水飞蓟与雷司美酮在MCD饮食诱导的代谢功能障碍相关脂肪性肝炎大鼠模型中的代谢介导药食相互作用

《Biochemical Pharmacology》：Metabolism-mediated herb-drug interaction between milk thistle and resmetirom in MCD diet-induced metabolic dysfunction-associated steatohepatitis rat model

　　**摘要**Resmetirom是一种肝脏靶向甲状腺激素受体-β（THR-β）激动剂，用于治疗代谢功能障碍相关脂肪性肝炎（MASH），而水飞蓟则被广泛用作护肝补充剂。本研究评估了水飞蓟补充剂联用是否会改变resmetirom的代谢、全身暴露量及药理反应。采用经验证的液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）方法定量测定大鼠血浆和微粒体样品中的resmetirom。雄性Sprague-Dawley大鼠通过甲硫氨酸和胆碱缺乏饮食（MCD）诱导MASH模型，分别给予溶媒对照、resmetirom（8 mg/kg）、水飞蓟补充剂（相当于总水飞蓟宾A+B 100 mg/kg）或两者联合，连续给药8天。水飞蓟使resmetirom的C_max增加17%，AUC_0-t增加37%，AUC_0-∞增加32%，同时使表观口服清除率降低25%。在大鼠肝微粒体中，水飞蓟补充剂提取物（相当于总水飞蓟宾A+B 50 μM）使resmetirom的消除速率常数从0.0021降至0.0002 min^?1，微粒体半衰期从330.84延长至3914.31 min，内在清除率从3.88降至0.39 μL/min/mg蛋白。联合用药组在肝酶、胆红素、血脂参数、相对肝重、体重恢复及肝脏组织学方面的改善均优于任一单药治疗组。这些发现提供了由代谢介导的水飞蓟-resmetirom相互作用的临床前证据，该相互作用可增加resmetirom的暴露量，并伴随大鼠中增强的药效动力学反应。**引言**代谢功能障碍相关脂肪性肝病（MASLD）及其进展性炎症形式——代谢功能障碍相关脂肪性肝炎（MASH），是慢性肝病的主要原因，并可进展为纤维化、肝硬化及肝脏相关并发症。Resmetirom是一种口服活性、肝脏靶向的甲状腺激素受体-β（THR-β）选择性激动剂，旨在改善肝脏甲状腺激素信号传导，同时限制全身甲状腺相关效应[1], [2]。THR-β激活可促进肝脂肪酸氧化、线粒体功能及胆固醇代谢[1]。在3期MAESTRO-NASH临床试验中，resmetirom改善了MASH消退和纤维化，并降低了低密度脂蛋白胆固醇[2]，从而获批用于成人非肝硬化MASH伴中度至重度纤维化[3]。Resmetirom治疗应用日益广泛，其体内处置和相互作用风险在临床上的重要性也日益凸显。Resmetirom经历广泛的肝脏代谢，其中CYP2C8主要参与其主要循环代谢物MGL-3623的生成[4]。与此途径一致，与中度CYP2C8抑制剂氯吡格雷联用使resmetirom峰浓度和全身暴露量分别增加约1.3倍和1.7倍，而强效CYP2C8抑制剂则不推荐使用[5]。Resmetirom同时也是OATP1B1和OATP1B3的底物，提示肝代谢和摄取可能影响其体内处置[4], [5]。因此，能够降低微粒体代谢转化的联合用药可能改变resmetirom的体内处置，并可能影响其药理反应的幅度。在草药和膳食补充剂的背景下，这种可能性尤其值得关注。慢性代谢和肝脏疾病患者常在常规药物治疗之外使用植物制剂，通常期望改善肝脏健康。水飞蓟（*Silybum marianum* [L.] Gaertn. [菊科]）被慢性代谢和肝脏疾病患者广泛作为护肝补充剂服用[6]。其富含黄烷木脂素的提取物——水飞蓟素（silymarin），含有多种具有药理活性的黄烷木脂素，尤其是水飞蓟宾A和水飞蓟宾B。在水飞蓟命名法中，水飞蓟宾（silibinin）通常指含有大约等量水飞蓟宾A和水飞蓟宾B的半纯化混合物，而完整水飞蓟素提取物的组成则更为复杂[7]。为避免暗示本研究中使用了纯化的水飞蓟宾，此处使用"总水飞蓟宾（A+B）当量"这一术语来指代所测试商业水飞蓟制剂中经分析定量测得的水飞蓟宾A和水飞蓟宾B的合计含量。这些成分连同水飞蓟中的其他黄烷木脂素，可能通过影响代谢酶和转运体来改变药物体内处置[8], [9]。水飞蓟宾在这方面尤其相关。微粒体研究表明，水飞蓟宾可与多种CYP亚型相互作用并抑制CYP2C8活性；CYP2C8本身也参与水飞蓟宾的氧化代谢[10]。使用标准化水飞蓟提取物进行的研究同样证明，在*体外*条件下，水飞蓟宾对包括CYP2C8在内的多种CYP酶具有浓度依赖性抑制作用[11]。使用标准化水飞蓟制剂的临床试验并未一致地重现*体外*实验预测的CYP抑制程度，这强调了黄烷木脂素暴露量、提取物组成、剂量及酶特异性易感性对最终相互作用的综合影响[11]。这种不一致性也反映了对植物-药物相互作用评估的一个更广泛的局限性：单独证明酶的抑制作用并不能确立该相互作用足以改变全身药物暴露量或其下游的药效动力学后果。Resmetirom对CYP2C8的依赖性，以及水飞蓟黄烷木脂素所报告的*体外*CYP2C8抑制潜力，为草药-药物相互作用提供了一个合理但尚未证实的机制基础。然而，尚不清楚微粒体转化降低是否会导致resmetirom暴露量改变及可测量的药效动力学后果。因此，本研究整合了甲硫氨酸和胆碱缺乏（MCD）饮食诱导的MASH模型中*体外*大鼠肝微粒体稳定性、*体内*药代动力学及药效动力学评估，以确定水飞蓟联用是否会改变resmetirom的代谢、全身暴露量及治疗反应。Resmetirom、其主要循环代谢物MGL-3623、水飞蓟宾A和水飞蓟宾B的化学结构见图1。**章节摘要****化学品与试剂**Resmetirom对照品（纯度≥99.9%）和水飞蓟宾对照品（纯度≥99.9%）购自MedChemExpress（美国新泽西州）。奥拉帕利（Olaparib）作为内标（IS）由Dr. Reddy's Laboratories（印度海得拉巴）作为赠品提供。大鼠混合肝微粒体购自SEKISUI XenoTech（美国堪萨斯城）。MCD饮食购自VRK Nutritional Solutions（印度浦那）。还原型辅酶Ⅱ（NADPH）四钠盐**LC-MS/MS方法学性能与生物分析验证**正离子电喷雾电离对resmetirom产生*m/z* 435.0的母离子，对奥拉帕利产生*m/z* 435.1的母离子。分别选择*m/z* 435.0 → 181.9和435.1 → 367.1的MRM跃迁用于检测resmetirom和内标（图2）。奥拉帕利和resmetirom的保留时间分别约为3.44和3.99 min，空白大鼠血浆中未见明显的内源性干扰（图3）。该方法在1-2000 ng/mL范围内呈线性。回算准确度为95.34%至99.57%，精密度为**水飞蓟补充剂与resmetirom之间的代谢介导药代动力学相互作用**本研究提供了水飞蓟与resmetirom之间存在相互作用的*体外*、药代动力学及药效动力学收敛性证据。标准化水飞蓟制剂联用使resmetirom的C_max增加约17%，AUC_0-t增加37%，AUC_0-∞增加32%，同时伴随表观口服清除率降低25%。这些药代动力学变化伴随肝损伤生化指标、脂质相关指标的更大改善**CRediT作者贡献声明****Siva Nageswara Rao Gajula：** 写作——审阅与编辑，写作——初稿撰写，可视化，监督指导，项目管理，方法论，调查研究，形式化分析，数据管理，概念构思。**Sravani Savana：** 方法论，调查研究。**Vamsi Yadav Saripilli：** 方法论，调查研究。**Lakshmi Vineela Nalla：** 写作——审阅与编辑，写作——初稿撰写，可视化，监督指导，项目管理，方法论，调查研究，形式化分析，概念构思。**资金支持**本研究未获得公共、商业或非营利部门基金会的任何专项资助。**利益冲突声明**作者声明不存在可能影响本文所述工作的已知竞争性经济利益或个人关系。**致谢**Lakshmi Vineela Nalla和Siva Nageswara Rao Gajula感谢印度GITAM大学（被视为大学）及其药学院，通过GITAM教职员种子基金（2025/0006和项目编号2024/0348）、行政协助以及本研究所需的各项支持和基础设施，提供的帮助。作者还感谢位于Visakhapatnam的GITAM跨学科转化研究计划研究单元（MURTI）提供的LC-MS/MS设备使用权。Siva Nageswara Rao Gajula | Sravani Savana | Vamsi Yadav Saripilli | Lakshmi Vineela Nalla