Cxbladder Triage Plus在澳大利亚血尿患者中的临床验证：AUSSIE研究

《BJU International》：Validation of Cxbladder Triage Plus in Australian patients with haematuria: the AUSSIE study

　　

目的：评估Cxbladder Triage Plus（Pacific Edge Ltd.，新西兰达尼丁）——一种非侵入性尿液生物标志物检测方法——与标准诊疗评估（膀胱镜检查）相比，在澳大利亚常规临床实践中表现为肉眼血尿（VH）或非肉眼血尿（NVH）的患者中进行尿路上皮癌（UC）风险分层的临床有效性。 患者与方法：一项多中心、前瞻性、观察性研究（AUSSIE；澳大利亚新西兰临床试验注册号：ACTRN12622001127796）于2023年9月至2025年8月期间，在澳大利亚四个临床中心纳入了表现为VH或NVH、无UC病史且已预约膀胱镜检查的成人（年龄≥18岁）。在膀胱镜检查前采集患者中段尿样本，使用Cxbladder Triage Plus进行检测。主要结局为Cxbladder Triage Plus的诊断性能（灵敏度、特异度、阳性预测值[PPV]、阴性预测值[NPV]和检测阴性率[TNR]），以白光膀胱镜检查和组织病理学UC确认为参照标准。 结果：在691例具有可评估样本的患者中（424例VH，267例NVH），54例（7.8%）经组织病理学确认为肿瘤（44例VH，10例NVH）。与膀胱镜检查相比，Cxbladder Triage Plus的灵敏度为89%，特异度为79%，PPV为27%，NPV为99%，TNR为74%。共有6例肿瘤未被检出（5例低级别Ta，1例T3b脐尿管腺癌）。与2025年美国泌尿外科协会（AUA）风险分层标准相比，Cxbladder Triage Plus的PPV提高了3.3倍。 结论：上述发现为Cxbladder Triage Plus在澳大利亚常规临床实践中表现为VH或NVH的患者中进行UC风险分层提供了临床验证。

论文解读：Cxbladder Triage Plus在澳大利亚血尿患者中的临床验证——AUSSIE研究

一、研究背景与目的

血尿是泌尿系统疾病最常见的临床表现之一，分为肉眼血尿（visible haematuria，VH）和非肉眼血尿（non-visible haematuria，NVH）。肉眼血尿与尿路上皮癌（urothelial carcinoma，UC，膀胱癌最常见类型）风险增加密切相关，通常需要进一步的诊断性评估。在非肉眼血尿患者中，美国泌尿外科协会（American Urological Association，AUA）推荐根据红细胞计数、年龄、性别和吸烟史等因素进行风险分层，以决定是否需要进一步检查。

目前血尿的进一步评估通常涉及膀胱镜检查、上尿路影像学检查、尿液细胞学检查和/或尿液生物标志物检测。然而，膀胱癌仅在约17%的VH患者和3.3%的NVH患者中被确诊，其余病例归因于良性或未知原因。因此，血尿的低检出率调查给医疗系统带来了巨大的经济和临床负担，且多次侵入性操作（如膀胱镜检查相关尿路感染）可能导致并发症。在此背景下，开发具有高阴性预测值（negative predictive value，NPV）和高灵敏度的非侵入性尿液生物标志物检测方法，用于血尿患者的风险分层，具有重要的临床意义。

Cxbladder Triage Plus（Pacific Edge Ltd.，新西兰达尼丁）是一种基于逆转录定量PCR的尿液生物标志物检测方法，通过测量五个生物标志物的mRNA表达水平（包括四个UC相关基因：细胞周期蛋白依赖性激酶1[CDK1]、中期因子[MDK]、IGF结合蛋白5[IGFBP5]和同源框A13[HOXA13]，以及一个已知的炎症标志物C-X-C基序趋化因子受体2[CXCR2]），并整合成纤维细胞生长因子受体3（FGFR3）和端粒酶逆转录酶（TERT）基因的六个DNA单核苷酸变异（single-nucleotide variants，SNVs）分析，返回0至1的评分，以预设阈值划分低风险（<0.15）、中风险（≥0.15至<0.54）和高风险（≥0.54）。第一代检测方法Cxbladder Triage已被AUA 2025指南列为经验证的可用于中风险NVH患者的尿液肿瘤标志物检测方法。

本研究（AUSSIE研究，澳大利亚新西兰临床试验注册号：ACTRN12622001127796）旨在进一步评估Cxbladder Triage Plus与标准诊疗评估相比，在澳大利亚常规临床实践中表现为血尿的患者中进行UC风险分层的临床有效性。

二、主要技术方法

研究人员在澳大利亚四个医院泌尿外科门诊开展了一项多中心、前瞻性、观察性研究，于2023年9月4日至2025年8月29日期间连续纳入患者。纳入标准为：年龄≥18岁、近期经尿液分析和显微镜检查确诊为VH或NVH、已预约膀胱镜检查、能够提供排尿尿液样本。排除标准包括：既往有膀胱恶性肿瘤、上尿路UC或前列腺尿道UC病史；有重建或改道膀胱；既往盆腔放疗史；正在接受化疗或近6周内接受过化疗；依赖透析的肾功能衰竭；既往血吸虫病病史；或既往膀胱镜检查后接受过干预。所有患者在膀胱镜检查前提供中段尿样本（≥40 mL），使用Cxbladder Urine Sampling System处理样本，由Pacific Edge Diagnostics New Zealand（PEDNZ）或USA（PEDUSA）进行分析。实验室人员对临床数据设盲，研究操作人员对检测结果设盲。基线人口统计学和临床信息通过电子病例报告表收集。标准诊疗检查结果（包括膀胱镜检查、尿液细胞学、泌尿系统影像学及组织病理学报告）使用OpenClinica 4.0软件记录。肿瘤经组织病理学（即膀胱镜检查加活检）确认，并分类为高级别（high grade，HG）、原位癌（carcinoma in situ，Cis）或低级别（low grade，LG）。NVH患者的AUA风险分层依据AUA 2025标准进行。统计分析使用R 4.4.1软件，诊断性能参数采用标准方法计算。

三、研究结果

患者特征：757例血尿患者提供了尿液样本（57例确诊肿瘤阳性），其中691例具有可评估样本并纳入分析。66例被排除，原因包括：检测结果不可报告（46例）、方案偏离（14例）和尿液样本质量差（6例），排除病例中包括3例肿瘤阳性病例。患者平均年龄63.9岁，64.4%为男性，61.4%表现为VH。在267例NVH患者中，按2025年AUA风险类别划分，高风险186例（69.7%）、中风险62例（23.2%）、低/可忽略风险14例（5.2%）、未知5例（1.9%）。组织病理学确认肿瘤阴性637例（92.2%），肿瘤阳性54例（7.8%）。54例肿瘤阳性病例中，53例为UC（20例TaLG，33例HG或分期>T a或Cis），1例为T3b期脐尿管腺癌。影像学检查方面，402例（58.2%）接受CT-IVU，336例（48.6%）接受超声，149例（21.6%）接受非增强CT，3例（0.4%）接受MRI，43例（6.2%）未进行影像学检查。54例肿瘤阳性病例均接受了影像学检查，其中33例（61.1%）被影像学识别，21例（38.9%）被漏诊。

诊断性能：在分析集中，179/691例患者（25.9%）的Cxbladder Triage Plus评分≥0.15，提示中或高风险，其中48/54例（88.9%）确诊肿瘤，131/179例为假阳性（73.2%）。在512例“低风险”评分的患者中，6例（1.2%）经膀胱镜检查为肿瘤阳性（即假阴性），其中5例为TaLG肿瘤，1例为T3b期脐尿管腺癌。Cxbladder Triage Plus的灵敏度为48/54（89%，95% CI 77–95%），特异度为506/637（79%，95% CI 76–82%），PPV为48/179（27%，95% CI 21–34%），NPV为506/512（99%，95% CI 97–100%），TNR为512/691（74%，95% CI 71–77%）。阳性似然比为4.3（95% CI 3.6–5.2），阴性似然比为0.14（95% CI 0.07–0.30）。在VH患者中，灵敏度为39/44（89%），特异度为292/380（77%），PPV为39/127（31%），NPV为292/297（98%），TNR为297/424（70%）。在NVH患者中，灵敏度为9/10（90%），特异度为214/257（83%），PPV为9/52（17%），NPV为214/215（100%），TNR为215/267（81%）。ROC曲线下面积为0.90（95% CI 0.85–0.96）。在267例具有合格数据的患者中，尿液细胞学的灵敏度为16/28（57%），特异度为207/239（87%），PPV为16/48（33%），NPV为207/219（95%），TNR为219/267（82%）。细胞学灵敏度在HG肿瘤患者中更高（13/16；81%）。在数据库锁定（2025年12月18日）时，245例初始肿瘤阴性患者获得了12个月随访数据，随访期间无一例被诊断为UC。

风险分层：2025年AUA风险标准和VH状态将672/686例患者（98.0%）归类为需要进一步血尿评估。使用AUA风险标准，所有54例肿瘤阳性病例均被正确分类，但与所需膀胱镜检查数量相比检出率低（54/672 [8%]）。Cxbladder Triage Plus将179/691例患者（25.9%）识别为“中风险”或“高风险”，其中48例（26.8%）确诊肿瘤，肿瘤检出率提高了3.3倍。应用Cxbladder Triage Plus的两个评分阈值时，74%的患者为“低风险”（评分<0.15），17%为“中风险”（评分≥0.15至<0.54），9%为“高风险”（评分≥0.54）。在61例“高风险”结果的患者中，34例（55.7%）确诊肿瘤。

四、讨论与结论

本研究的发现与先前在美国退伍军人中开展的DRIVE研究结果一致（灵敏度94%，特异度77%），支持Cxbladder Triage Plus诊断性能在美国和澳大利亚常规临床实践中的可推广性。与2025年AUA风险分层相比，Cxbladder Triage Plus在血尿患者中提供了改进的风险分层，肿瘤检出率提高3.3倍。基于“低风险”评分患者比例，使用该检测方法可能将转诊需求减少74%。在NVH且AUA中风险的患者中，55/62例（88.7%）获得“低风险”结果，提示该检测方法在此类患者群体中可将转诊需求减少高达89%。将Cxbladder Triage Plus加入影像学和细胞学检查后，肿瘤识别数量从40/54例（74.1%）增加到49/54例（90.7%）。随访数据显示，假阳性结果的患者在12个月内发生UC的风险并不高于真阴性结果患者。

研究存在一定局限性：研究人群为转诊至泌尿外科评估的患者（即较高风险人群），可能限制结果向初级保健的推广；NVH亚组中肿瘤阳性病例数较少（仅10例），灵敏度95% CI过宽；少数假阴性病例主要为LG肿瘤，此类肿瘤已知较难通过尿液生物标志物检测发现；1例非UC恶性肿瘤（脐尿管腺癌）未被检出，但该检测方法并非设计用于检测非尿路上皮组织学类型；研究队列中无上尿路UC病例，可能受选择偏倚影响；影像学检查未在所有患者中一致进行。

研究结论：Cxbladder Triage Plus检测在澳大利亚VH或NVH患者中检测UC具有较高的诊断性能。研究结果证实了Cxbladder Triage Plus在常规临床实践中对转诊接受膀胱镜检查的血尿患者进行风险分层的临床有效性。这些发现也证实了Cxbladder Triage Plus在减少低UC风险个体膀胱镜检查转诊需求方面的潜在效用，同时优先安排高风险个体进行快速进一步诊断评估。