亚毒性应激下iPSC-RPE细胞极性小细胞外囊泡分泌图谱的可逆性重塑揭示AMD早期RPE功能障碍

《Inflammation》：Early Remodeling of Polarized Small Extracellular Vesicle Secretion in Retinal Pigment Epithelium Cells under Subtoxic AMD-Relevant Stress

　　视网膜色素上皮细胞功能障碍是年龄相关性黄斑变性（AMD）的核心机制之一，但在明显退行性改变出现之前，所发生的早期细胞变化仍有待进一步阐明。本研究利用人类iPSC-RPE单层细胞模型，模拟早期AMD相关的RPE细胞应激状态，探讨亚毒性缺氧模拟应激对极性分泌的小细胞外囊泡（sEV）分泌模式的影响。亚毒性缺氧模拟应激诱导了缺氧模拟状态，未导致明显的细胞毒性，同时维持了上皮屏障完整性。然而，该处理显著重塑了sEV分泌物组学图谱，并破坏了顶端-基底侧的货物分配格局。例如，SERPINA5向基底侧富集，而CTSC在顶端侧减少。蛋白质组学分析进一步显示，AMD相关货物如APOE、VEGFA和ANGPTL4的表达上调，而溶酶体水解酶的含量下降。同时，缺氧模拟应激损害了RPE细胞的吞噬功能和降解功能。值得注意的是，这些sEV的变化与胞内整体蛋白质组学变化基本脱耦，提示极性sEV图谱分析可能作为AMD相关应激状态下RPE功能障碍的敏感指标。在结构层面，缺氧模拟应激破坏了顶端微绒毛，并降低了微管相关细胞骨架的稳定性。重要的是，去除诱导试剂后，上述分泌、结构和功能性异常均可部分逆转。综上所述，本研究结果提示极性sEV分泌的早期可逆性重塑反映了RPE细胞在AMD相关应激状态下的亚毒性改变，为在明显退行性病变发生之前检测和调控RPE功能障碍提供了潜在机遇。