circRNA疫苗性能的系统解析：RNA制备质量与表观转录组修饰调控免疫应答而非天然免疫激活

《npj Vaccines》：Preparation quality and epitranscriptomic modification influence circular RNA vaccine performance

摘要

环状RNA（circRNA）是一种新兴的疫苗模式，被提出相较于线性mRNA具有提高稳定性、降低反应原性和延长抗原表达的优势。然而，其共价闭合结构、制备质量和核苷酸修饰对疫苗性能各自的具体贡献仍缺乏充分描述。本研究在两个抗原系统中系统地解析了这些参数。我们鉴定出RNA制备质量是circRNA反应原性标记物的主要贡献因素，天然免疫激活与制备过程中残留的低分子量RNA物种丰度密切相关。高质量circRNA相较于线性mRNA表现出显著降低的天然免疫激活，且这一特性独立于核苷酸修饰类型。尽管存在这些差异，circRNA和mRNA疫苗诱导的抗体滴度和T细胞反应相当，表明天然免疫激活的降低并未转化为适应性免疫反应强度的提升。引入N⁶-甲基腺苷（m⁶A）不影响反应原性标记物或抗原表达，但在两个抗原系统中均与抗体亲和力增加相关，中和活性也呈相同趋势。circRNA疫苗接种还改变了生发中心反应的解剖学分布，在所测量时间点降低了脾脏中抗原特异性生发中心B细胞的数量，同时保留了淋巴结反应。综合上述发现表明，circRNA疫苗的性能受RNA制备质量和表观转录组修饰的调控，而非天然免疫激活的差异。