《International Immunopharmacology》：Fraxin alleviates intestinal epithelial cell necrosis in ulcerative colitis by inhibiting the P2Y??R/cAMP/PKA/CREB signaling pathway
编辑推荐：
``•Fraxin 显示出治疗溃疡性结肠炎的潜在益处。•Fraxin 通过抑制 cAMP/PKA/CREB 信号通路来治疗溃疡性结肠炎，从而阻止肠道上皮细胞坏死。•Fraxin 抑制 P2Y14R 的活性，增强 RIPK1 与 CREB 的结合。这可以抑制细胞凋亡并缓解肠道炎症反
``
- •
Fraxin 显示出治疗溃疡性结肠炎的潜在益处。
- •
Fraxin 通过抑制 cAMP/PKA/CREB 信号通路来治疗溃疡性结肠炎，从而阻止肠道上皮细胞坏死。
- •
Fraxin 抑制 P2Y14R 的活性，增强 RIPK1 与 CREB 的结合。这可以抑制细胞凋亡并缓解肠道炎症反应。
引言
溃疡性结肠炎（UC）是主要的炎症性肠病（IBD）类型之一，其特征是肠道黏膜的慢性炎症、隐窝结构的破坏以及反复出现的腹痛和腹泻 [1]。据统计，全球 UC 病例超过 500 万例，且发病率持续上升，其长期病程和并发症严重威胁患者的生活质量 [2]。虽然 5-ASA 和免疫抑制等传统治疗方法可以缓解部分症状，但由于长期使用可能引起的肝肾毒性和机会性感染等不良反应，这些方法的临床应用受到限制 [3]。因此，探索新的、安全有效的治靶点和药物具有重要的临床意义。
UC 的发病机制涉及遗传易感性、肠道菌群失调、免疫失衡和肠道上皮屏障功能障碍的复杂相互作用。近期研究发现，肠道上皮细胞坏死在 UC 的黏膜损伤中起着核心作用，其异常激活会加剧炎症级联反应并阻碍黏膜修复 [4]。P2Y14R 是一种 G 蛋白偶联受体（GPCR），其表达水平与 UC 的炎症程度呈显著正相关。P2Y14R 被 UDP-葡萄糖激活，参与多种生理和病理过程 [5]。P2Y14R 在免疫细胞中广泛表达，其激活一方面会诱导中性粒细胞趋化、促进炎症因子（如白细胞介素-6(IL-6) 和肿瘤坏死因子(TNF-α) 的释放以及趋化因子的分泌，从而放大局部炎症反应；另一方面，通过与 Gi/o 蛋白结合抑制腺苷酸环化酶活性，减少 cAMP 的产生，进而抑制 PKA/CREB 信号通路，导致促凋亡因子（如 MNS）的激活 [6]，最终上调促凋亡因子（如 MLKL、RIPK3）的表达。因此，靶向阻断 P2Y14R 及其下游信号通路可能为干预 UC 中的肠道上皮损伤提供一种新的治疗策略。
近年来，随着现代药理学研究的不断进步，中医在 UC 治疗中的作用机制逐渐明确，显示出与这种疾病复杂发病机制高度吻合的多靶点调控特性。大量研究表明，中药及其活性成分能够同时作用于多个关键通路，包括炎症反应、氧化应激和肠道屏障功能。系统评价表明，来自传统方剂的多种天然化合物在 UC 模型中表现出显著的抗炎和黏膜修复效果 [7]。
秦皮 是木犀科植物的干燥树皮或茎皮，包括 Fraxinus rhynchophylla Hance、Fraxinus chinensis Roxb.、Fraxinus szaboana Lingelsh 或 Fraxinus stylosa Lingelsh [8]。它具有苦寒性质，具有清热、燥湿和收敛止痢的功效。神农本草经 记载了其用于治疗痢疾和腹泻的记载。根据中医理论，在 UC 患者中，由于脾胃生理功能受损，内部湿气积聚；随着时间的推移，湿气转化为热邪。湿热滞留在肠道，导致气血瘀滞，表现为腹痛和里急后重；热毒湿邪会灼伤肠道的浆膜；当气血与这些损伤因素相互作用时，会腐烂并化脓；当肠道蠕动受阻时，就会出现带血和脓性的腹泻。这种发病机制与 秦皮 的“清热、燥湿、收敛肠道、止痢”的功效高度吻合，为其在治疗 UC 中的应用提供了理论依据。以经典方剂为例，《伤寒论》中的白头翁汤就含有 秦皮 等药材，长期以来在临床治疗湿热痢疾和 UC 中表现出良好疗效 [9]。
近年来，从 秦皮 中提取的主要活性成分 Fraxin 成为了研究的焦点。研究表明，Fraxin 通过调节氧化应激水平、抑制炎症反应以及干预 TLR4/NF-κB 和 MAPK 等信号通路，显著改善了 UC 相关的病理损伤 [10]。此外，从 秦皮 中提取的其他活性成分也显示出重要作用。例如，相关研究表明，其提取物可通过下调促炎细胞因子 TNF-α 和 IL-6 的表达同时上调抗炎因子 IL-10，从而缓解炎症反应并促进肠道黏膜屏障的修复 [11]。这些作用机制进一步表明，调节炎症反应和维持肠道屏障稳态是 秦皮 及其活性成分抗 UC 效果的核心。尽管之前的研究已经从炎症和氧化应激的角度阐明了 Fraxin 的部分作用机制，但其调节程序性细胞死亡（特别是细胞凋亡）的特定分子机制仍有待进一步探索。作为 UC 中肠道上皮损伤的关键机制之一，异常激活的细胞凋亡会加剧炎症反应并损害屏障功能。因此，基于体外和体内实验模型，本研究进一步探讨 Fraxin 是通过拮抗 P2Y14R 表达来抑制由 cAMP/PKA/CREB 信号通路介导的肠道上皮细胞凋亡，从而发挥治疗作用的。总之，系统阐明 Fraxin 在调节炎症反应、细胞死亡和信号通路中的作用，不仅有助于更深入地理解 UC 的发病机制，还为基于 Fraxin 的潜在治疗策略的开发提供了新的理论基础和分子靶点。
章节片段
试剂和抗体
Fraxin（HPLC）纯度 98%，CAS 号：524–30-1，购自中国上海的 Mclain Biochemical Co., Ltd.；硫酸右旋糖酐钠（DSS，D806297）购自 MP Biochemicals；5-氨基水杨酸（5-ASA）购自 MP Biomedicals（A3537）。Claudin-1（ab180158）、cAMP（ab76238）、p-CREB（ab32096）、CREB（ab178322）和 Anti-RIP 抗体（ab300617）购自 Abcam。Occludin（91131）、p-MLKL（37333）、MLKL（37705）、p-PKA（4781）、PKA（4782）、GAPDH（5174）和 Anti-rabbit IgG（H?+?L）（14708）也来自 Abcam。
Fraxin 在小鼠模型中对 UC 有更好的治疗效果
在这项研究中，我们成功建立了 DSS 诱导的 UC 小鼠模型，以评估 Fraxin 的治疗潜力（图 1A）。与对照组相比，DSS 处理的小鼠表现出显著的体重下降（图 1B），并出现典型的结肠黏膜损伤，包括黏膜上皮破坏、细胞脱落、隐窝结构紊乱和脓肿形成，同时隐窝数量减少和炎症细胞浸润明显（图 1C）。此外，该模型...
讨论
UC 是一种慢性炎症性肠病，其特征是肠道黏膜的持续炎症、上皮屏障的损伤和免疫稳态的破坏。近年来，由于饮食模式、生活方式和环境因素的变化，UC 的全球负担持续增加，成为影响人类健康的主要消化系统疾病之一。目前，氨基水杨酸盐、糖皮质激素、生物制剂和小分子靶向药物...
结论
本研究证实，Fraxin 在 DSS 诱导的 UC 小鼠模型中具有显著的肠道保护作用。机制研究表明，Fraxin 通过拮抗 P2Y14R 的活性、调节 cAMP/PKA/CREB 信号通路和抑制 RIPK1/RIPK3 介导的细胞凋亡，减轻 UC 相关的病理损伤，同时降低肠道炎症反应并改善黏膜屏障通透性。这项研究不仅...
作者贡献
Miao Zhiwei 负责生化分析和论文撰写；Chen Bo 进行动物实验；Bu Shu 分析数据；Song Yuchen 和 Xu Yi 设计研究。Miao Zhiwei 和 Xu Yi 起草手稿并获取项目资助；所有作者均审阅并批准了最终版本的手稿。
CRediT 作者贡献声明
Zhiwei Miao：撰写 – 审稿与编辑，初稿撰写，数据管理，概念构思。Bo Chen：撰写 – 审稿与编辑，初稿撰写。Shu Bu：监督，软件开发，概念构思。Jing Yan：监督，软件开发，概念构思。Yuchen Song：数据管理，概念构思。Min Zhao：撰写 – 审稿与编辑，初稿撰写，资金获取，概念构思。Yi Xu：撰写 – 审稿与编辑，初稿撰写，概念构思。
资助
本项目得到了苏州市科技项目（编号 SKY2023015）、姑苏区卫生健康专业人员研究计划（编号 GSWS2024060）、江苏省中医药临床研究基地项目（编号 JD2022SZ19）、江苏省中医药科技发展计划项目（编号 MS2023001、ZD202407）以及中国中医科学院（CACMS）创新基金（编号 CI2023C011LH）的支持。
利益冲突声明
作者声明他们没有已知的可能会影响本文工作的财务利益或个人关系。
Zhiwei Miao|Bo Chen|Shu Bu|Jing Yan|Yuchen Song|Min Zhao|Yi Xu
```
