槲蕨 96% 乙醇提取物的抗炎及早期成骨潜力

《Journal of Ethnopharmacology》：Anti-inflammatory and early osteogenic potential of a 96% ethanol extract of Drynaria bonii

【字体：大中小】 时间：2026年10月20日 来源：Journal of Ethnopharmacology 6.8

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　　 •96%乙醇提取物显示出最强的TNF-α抑制活性。•使用96%乙醇提取物时，24小时足肿胀抑制率达到了79.0%。•96%乙醇提取物的早期钙相关染色程度最高。•通过核磁共振分离并鉴定了四种成分。•熊果酸和桦木醇显示出最有利的预测对接结果。引言Drynaria bonii H.

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96%乙醇提取物显示出最强的TNF-α抑制活性。
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使用96%乙醇提取物时，24小时足肿胀抑制率达到了79.0%。
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96%乙醇提取物的早期钙相关染色程度最高。
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通过核磁共振分离并鉴定了四种成分。
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熊果酸和桦木醇显示出最有利的预测对接结果。

引言

Drynaria bonii H. Christ（水龙骨科，Polypodiaceae），在当地被称为"石龙子"（T?c kè ?á），是一种附生药用蕨类植物，原产于东南亚包括越南在内的热带和亚热带森林中，通常生长在湿润常绿森林生态系统中的树干和岩石上（Loi, 1999; Ph?m Hoàng H?, 2000）。在形态上，其特征为匍匐状粗厚根茎，表面覆盖褐色鳞片；具二型叶，不育叶羽状深裂，能育叶叶片退化；能育叶背面孢子囊群排列成行（Ph?m Hoàng H?, 2000; Vo Van Chi, 2021）。该物种的根茎在越南传统医学中用于治疗骨折、扭伤、骨关节痛和肌肉骨骼无力（Loi, 1999; Ph?m Hoàng H?, 2000）。传统本草记载，其干燥根茎以煎剂或粉末形式口服用于骨折、扭伤和关节痛的治疗，当地实践也可能使用酒浸剂或研碎后外用敷贴处理创伤性肌肉骨骼疾病（Loi, 1999; Ph?m Hoàng H?, 2000; Vo Van Chi, 2021）。然而，现有记录大多是描述性的，缺乏详细的临床方案或系统病例记录，这限制了这些具体应用的民族药理学直接验证。这些用途为评估炎症相关反应和早期骨形成事件提供了民族药理学依据，但本身并不能确立直接的骨折愈合疗效。

对鹿角蕨属（Drynaria）属的化学成分研究报道了黄酮苷元和苷、酚酸、原花青素、三萜类化合物和植物甾醇（HUANG et al., 2012; Jin et al., 2022; Liang et al., 2010; Liu et al., 1992; Pham Thi Nhat Trinh et al., 2016; 2015; Shang et al., 2013; Trinh et al., 2020, 2011; Wang et al., 2011, 2008）。黄酮类化合物广泛与成骨细胞相关活性相关，而几种五环三萜类化合物可调节与骨修复微环境相关的炎症通路（Jin et al., 2022; Pang et al., 2020; Su et al., 2025; Wang et al., 2008, 2011; Zeng et al., 2020）。

大部分药理学证据是针对D. fortunei产生的，其提取物和黄酮类成分在细胞模型和去卵巢动物模型中促进了成骨分化或改善了骨相关指标（HUANG et al., 2012; Pang et al., 2020; Wang et al., 2011, 2008; Zeng et al., 2020）。柚皮苷、新黄杞苷和山奈酚是在此背景下研究的部分化合物（Lin et al., 2016; Wong et al., 2019; Wu et al., 2025; Yang et al., 2020）；柚皮苷也在实验性骨折模型中被发现与血管生成和炎症调节有关（Song et al., 2017）。由于TNF-α信号通路的持续激活可能损害成骨细胞分化（Cao et al., 2015），因此协同评估抗炎活性和矿物质沉积与骨折愈合相关，但不能替代直接的骨折模型研究。

与已被更广泛研究的D. fortunei相比，D. bonii的特征仍不够充分。先前的研究报道了若干酚类和黄酮类成分及其对MG-63成骨样细胞增殖的初步作用（Pham Thi Nhat Trinh et al., 2016; 2015; Trinh et al., 2020）。我们此前的溶剂筛选研究基于提取性能、广泛的化学成分回收率和初始一氧化氮抑制作用，将DB70鉴定为工艺层面的最优提取条件（Le Hang et al., 2026）。但当评估聚焦于TNF-α抑制、急性体内炎症和间充质干细胞培养中的早期钙相关染色时，是否仍以同一提取物为佳仍不确定。

因此，本研究比较了D. bonii的30%、70%和96%乙醇提取物（DB30、DB70和DB96），采用UHPLC-QTOF-MS/MS注释、LPS刺激的RAW264.7巨噬细胞中TNF-α抑制、角叉菜胶诱导的足肿胀、犬间充质干细胞中的茜素红S染色、急性经口毒性试验以及选定成分的分离。目的是鉴定一个先导提取物用于进一步的骨折愈合导向研究，而非宣称直接治愈实验性骨折。

为提供连接从制备用DB96批次中分离的成分与所观察到的抗炎活性之间的机制背景，针对NF-κB信号通路的核心调节因子IκB激酶β（IKKβ）进行了分子对接（Liu et al., 2013; Schmid and Birbach, 2008）。经核磁共振独立鉴定的桦木醇、熊果酸、芦丁和山奈酚被评估其预测的与IKKβ的相互作用。对接分析仅作为假设支持性分析，不被解释为IKKβ抑制或靶点结合的直接证据。

分节摘要

植物材料

根茎于2024年2月在越南大叻省野生采集，采自其自然湿润森林生境中成熟植株。越南本草中并未系统记载D. bonii根茎的传统采收季节。记录采集月份是为了可追溯性；未研究化学成分的季节性变化，也未假定2月为最佳采收期。植物鉴定由Dr.

DB30、DB70和DB96的对比LC-MS/MS分析

UHPLC-QTOF-MS/MS揭示了DB30、DB70和DB96之间的溶剂依赖性差异（表1；表S1；图S1-S3）。表1展示了与生物学比较相关的九个代表性特征，而表S1提供了经原始数据验证的19个精选特征，涵盖主要有机酸/酚酸、苯丙素类、黄酮苷、原花青素相关特征、氧类脂质样特征和三萜类化合物。DB70显示出没食子酸、原儿茶酸、绿原酸、

结论

三种Drynaria bonii乙醇提取物在检测到的化学成分组成和生物活性方面存在差异。DB70显示出更广泛的经精选的极性酚类/苯丙素类特征谱，而DB30和DB96共享一种不同的山奈酚二脱氧己糖苷样特征。DB96产生了最强的TNF-α抑制作用和在选择性时间点最大的数值足肿胀抑制率。

DB96在犬MSC培养中也显示出最清晰但较弱的早期ARS阳性信号。LC-MS/MS可提供

CRediT作者贡献声明

Do Chiem Tai：可视化、调查。Pham Thi Nhat Trinh：撰写—初稿、形式分析。Kieu Dang Minh Nhut：调查、数据整理。Quang Dao Pham Duy：调查、形式分析、数据整理。Trung Phung Van：调查、形式分析、数据整理。Truong Luu Hong：可视化、验证。Hang Dang Thi Le：验证、方法学、形式分析。Tran Hoai Cuong：调查、数据整理。Tran Nguyen Minh An：方法学、软件、撰写—

伦理声明

本研究按照以下动物福利和/或报告指南进行：实验动物饲养和使用的机构及国际原则；OECD测试指南420被用作急性经口毒性评估的一般方法学指导。本研究经越南阮文清大学动物伦理委员会批准（批准号：01/HDKH, 2023）。

参与同意

不适用。

伦理批准

所有动物实验均按照实验动物饲养和使用的机构及国际原则进行，并获越南阮文清大学动物伦理委员会批准（批准号：01/HDKH, 2023）。

发表同意

不适用。

关于生成式AI和AI辅助技术在稿件准备过程中的声明

在本工作准备过程中，作者使用了ChatGPT辅助英文翻译、语言编辑以及在清晰度和可读性方面的改进。作者对输出内容进行了审查和编辑，并对其真实性负责。

资助

本工作由越南科学技术院（VAST）在优秀研究小组发展计划 NCXS02.03/25-26下资助。

利益冲突声明

作者声明不存在任何已知的竞争财务利益或个人关系，这些利益或关系可能影响本文所述工作。

致谢

本项目由越南科学技术院（VAST）在优秀研究小组发展计划 NCXS02.03/25-26（VAST）下资助。

引言