慢性丙型肝炎患者非空腹血清asprosin呈性别特异性差异且不反映肝纤维化分期的初步证据

《Egyptian Liver Journal》：Preliminary evidence that non-fasting serum asprosin differs by sex but not by fibrosis stage in chronic hepatitis C

　　

背景：asprosin（白脂素）是一种脂肪因子（adipokine），在糖尿病和脂肪肝病中升高，而这两种代谢合并症常存在于慢性丙型肝炎病毒（HCV）感染中。此外，肝硬化患者中可见血清asprosin水平降低。然而，其与慢性HCV肝纤维化分期的关联仍不明确。本研究检验血清asprosin是否反映慢性HCV患者的肝病严重程度。方法：在直接抗病毒药物（DAA）治疗前、治疗期间以及治疗结束后12周持续病毒学应答（SVR12）时，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定血清asprosin水平。分析其与肝纤维化、肝硬化、体重指数（BMI）、性别、糖尿病、肝脂肪变、HCV病毒载量、基因型和循环脂质的关联。结果：在慢性HCV中观察到肥胖男性血清asprosin较高，而肥胖女性未见升高。排除肥胖患者后，女性血清asprosin水平高于男性。无论肥胖状态如何，合并和/或未合并糖尿病及/或肝脂肪变的患者之间血清asprosin无差异。其与通过剪切波弹性成像（SWE）或纤维化-4（FIB-4）评分评估的肝纤维化无关联。超声诊断的肝硬化患者血清asprosin水平与无肝硬化者相当。血清asprosin也与肝功能标志物、终末期肝病模型（MELD）评分、HCV病毒载量或基因型无关。DAA治疗未改变血清asprosin水平，治疗前为1.38（0.32–4.61）ng/ml，治疗12周时为1.30（0.16–2.27）ng/ml，SVR12时为1.32（0.40–3.75）ng/ml。女性在治疗结束时和SVR12时血清asprosin水平略高于男性。治疗前后血清asprosin与磷脂酰肌醇和磷脂酰胆碱呈正相关。结论：慢性HCV患者血清asprosin水平显示性别特异性差异。相反，其不反映代谢合并症、肝纤维化、肝硬化或病毒学特征，并在DAA治疗期间保持稳定。其与治疗前后循环磷脂的正相关关系提示其在脂质代谢中可能发挥作用，值得进一步研究。

研究背景：慢性丙型肝炎病毒（HCV）感染与代谢紊乱（包括2型糖尿病）相关，肝脂肪变常见，可由病毒直接效应、潜在代谢病或二者共同导致。HCV感染者胰岛素抵抗主要发生于脂肪组织，病毒清除可改善脂肪组织和肝脏胰岛素敏感性。asprosin（白脂素）是一种脂肪因子（adipokine），由furin蛋白酶切割profibrillin-1产生，脂肪组织为主要来源，也表达于肝和肾；免疫组化未在肝细胞检测到asprosin。asprosin调节食欲并在空腹时刺激肝糖生成以维持血糖；病理性升高参与高胰岛素血症及代谢和心血管病；可促进肝脂质蓄积并经核因子κB诱导肝脏炎症，但在高脂饮食大鼠模型中有保护效应。肥胖是代谢功能障碍相关脂肪性肝病（MAFLD）的关键风险，加重肝病；血清asprosin随体重增加，正常体重平均约17 ng/ml，肥胖近40 ng/ml，并与受控衰减参数（CAP）正相关。血清asprosin在空腹时强升高；非空腹样本中代谢性肝脂肪变患者仍高于健康对照（均值2.3 vs 1.5 ng/ml），糖尿病合并MAFLD者高于无MAFLD者（292 vs 255 pg/ml）。相反，健康对照与不同病因慢性肝病血清asprosin无差异，肝硬化显著降低，非肝硬化慢性肝病患者中与FibroScan肝硬度负相关，与CAP和BMI无关。肝纤维化评估关键；肝活检为参考标准但有创，SWE、FibroScan、B超及FIB-4可用于非侵入评估。DAA治疗12周治愈率高，炎症因子快速下降，但肝纤维化在治疗或SVR12常不消退，脂肪变可能持续或增加，糖代谢改善。故本研究评估非空腹血清asprosin是否与病毒治愈前纤维化分期相关，并检查DAA前和SVR12时其是否按糖尿病、肝脂肪变、性别和肥胖状态不同。

研究开展与意义：研究人员开展单中心前瞻性研究，纳入成人慢性HCV初治且适合DAA者，代偿性肝硬化可纳入，排除HBV或HIV共感染；在基线、治疗4周和12周、SVR12测血清asprosin并分析临床、病毒及脂质指标。结论为：慢性HCV中血清asprosin有性别特异性差异，但不反映代谢合并症、肝纤维化、肝硬化或病毒学特征，DAA期间稳定；与循环磷脂正相关提示脂质代谢作用。意义在于不支持其作为治疗应答或肝病严重程度标志物，并提示脂质代谢值得进一步研究。

关键技术方法：样本来自德国一所大学医院2014年9月1日至2017年2月27日招募的成人慢性HCV感染初治患者队列；纳入适合DAA治疗者，代偿性肝硬化可纳入，排除HBV或HIV共感染；最终用于asprosin检测的血清样本为基线96例、治疗4周107例、12周91例、SVR12 85例。采用ELISA测非空腹血清asprosin；以SWE、FIB-4和超声评估纤维化、肝硬化及脂肪变；检测HCV RNA和基因型；用非参数检验、线性回归和Spearman相关分析。

研究结果：
血清asprosin与年龄、BMI、性别、脂肪肝和糖尿病的关系：基线96例（女44例），asprosin为1.38（0.32–4.61）ng/ml，男女相似（p=0.153），与年龄负相关（r=-0.227，p=0.026），与BMI无关（r=-0.075，p=0.499）；正常、超重、肥胖三组无差异（p=0.258），女性分层无差异（p=0.139），男性肥胖者高于超重者；排除肥胖者后女性高于男性。糖尿病与肝脂肪变均无差异（p=0.361；p=0.863），BMI≤30 kg/m²及性别分层亦无差异。
血清asprosin与肝纤维化和肝硬化的关系：SWE分期F0 30例、F1 12例、F2 2例、F3 15例、F4 37例，asprosin无差异；FIB-4无纤维化29例、中间21例、纤维化46例，无差异；超声肝硬化37例与无肝硬化者相似，排除肥胖后仍无差异。肝硬化者LDL显著较低（p<0.001），磷脂酰胆碱（p=0.001）、鞘磷脂（p<0.001）、甘油三酯（p=0.004）、神经酰胺（p<0.001）、溶血磷脂酰胆碱（p=0.001）下降，磷脂酰肌醇下降较弱（p=0.042）。
血清asprosin与炎症和肝功能的关系：asprosin与MELD、胆红素、INR、AST、ALT、白蛋白无相关；与肌酐负相关（r=-0.313，p=0.002）、与GFR正相关（r=0.233，p=0.023）；血小板、白细胞、C反应蛋白、降钙素原无相关；LDL/HDL无相关；与总胆固醇、甘油三酯、溶血磷脂酰胆碱、鞘磷脂无相关；与磷脂酰胆碱（r=0.276，p=0.010）、磷脂酰肌醇（r=0.397，p<0.001）、神经酰胺（r=0.312，p=0.003）正相关。性别、BMI、年龄、磷脂酰胆碱、磷脂酰肌醇可预测asprosin（F(5,69)=6.014，p<0.001），磷脂酰肌醇为显著因素（p<0.001）；LDL/HDL模型不显著（p=0.167）。
血清asprosin、病毒载量和基因型：与病毒载量无相关（r=0.069，p=0.507）；基因型1a、1b、3a及罕见型间无差异，排除肥胖后仍无差异（p=0.187）。
病毒治愈期间和SVR12的血清asprosin：59例有系列样本者与全队列基线特征相似（仅全队列胆红素较高，p=0.039）；DAA有效清除HCV，SVR12时转氨酶显著下降，降钙素原下降，白蛋白改善，LDL升高；asprosin在治疗前、4周、12周和SVR12均相似，排除BMI>30 kg/m²后仍稳定。
治疗结束时的血清asprosin：91例asprosin为1.30（0.16–2.27）ng/ml；与LDL正相关（r=0.231，p=0.031），排除肝硬化（r=0.286，p=0.024）或肥胖（r=0.336，p=0.005）后仍显著；与磷脂酰胆碱（r=0.519）、神经酰胺（r=0.389）、鞘磷脂（r=0.232）、磷脂酰肌醇（r=0.603）、总胆固醇（r=0.355）、甘油三酯（r=0.349）正相关，与溶血磷脂酰胆碱无关；排除34例肝硬化后磷脂酰胆碱、神经酰胺、磷脂酰肌醇、总胆固醇仍相关；LDL可预测asprosin（p=0.020；LDL p=0.028）；女性高于男性（p=0.033）。
SVR12的血清asprosin：85例；与MELD、胆红素、白蛋白、INR、AST、肌酐、GFR、C反应蛋白、降钙素原、白细胞/血小板、HDL、年龄、BMI无相关；与ALT负相关（r=-0.238，p=0.028），与LDL正相关（r=0.311，p=0.006；排除肥胖后r=0.394，p=0.006）。肝硬化32例与无肝硬化53例相似（p=0.499），男女分层亦无差异；脂肪变37例不影响asprosin；肥胖男性与BMI<25及25–30 kg/m²男性相似（p=0.425）；女性38例高于男性47例，接近显著（p=0.053）。

讨论与结论：原文讨论指出，在慢性HCV中asprosin与代谢合并症、肝病严重程度和病毒学治愈无关，但有性别差异并与磷脂参数正相关。既往在肝脂肪变/MAFLD、糖尿病及CAP阳性人群中见asprosin升高，而本队列中糖尿病和肝脂肪变均未显示升高，提示代谢肝病中的关系不能直接外推至HCV。肝硬化方面，Wang et al. 用空腹8–10 h样本发现肝硬化asprosin降低、与FIB-4负相关；本研究用非空腹血清未发现差异，原文提出可能解释为肝硬化时空腹相关asprosin升高受损，但因非肝硬化组含纤维化患者及FIB-4差异，解释需谨慎。葡萄糖可抑制asprosin，肝硬化空腹血糖常较高，但糖尿病患者常同时空腹血糖和asprosin升高，且本队列糖尿病与asprosin无关，提示HCV中调控不同。治疗后asprosin与LDL在治疗结束和SVR12正相关，治疗前缺失可能与HCV感染时LDL降低及病毒清除后恢复有关；与多种脂类正相关，磷脂酰肌醇最强（R²=0.36），磷脂酰胆碱R²=0.25，神经酰胺0.13，胆固醇0.11，LDL0.09，磷脂酰肌醇可预测asprosin，支持与磷脂稳态潜在联系但非因果。治疗前asprosin与GFR正相关、与肌酐负相关，治疗后消失，肾功能关联需研究。性别差异方面，女性是循环脂肪因子决定因素，既往报道女性asprosin较高；本队列BMI<30 kg/m²者治疗前女性较高，肥胖男性升高而女性不升高，提示性别修饰asprosin与肥胖关系；SVR12该模式不明显，可能病毒清除减弱或掩盖差异，肥胖例数少需验证。局限性：观察性不能因果；未记录糖代谢；无健康对照；非空腹；单中心。结论翻译：在慢性HCV感染中，血清asprosin显示性别特异性差异，但与糖尿病、肝脂肪变、肝纤维化、肝硬化或病毒学应答无关；其在DAA治疗期间的稳定性不支持作为治疗应答或肝病严重程度标志物；治疗前后与循环磷脂的正相关提示其在脂质代谢中可能发挥作用，值得进一步研究。