总体支持，无 Low，但各域报告完整性不一致。疾病描述在26项适用研究中24项完全满意，完整结果报告在49项中30项实现，材料与诊断报告及时空可追溯性在38项实现。不完整的数值、空间或方法学报告可显著减少从其他健全现场调查中可恢复的流行病学信息，尤其当证据必须跨宿主分类单元、病原体、地区或采样时期比较时。未来意大利监测将从优先化和整合中受益，而非仅增加筛查的宿主-病原体组合数。能够捕获意外发病或死亡的一般监测应与针对预定义威胁的靶向计划并行，因为两者解决不同流行病学问题并在野生动物健康系统中提供互补信息。对于 Bsal，早期检测仍是主要目标：意大利尚无阳性现场检测记录，剩余宿主缺口支持在高宿主易感性和环境适宜性重合处进行靶向监测，并在实地活动期间严格生物安全。Oo 需要不同重点，因为病原体存在和 ophidiomycosis 已在意大利北部建立。重复监测受影响种群，尤其 Natrix tessellata，可比额外一次性筛查更有效解决持续性、传播、从感染到疾病进展及可能种群水平后果。当临床发现提示特定感染原因时，死亡调查也保留特别价值，因为更广泛诊断测试可帮助评估替代或并发病因。该方法应用于最近意大利阿尔卑斯 Rana temporaria 大规模死亡事件，其中 ranavirus 兼容临床迹象促使靶向调查，同时补充诊断分析用于评估其他潜在原因。在可行时，将病原体检测嵌入长期爬虫监测，并保留宿主状态、地点、时间、临床发现和采样设计的可比信息，将改善跨季节、种群和疾病事件的解释和可比性。解释主要受基础证据基础异质性限制。纳入文献结合横断面调查、纵向调查、死亡事件、病例报告、档案材料和混合设计，采样强度、宿主覆盖、诊断策略及时空分辨率差异很大。因此，已发表疾病和阳性记录计数描述可用证据，但不能解释为感染流行率、疾病发病率或种群水平影响估计。机会性采样可能优先代表可接近物种、地点或明显受影响动物，而靶向阴性调查取决于采样宿主、时间、样本量和诊断敏感性，因此只能在其特定采样背景下限定病原体发生。历史和博物馆材料扩展监测时间范围，对 Oo 尤其有信息，但回顾性记录可能提供比当代现场研究更不完整的流行病学元数据。即使在总体方法学支持高的研究中，不完整结果报告和时空信息也减少可用于综合的细节水平。病原体记录计数差异可能反映采样强度和报告实践变化，独立于实际分布或疾病影响。数据库搜索策略优先特异性，将宿主和病原/疾病术语限制在标题和作者关键词。尽管不能完全排除遗漏研究，补充 Google Scholar 搜索和参考文献筛选帮助最小化风险。研究选择、数据提取和方法学评估由单一作者进行，以保持预定义标准一致应用。重复检查和后续其他合著者对研究选择及解释的审查帮助最小化潜在错误和不一致，但缺乏独立重复评估仍是限制。专家信息欧洲框架定义了意大利综合中病原体发生和阴性调查的范围；其并非旨在作为所有欧洲爬虫 fauna 报告感染因子的单独系统性综述。由此产生的国家基线区分宿主水平疾病、病原体发生和靶向阴性调查，同时识别相关证据仍缺失之处。研究结论翻译：传染病已在意大利多个两栖类和爬行类分类单元中有记录，但现有证据无法对疾病频率或种群水平影响进行可靠的国家估计。未来进展将取决于更平衡的分类学和地理覆盖、在具有流行病学信息价值处进行可重复采样，以及将病原体检测与临床、病理和种群水平观察更紧密整合。更完整的纵向和宿主水平证据将使监测从记录存在哪些感染因子，转向确定它们在哪里持续、感染何时导致疾病，以及相关效应是否影响种群动态。