石三味青兰粉通过减轻NF-κB信号通路激活和caspase活性，缓解乙醇诱导的胃黏膜损伤

《Journal of Ethnopharmacology》：Shisanwei Qinglan Powder attenuates ethanol-induced gastric mucosal injury in association with reduced NF-κB signalling and caspase activation

　　•血清药物化学分析刻画了SQP的循环成分。•SQP保护GES-1细胞和小鼠胃黏膜免受乙醇损伤。•转录组学将SQP的作用与NF-κB和凋亡相关途径联系起来。•SQP抑制了IKKβ/IκBα/NF-κB的激活以及caspase-8/3的切割。•模拟结果支持TNF–bicuculline和CASP3–kaempferol复合物的稳定性。

引言
消化性溃疡疾病，包括胃溃疡和十二指肠溃疡，由于其复发性和出血、穿孔及幽门出口梗阻的风险，仍然是重要的胃肠道疾病（Wu等人，2021年）。幽门螺杆菌感染以及接触阿司匹林或非甾体抗炎药物是主要病因因素，而酒精和其他化学刺激物可以直接损害胃黏膜（Aguilar等人，2022年；Hawkey等人，2022年；Higgins等人，2025年；Hou等人，2022年；Hu等人，2023年；Kocsmar等人，2021年；Parigi等人，2022年；Shah等人，2021年）。在生理条件下，黏膜的完整性依靠黏液-碳酸氢盐屏障、持续的上皮修复、足够的微血管灌注、内源性抗氧化防御和受控制的免疫反应来维持（Adkins-Threats等人，2024年；Aguilar等人，2022年；Chen等人，2023年；Goldenring和Mills，2022年；Horowitz等人，2023年；Hou等人，2022年；Hu等人，2023年；Kapalczynska等人，2022年；Li等人，2024年；Marques等人，2021年；Parigi等人，2022年）。一旦这些保护系统受损，氧化应激和炎症会促进上皮细胞丢失并延缓组织修复，从而有利于黏膜糜烂和溃疡的形成（Chen，2021年；Forman和Zhang，2021年；Kehm等人，2021年；Li和Wu，2021年；Marchi等人，2023年；Morris等人，2022年；Pan等人，2022年；Sies等人，2024年；Vringer和Tait，2023年；Wen等人，2025年；Xu等人，2025年）。绝对乙醇诱导的胃损伤被广泛用于此目的，因为乙醇会迅速破坏黏液-上皮屏障和黏膜微循环，引发活性氧积累、脂质过氧化、线粒体功能障碍、炎症细胞募集和上皮细胞死亡（Han等人，2024年；Peng等人，2022年；van Loo和Bertrand，2023年；Vogler等人，2025年；Yan等人，2021年）。由此产生的损伤特征为出血、水肿、上皮脱落、炎症浸润和广泛侵蚀。尽管这种急性模型不能完全再现所有类型的人类消化性溃疡疾病的慢性发病机制，但它为评估对直接化学损伤的细胞保护作用及早期黏膜损伤所涉及的分子事件提供了一个可重复的系统。当前消化性溃疡疾病的管理依赖于质子泵抑制剂或钾竞争性酸阻滞剂的抑酸治疗、根除幽门螺杆菌、停止使用致溃疡药物以及内镜或外科干预处理并发症（Hang等人，2025年；Higgins等人，2025年；Xia等人，2024年；Zhang等人，2021年）。然而，抗菌耐药性、复杂的治疗方案、不良反应以及持续接触阿司匹林或非甾体抗炎药物可能会影响治疗效果或促进疾病复发。这些方法主要针对胃酸、感染和并发症，但没有特别针对伴随黏膜损伤的氧化应激、炎症和细胞死亡反应。由于成分的多样性，传统中药和民族药方可能同时影响这些过程中的多个方面，尽管其功效和机制需要严格的实验验证（Atanasov等人，2021年）。

八仙翁清兰粉（SQP）是一种市售的藏药方剂，传统上用于治疗与“脾虚胃寒”相关的胃肠道疾病，如上腹部胀痛、急性和慢性胃炎以及胃肠道溃疡相关症状。该方剂由13种药材组成，主要包括唐古特龙胆（Dracocephalum tanguticum Maxim.，甘草清兰）、索利多萝米（Dolomiaea souliei (Franch.) C.Shih，川木香；同义词Vladimiria souliei）、余甘子（Phyllanthus emblica L.）、石榴籽（Punica granatum L.，石榴籽）、长胡椒（Piper longum L.，毕巴）、姜（Zingiber officinale Roscoe，干姜）、豆蔻、芫荽果实以及几种特有的藏药成分，如八夏岗、乌头属（Meconopsis）和矮型独活属（Corydalis）植物。在藏医实践中，这种组合用于调节胃肠道功能、缓解腹痛和减少炎症不适。尽管支持其整体疗效的实验证据有限，但持续使用为其研究对胃黏膜损伤的影响提供了民族药理学基础。

SQP的几种主要植物成分具有与胃黏膜保护相关的药理特性。唐古特龙胆是一种特有的藏药植物，含有黄酮类、萜类和酚类成分，在实验系统中表现出抗氧化和抗炎活性。这些作用与减少氧化损伤和炎症介质的产生有关，但在胃溃疡模型中的直接证据尚不充分。川木香来源于索利多萝米根，长期用于治疗胃炎、胃溃疡和胃肠道疼痛。其特有的倍半萜内酯，特别是costunolide和dehydrocostus lactone，具有抗炎活性（Lin等人，2026年；Xu等人，2023年），并在多种实验条件下干扰IKK/IκBα/NF-κB信号通路（Guo等人，2024年；Lei等人，2022年；Son等人，2023年；Xu等人，2023年；Yu等人，2022年）。对生川木香和加工川木香的药理研究表明，它们对胃分泌、胃肠道运动和黏膜防御也有影响。余甘子的果实富含可水解的单宁、没食子酸衍生物和其他酚类化合物。实验研究表明，余甘子制剂可以增强胃黏液分泌、限制脂质过氧化并促进溃疡愈合，体现了其抗氧化和黏膜修复作用。毕巴是长胡椒的干燥果穗，是先前在SQP中检测到的化学标记物之一——胡椒碱的来源。据报道，胡椒碱可通过减少氧化损伤、提高抗氧化能力和保护胃黏膜屏障来减轻乙醇引起的胃损伤。干姜含有姜酚、姜辣素及相关酚类成分，姜提取物通过减少损伤形成、氧化应激和炎症反应来发挥保护作用。石榴和豆蔻的成分同样具有抗氧化、抗炎和调节胃肠道的作用，但具体情况因药用部位、提取方法和实验模型而异。这些发现为SQP的组成提供了药理支持，但不能直接推断出整个方剂的疗效或机制，因为成分之间的相互作用可能会显著改变生物活性。

SQP的多组分特性需要一种分析策略，将其特征化学组成与治疗相关的生物反应联系起来。化学分析可以确定制剂的成分谱，而血清药物化学分析可以识别给药后系统可用的原型化合物和代谢物（Yu等人，2021年）。然后，网络药理学可以组织吸收成分、候选靶标和疾病相关途径之间的关系（Grisoni等人，2021年；Peng等人，2022年；Tanoli等人，2025年）。转录组谱分析提供了一种独立的方法，用于确定治疗相关的基因表达变化是否与网络预测的过程一致（Heumos等人，2023年；Li和Wang，2021年）。结合药效学和分子实验，这些方法使证据从化学表征和系统暴露发展到途径优先排序和生物学验证。然而，网络邻近性和分子对接反映了潜在的关联性和结合可行性，而非直接的目标参与或分子因果关系（Ferruz等人，2022年）。

本研究使用绝对乙醇诱导的小鼠胃损伤模型和暴露于乙醇的GES-1细胞，探讨了SQP的胃保护作用和分子基础。首先进行了化学分析和血清药物化学分析，以表征SQP的成分并识别给药后可检测到的成分。随后整合了网络药理学、转录组谱分析和分子对接，以确定候选靶标和治疗相关途径。通过宏观损伤评估、组织病理学评估、生化测量以及体内和体外的分子验证，特别关注NF-κB介导的炎症和caspase-8/caspase-3相关的凋亡反应，检验了所得假设。本研究旨在为SQP的传统胃肠道应用提供实验支持，并明确其与急性乙醇诱导的黏膜损伤保护相关的生物反应。

**SQP提取物的制备**
八仙翁清兰粉（SQP）购自西藏申侯 pharmaceutical有限公司（批次号20250301，中国西藏）。对于化学分析和体外细胞实验，按照以下方法用80%乙醇提取SQP粉末：将1.00克SQP粉末与80%乙醇以1:15（g/mL）的固液比在40°C下通过超声处理三次，每次30分钟。

**SQP成分的化学分析和表征**
空白血清的LC–MS总离子色谱图在正负离子模式下主要显示内源性基质信号（图1A和B）。80%甲醇提取的SQP显示出复杂的色谱谱，多个峰分布在2.7至17.9分钟之间（图1C和D）。与空白血清相比，含药血清中出现了一系列额外的峰，这些峰在保留时间和质荷比上与SQP提取物的成分相对应（图1E和F）。

**讨论**
SQP显著减少了无水乙醇引起的急性胃损伤。改善表现在多个层面：宏观出血和侵蚀减轻，上皮和腺体结构得到更好保护，伴随的氧化和炎症反应也得到缓解。在GES-1细胞中观察到类似的效果，SQP提高了细胞存活率，促进了细胞迁移，并减少了乙醇暴露后的凋亡。这些效应与氧化和炎症平衡的改善、IKKβ/IκBα/NF-κB通路的激活降低以及caspase-8和caspase-3切割减少有关。

**作者贡献声明**
Fei Wang：可视化、验证、监督、项目管理。
Rui Wang：方法学。
Qingjia Ren：监督、验证、项目管理、资金筹集。
Jie Dou：监督。
Kanshen Ye：写作-审阅与编辑、写作-初稿、方法学、正式分析、数据管理。
Haoqin Li：软件、方法学、正式分析。
Zhizheng Qin：软件、方法学。
Zichen Zhu：软件、方法学。

**伦理声明**
本研究遵循ARRIVE（动物研究：体内实验报告）指南进行。本研究已获得中国药科大学动物伦理委员会的批准（批准编号YSL-202507075）。

**利益冲突声明**
作者声明没有已知的财务利益或个人关系可能影响本文报告的工作。

**致谢**
本研究得到了2026年西藏自治区科学技术计划——新藏药研发与藏药二次开发专项（XZ202601ZY0111）、国家自然科学基金青年基金（82404580）、江苏省自然科学基金（BK20231021）以及澳门青年学者计划（AM2024019）的支持。

**作者名单**
Kanshen Ye | Haoqin Li | Zhizheng Qin | Zichen Zhu | Rui Wang | Jie Dou | Qingjia Ren | Xiaoya Liu | Fei Wang