基于ISSR-PCR技术评估临床光滑念珠菌分离株的遗传多样性与系统发育关系

《BMC Microbiology》：Genetic diversity and antimicrobial resistance of Candida glabrata clinical isolates from Odisha, India: An ISSR-PCR study

【字体：大中小】 时间：2026年10月21日 来源：BMC Microbiology 5.4

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　　摘要背景外阴阴道假丝酵母菌病（VVC）是育龄女性中常见的一种真菌感染，主要由白色念珠菌（Candida albicans）引起。非白念珠菌（NAC）菌种，尤其是光滑念珠菌（C. glabrata），因其对抗真菌药物的耐药性日益增强，正逐渐成为条件致病菌。为了监测感染的出现并制

摘要

背景

外阴阴道假丝酵母菌病（VVC）是育龄女性中常见的一种真菌感染，主要由白色念珠菌（Candida albicans）引起。非白念珠菌（NAC）菌种，尤其是光滑念珠菌（C. glabrata），因其对抗真菌药物的耐药性日益增强，正逐渐成为条件致病菌。为了监测感染的出现并制定相应的应对策略，有必要了解光滑念珠菌的遗传变异情况。

目的

本研究旨在利用简单序列重复间聚合酶链反应（ISSR-PCR）评估来自临床样本的光滑念珠菌分离株的遗传多样性和相关关系。

方法

共从印度奥里萨邦布巴内什瓦尔的IMS和SUM医院以及卡林加医院的疑似患者中采集了500份阴道拭子样本。其中，120份被鉴定为光滑念珠菌，并选取了31株具有独特耐药模式的分离株进行进一步的ISSR-PCR和遗传多样性分析。样本在沙氏葡萄糖琼脂（SDA）上培养，随后进行革兰氏染色和念珠菌鉴别琼脂（CDA）培养以确定菌种。采用纸片扩散法检测九种抗真菌药物的敏感性。使用苯酚-氯仿-异戊醇（PCI）法提取基因组DNA。ISSR-PCR使用了19个引物，但仅关注可重复的条带模式。计算了遗传多样性指数，包括多态性、分辨力、引物指数和多样性指数。基于Jaccard相似性系数、层次聚类和主成分分析（PCA）确定系统发育关系。

结果

在分析的500份阴道拭子样本中，共分离出120株光滑念珠菌。抗真菌敏感性测试显示存在大量耐药性，尤其是对氟康唑（70.97%）、酮康唑（67.74%）、伊曲康唑（58.06%）和卡泊芬净（54.84%）的耐药性，而伏立康唑表现出相对较高的活性。根据独特的抗真菌敏感性谱和足够的DNA质量，选取了31株光滑念珠菌分离株进行ISSR-PCR分析。在所选取的分离株中，七个ISSR引物产生了可重复的扩增图谱，显示出遗传相关性的差异。各引物的多样性指数值范围为0.674至0.998，其中ISSR 12的最低值，而其他引物表现出较高的值，表明它们在检测分离株间多态性的能力方面存在差异。热图分析显示，在系统发育和PCA中各组群之间存在明显分离。