《Frontiers in Pharmacology》：Safety assessment of a Mitragyna speciosa leaf extract by a 90-day feeding study in rats
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背景： Mitragyna speciosa（帽柱木）是一种属于咖啡科（Rubiaceae）的落叶常绿乔木。传统上被用作滋补品，广泛的历史使用数据显示卡痛（kratom）在急性和慢性使用方面具有较低的风险特征。这些结论不能单方面推广至市场上所有卡痛产品，因为市
背景： Mitragyna speciosa（帽柱木）是一种属于咖啡科（Rubiaceae）的落叶常绿乔木。传统上被用作滋补品，广泛的历史使用数据显示卡痛（kratom）在急性和慢性使用方面具有较低的风险特征。这些结论不能单方面推广至市场上所有卡痛产品，因为市场上的产品种类繁多，许多与传统卡痛制剂相去甚远。
方法： 研究人员开展了一项为期90天的毒性研究，旨在确定一种从M. speciosa叶片制备的专利提取物（标准化至目标帽柱木碱浓度）的未观察到有害作用水平（NOAEL）。将Sprague Dawley Crl:CD (SD)大鼠（80只雄性和80只雌性）分为每组20只雄性和20只雌性，每天通过灌胃（10 mL/kg体重）给予提供0、15、30或60 mg/kg/天帽柱木碱的SpecioTea?，持续90天。本研究评估了以下参数和终点：临床体征、体重、体重增长、摄食量、眼科检查、临床病理学参数（血液学、凝血功能、临床化学和尿液分析）、大体尸检发现、器官重量和组织病理学检查。
结果： 每日口服SpecioTea?导致剂量相关的摄食量减少和体重降低（≥15 mg/kg/天）。功能性观察组合（FOB）结果总体上与受试物已知的药理学作用一致（≥30 mg/kg/天），并伴有非不良性的临床病理学发现（≥15 mg/kg/天）。在60 mg/kg/天剂量下，观察到卵巢、睾丸和附睾的不良变化。因此，30 mg/kg b.w./天的SpecioTea?被确定为NOAEL。
结论： 由于在所有SpecioTea?剂量水平均观察到效应，无法确定未观察到效应水平（NOEL）。基于在60 mg/kg/天剂量下观察到的卵巢、睾丸和附睾的不良变化，雄性和雌性SpecioTea?的NOAEL为30 mg/kg/天。本研究结果为支持一种专利卡痛叶提取物的低毒性提供了证据。此类研究得出的科学相关数据应成为进一步研究卡痛产品益处和安全性的基础。
论文解读：帽柱木叶提取物SpecioTea?的大鼠90天亚慢性毒性研究
一、研究背景与目的
Mitragyna speciosa（俗称卡痛，kratom）是一种原产于东南亚的传统药用植物，其叶片传统上被用作提神剂、放松剂以及缓解轻微疼痛。尽管大量历史使用数据和近期临床研究表明，传统形式的卡痛具有较低的急性和慢性使用风险，但这些结论并不能直接推广至现代商业化卡痛产品。市面上存在种类繁多的卡痛产品，其中许多产品的生物碱组成和效力远异于传统制剂，特别是某些产品可能富集或人工添加了7-羟基帽柱木碱（7-hydroxymitragynine，7-HMG），这被认为是导致一些严重不良事件报告的可能原因。因此，对现代开发的卡痛衍生成分进行独立的毒理学安全评估至关重要。
本研究的目的是通过一项符合良好实验室规范（GLP）的大鼠90天亚慢性经口毒性研究，全面评估一种名为SpecioTea?的专利水性帽柱木叶提取物的潜在毒性。该提取物模拟传统卡痛茶的制备工艺，并标准化至特定的帽柱木碱浓度。研究旨在确定其未观察到有害作用水平（NOAEL），为后续的人体应用和产品安全性评价提供关键毒理学依据。
二、主要技术方法
研究人员采用的主要关键技术方法包括：
- 1.
动物模型与给药方案：选用8周龄的Sprague Dawley Crl:CD (SD)大鼠（Charles River Laboratories提供），共160只，雌雄各半。通过每日一次灌胃给药，设置四个剂量组：对照组（反渗透去离子水，RODI水）以及分别提供15、30、60 mg/kg/天帽柱木碱的SpecioTea?组，持续90天。
- 2.
多维度毒性评估体系：系统评估了多项指标，包括每日临床观察、每周体重与摄食量测量、治疗末期（第13周）的功能性观察组合（Functional Observational Battery, FOB）评估、眼科检查、以及在第30天、60天和终末期（第92/93天）的临床病理学检测（涵盖血液学、凝血功能、临床化学和尿液分析）。
- 3.
终末病理学检查：对所有计划安乐死的动物进行大体尸检，称量主要脏器重量（计算相对于体重和脑重的百分比），并对代表性组织样本进行苏木精-伊红（H&E）染色后的组织病理学检查。
三、研究结果
3.1 临床和眼科检查
SpecioTea?给药未引起与受试物相关的死亡。实验期间发生的个别动物死亡被归因于灌胃操作失误、采血并发症或被视为偶发事件，与受试物无直接关联。在60 mg/kg/天组的少数雌性大鼠中观察到活动减少、弓背姿势等异常临床体征，但在其他剂量组未见。未发现与SpecioTea?相关的眼科异常改变。
3.2 功能性观察组合（FOB）
FOB结果显示，SpecioTea?引起的药理学效应主要体现在60 mg/kg/天剂量组。具体表现为：雄性大鼠出现不自主运动（轻度震颤）、痛觉反应评分降低和后肢握力下降；雄性和雌性大鼠均出现步态异常、觉醒度下降、站立次数减少、体温降低和自发活动减少。部分效应（如活动减少）在30 mg/kg/天组也有体现。研究人员认为这些发现与卡痛已知的抗伤害感受、肌肉松弛、解热和镇静药理作用相符，其中仅有少数雄性大鼠的震颤现象需关注。
3.3 体重和摄食量
在≥15 mg/kg/天的所有剂量组中，SpecioTea?均导致剂量依赖性的体重增长减少（较对照组降低10.9%-28.4%）和最终体重降低（较对照组低6.5%-12.5%）。同时，摄食量也呈剂量相关性减少，尤其以60 mg/kg/天组最为显著。研究人员认为这些变化主要源于摄食量下降，可能与药物的药理作用或灌胃引起的胃肠道轻微刺激有关，但由于缺乏毒性相关临床体征，这些变化被判定为非不良性。
3.4 器官重量
SpecioTea?给药引起了多个脏器的重量变化。肝脏重量（绝对和相对值）在≥30 mg/kg/天组增加，并与组织学上的肝细胞肥大相对应。甲状腺相对重量在雄性（≥30 mg/kg/天）和雌性（60 mg/kg/天）中增加，与甲状腺滤泡细胞肥大相关。肾上腺相对重量在多个剂量组增加，与皮质肥大相关。雌性垂体绝对和相对重量在≥30 mg/kg/天组增加，与垂体增生相关。值得注意的是，卵巢绝对和相对重量在60 mg/kg/天组显著降低，与黄体数量减少的组织学发现相符。睾丸和附睾的相对重量在≥30 mg/kg/天组增加，但缺乏组织学相关改变。胸腺重量在≥30 mg/kg/天组降低。
3.5 血液学和临床化学
在整个研究期间，未观察到SpecioTea?对血液学和凝血参数产生不良影响。临床化学方面，观察到与摄食量减少相关的非不良性变化，包括血尿素氮（BUN）降低和血糖（Glucose）降低（主要在雌性）。此外，还观察到球蛋白和总蛋白水平的轻度升高。
3.6 尿液分析
在≥30 mg/kg/天（雄性）和60 mg/kg/天（雌性）的大鼠中，观察到尿量增加伴随比重降低，提示轻微的利尿效应，但被认为不具有不良意义。
3.7 大体病理学
大体尸检中，与受试物相关的唯一发现是甲状腺的暗色变色，这与组织学上的甲状腺滤泡细胞肥大相一致。
3.8 组织病理学
组织病理学检查揭示了多个与SpecioTea?相关的镜下改变。甲状腺在≥15 mg/kg/天组出现最小到轻度的滤泡细胞肥大，并在较高剂量组伴有细胞碎片和色素沉积。垂体在≥15 mg/kg/天雌性中出现最小程度的远侧部增生。肾上腺在60 mg/kg/天组出现最小程度的皮质肥大。肝脏在60 mg/kg/天组出现最小程度的肝细胞肥大。最关键的发现是生殖系统的变化：在60 mg/kg/天组，卵巢出现黄体减少（频率和程度增加），子宫颈出现上皮增生；睾丸出现最小到中度的退行性变/萎缩，附睾内出现细胞碎片和精子细胞减少。
四、讨论与结论
讨论部分指出，研究中观察到的多数变化，如体重减轻、摄食减少以及FOB中的行为学改变，均与卡痛的已知药理活性一致，且大部分被认为是非不良的适应性反应。肝脏和甲状腺的肥大被解释为一种常见的、可逆的适应性反应，与大鼠体内微粒体酶诱导有关，这种机制在人类中通常不具相关性，因此不被视为不良效应。
研究结论：由于在所有SpecioTea?剂量水平（包括最低的15 mg/kg/天）均观察到了药物效应（如体重增长减缓），因此无法确定未观察到效应水平（NOEL）。然而，基于在最高剂量（60 mg/kg/天）下观察到的对生殖系统的不良影响——即卵巢黄体减少、睾丸退行性变/萎缩以及附睾的改变，研究人员确定了SpecioTea?的未观察到有害作用水平（NOAEL）为30 mg/kg/天，该剂量适用于雄性和雌性大鼠。这一结论表明，在低于此剂量的暴露水平下，未观察到由受试物引起的显著毒性。本研究结果为支持一种标准化、模拟传统工艺的专利卡痛叶提取物的低毒性特征提供了重要的科学证据，并强调了基于科学数据的独立安全性评估对于现代卡痛产品监管的必要性。
