《Medical Oncology》：Revisiting Ehrlich carcinoma in the era of precision oncology: bridging classical models with modern systems biology
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Ehrlich癌（Ehrlich carcinoma, EC）及其腹水型Ehrlich腹水癌（Ehrlich ascites carcinoma, EAC）是癌症研究中最古老且应用最广泛的实验性肿瘤模型之一。尽管传统上用于抗癌药物筛选，但其在探讨侵袭性肿瘤生物
Ehrlich癌（Ehrlich carcinoma, EC）及其腹水型Ehrlich腹水癌（Ehrlich ascites carcinoma, EAC）是癌症研究中最古老且应用最广泛的实验性肿瘤模型之一。尽管传统上用于抗癌药物筛选，但其在探讨侵袭性肿瘤生物学更广泛方面的潜力所受关注相对较少。EC/EAC表现出与晚期恶性相关的若干特征，包括快速肿瘤生长、血管生成、免疫失调、代谢改变、治疗抵抗以及肿瘤与宿主之间的复杂相互作用。这些特征使EC/EAC成为研究肿瘤进展不同方面的有用补充模型。然而，使用这些模型的研究在很大程度上集中于转录变化和单一信号通路，而转录后调控机制仍未得到充分探索。特别是，作为microRNA（miRNA）介导基因调控主要组成部分的RNA诱导沉默复合体（RNA-induced silencing complex, RISC）在EC/EAC中的作用仍知之甚少。本综述中，研究人员讨论当前EC/EAC研究的主要局限性，包括多组学（multi-omics）方法、单细胞和空间分析、功能基因组学（functional genomics）、免疫检查点谱分析（immune checkpoint profiling）以及整合的系统层面研究使用有限。研究人员进一步讨论如何将RISC为中心的调控网络与基于CRISPR的研究、空间转录组学（spatial transcriptomics）和代谢谱分析（metabolic profiling）等新兴方法相结合，以提供更深入的机制见解并提高这些模型的转化价值。将这一成熟肿瘤模型的优势与当代癌症生物学方法相结合，可能有助于将EC/EAC重新定位为研究肿瘤进展和治疗反应的相关且多功能的平台。
引言与生物学背景：文章从癌症的多因素性、遗传与表观遗传改变、肿瘤异质性及乳腺癌分子分型切入，指出尽管类器官、异种移植等模型不断发展，仍无模型覆盖肿瘤生物学全部方面；EC/EAC可在免疫健全宿主中研究肿瘤-宿主与免疫互作，因而被定位为补充而非替代现代模型。
引言：文章强调乳腺癌发生涉及激素、遗传和生活方式等因素，并依据孕激素受体（progesterone receptor, PR）、雌激素受体（estrogen receptor, ER）和人表皮生长因子受体2（human epidermal growth factor receptor 2, HER2）进行分子分型，引出对更可及、系统性疾病模型的需求。
Ehrlich癌模型的历史发展：Paul Ehrlich的实验工作奠定可移植肿瘤模型基础，EAC用于证明实验肿瘤模型在发现基础癌症生物学原理中的价值，并与免疫学、药理学和化疗基础相联系。
Ehrlich癌的生物学属性：EC来源于小鼠乳腺组织，具可移植、高生长和低分化特征，实体与腹水两型互补；伴随血管生成、代谢重编程、免疫抑制和肿瘤微环境重塑，并可出现恶病质、贫血、肝肾功能障碍及多器官衰竭；但不应被解释为人类乳腺癌特定转移模式的直接代表。
Ehrlich癌肿瘤类型、实体和液体Ehrlich肿瘤诱导流程：EC/EAC用于评价抗癌药、免疫调节剂和代谢抑制剂，具移植相对简便、在既定条件下可重复及免疫健全宿主等优势，可研究局部与播散性疾病、代谢、微环境和治疗反应；但转录后调控，尤其miRNA、Argonaute蛋白、Dicer与功能性RISC介导基因沉默的协调关系仍不充分。文章强调EC不替代类器官和患者来源异种移植（patient-derived xenografts, PDXs），而作为多模型实验体系的组成，在生理性体内系统中验证还原论发现。
Ehrlich癌研究现状：既往研究多聚焦传统表型、生化和通路应用，本综述引入RISC、多组学、单细胞与空间分析、功能基因组学和免疫检查点表征。
作为机制、治疗和耐药研究模型的Ehrlich癌：EC/EAC用于侵袭性生长、血管生成、肿瘤代谢、治疗反应和播散机制研究；腹水型适合研究播散和系统肿瘤-宿主互作，实体型适合研究局部肿瘤；上皮-间质转化（epithelial–mesenchymal transition, EMT）、细胞外基质重塑、炎症和缺氧被视为侵袭性行为的潜在贡献因素；血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor, VEGF）、胎盘生长因子（placental growth factor, PlGF）、p53、Bax/Bcl-2、核因子κB（nuclear factor kappa B, NF-κB）、肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor alpha, TNF-α）、白细胞介素6（interleukin-6, IL-6）及PI3K/AKT/mTOR等通路被涉及；但腹水性质限制空间组织和细胞异质性，宜作为肿瘤-宿主互作、系统毒性、恶病质和免疫代谢反应的补充模型。
未来提议：现代化EC/EAC：文章提出应以未解决的生物学问题而非技术可用性驱动模型现代化。
从历史用途到现代机会：EC/EAC优先研究缺口：文章将RISC介导的转录后调控、整合多组学、单细胞与空间分析、功能基因组学和肿瘤-免疫表征列为最相关优先事项；代谢通量、微生物组、神经肿瘤信号和昼夜节律被视为探索方向；可行性受样本、成本、对照、技术专长及区分肿瘤细胞特异改变与宿主系统反应的影响。
优先现代化EC/EAC：文章主张优先研究能回答生物学问题且实验上可操作的方向，使EC/EAC研究超越技术罗列而进入机制性问题。
主要优先事项：文章围绕RISC、多组学、表观遗传、单细胞与空间、功能基因组学、免疫检查点、纵向验证和标准化终点提出优先事项。
RISC介导的转录后调控：已有单个miRNA证据，但miRNA表达、AGO2、Dicer和下游靶标 repression 的协调关系未定义；文章假设EC/EAC中RISC活性改变通过重塑增殖、凋亡、EMT、炎症和治疗反应相关基因的转录后控制促进侵袭表型；建议整合miRNA谱、RISC核心组分表达与活性、转录组及功能验证，并区分miRNA表达变化与沉默机器功能变化。
整合多组学与表观遗传调控：EC/EAC仍缺乏基因组、转录组、蛋白组、代谢组和脂质组的整合表征；文章建议建立EC特异多组学图谱，比较腹水与实体瘤，并结合功能实验和互补模型验证。
表观遗传调控作为额外分子层：DNA甲基化、组蛋白修饰、染色质可及性和高级染色质结构在EC中关注不足；需映射表观遗传可塑性并评估表观遗传治疗及染色质靶向联合策略。
单细胞和空间分析：bulk分析隐含肿瘤同质性，单细胞RNA测序（single-cell RNA sequencing, scRNA-seq）和空间转录组学可揭示恶性亚克隆、免疫细胞状态和空间信号生态位；在EC中应用可研究肿瘤-免疫-基质互作。
功能基因组学与因果验证：CRISPR/Cas9可因果性 interrogation 基因功能、癌基因成瘾、抑癌基因丢失、通路冗余和耐药演化；EC多依赖药理抑制剂、抗氧化剂或饮食干预，缺乏基因-表型因果；文章建议稳定敲除、诱导敲低、敲入报告和条形码群体研究。
肿瘤-免疫与免疫检查点分析：EC在免疫健全宿主中发展且伴免疫失调，但PD-1/PD-L1、CTLA-4、LAG-3、TIM-3和TIGIT的动态表达、细胞来源和功能相关性未系统探索；需量化T细胞耗竭、髓系抑制和适应性免疫失败。
实验标准化与纵向验证：短期实验难以研究肿瘤休眠、免疫适应、复发和获得性耐药；需长期EC模型、生存分析、连续采样和复发评估，并关注迟发肝、肾、心脏和免疫毒性。
标准化转化终点：EC研究缺乏统一的肿瘤负荷、免疫标志物、代谢终点、器官毒性和生存终点；标准化可提高可重复性和跨研究比较。
新兴未来方向：文章提出微生物组、代谢通量、神经肿瘤信号和昼夜节律等新兴方向。
肿瘤-微生物组互作：EC研究尚未纳入微生物组；肠道菌群和微生物代谢物可影响免疫张力、检查点阻断和化疗毒性，EC可研究微生物组对系统炎症、恶病质、代谢和免疫抑制的影响。
代谢适应与通量分析：多数EC代谢研究基于葡萄糖摄取、乳酸、脂质过氧化或抗氧化酶等静态指标；需同位素示踪和通量组学动态分析代谢可塑性、营养竞争和治疗压力反应。
神经-肿瘤信号：神经支配、神经递质和应激激素可调控肿瘤增殖、免疫抑制、血管生成和转移；EC伴随系统应激、恶病质和神经内分泌变化，提示神经肿瘤互作值得实验研究。
昼夜节律调控：昼夜节律紊乱通过核心钟基因和钟控致癌通路影响乳腺癌；EC/EAC的高代谢、快速增殖、炎症、免疫失调和宿主互作适合研究时间依赖性调控，且实验上可操控光暗周期、进食和治疗时间。
讨论：文章认为EC/EAC现代化不是替代其既有实验优势，而是提高生物学分辨率；应将通路和表型研究扩展至整合调控生物学，RISC是特别相关缺口；EC/EAC与类器官、PDX和基因工程小鼠模型（genetically engineered mouse models, GEMMs）互补；需承认物种差异、腹水表型、肿瘤异质性和免疫调节差异限制外推；提出从多组学和小RNA谱分析到候选RISC网络识别、CRISPR或药理扰动、肿瘤免疫治疗表型评估，再在人乳腺癌细胞、类器官或PDX中验证的发现到验证框架。
结论：文章指出EC/EAC的核心限制是鼠模型与人乳腺癌之间的生物学差距；长期连续移植和传代史可能影响生长行为、分子特征和治疗反应；该模型不复制患者特异遗传和分子异质性，且移植模型绕过早期癌变过程；腹水型不应解释为乳腺癌腹膜转移的直接模型，实体型也不能完全复现人类乳腺肿瘤架构和异质性；因此EC/EAC发现应视为可能保守机制的线索，需在人乳腺癌细胞、患者来源类器官、PDX或其他临床相关模型中验证后才能得出转化结论。
