《Journal of Diabetes & Metabolic Disorders》：Continuous caloric restriction and diet replacement but not alternate-day fasting may enhance susceptibility to glucose intolerance, dyslipidemia and cell stress under renewed high-fat diet
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背景：体重反弹影响大多数试图治疗肥胖及其合并症的个体，并与代谢和心血管疾病风险增加相关。目前已提出多种减重策略，包括持续热量限制（caloric restriction, CCR）、饮食替代（diet replacement, DR）和隔日禁食（alterna
背景：体重反弹影响大多数试图治疗肥胖及其合并症的个体，并与代谢和心血管疾病风险增加相关。目前已提出多种减重策略，包括持续热量限制（caloric restriction, CCR）、饮食替代（diet replacement, DR）和隔日禁食（alternate-day fasting, ADF）。目的：比较这些策略在体重维持及代谢、氧化和炎症结局方面的效果。方法：雄性Wistar大鼠接受三阶段方案。第一阶段，动物接受高脂饮食（high-fat diet, HFD）八周以诱导肥胖。第二阶段，将动物分为四组：自由摄食HFD组（ad lib-HFD，持续HFD）、R-HFD组（HFD重量减少30%，w/w）、ADF-HFD组（24 h禁食与24 h自由摄食HFD交替）以及ad lib-LFD组（通过自由摄食低脂饲料进行DR），持续六周。最后，所有组恢复自由获取HFD四周。结果：所有干预均延缓了体重增加；然而，停止干预后出现快速体重反弹。在重新自由暴露于HFD下，CCR和DR诱导了更高的血脂异常易感性，如时间分析所示。这些策略还损害了肝脏和脂肪组织的抗氧化和抗炎反应，并在重新无限量供应致肥胖饮食时加剧了淋巴结应激。相比之下，ADF似乎对体重反弹的代谢并发症具有部分保护作用。结论：尽管减重效果相似，ADF可能在体重反弹期间更好地维持代谢稳态。
肥胖是一种慢性疾病，其患病率自1990年以来增加一倍以上，现影响全球每八人中的一人。肥胖相关代谢紊乱如胰岛素抵抗和血脂异常导致全因死亡风险增加22%，心血管死亡风险增加49%。持续减重可改善糖化血红蛋白和总胆固醇等临床相关标志物，因此减重是肥胖及其并发症的一线干预。持续热量限制（caloric restriction, CCR）是标准减重策略，但需持续调控食物数量和质量，依从性较差。隔日禁食（alternate-day fasting, ADF）作为间歇性禁食的一种形式，不改变食物成分，更易适应动物模型。饮食替代（diet replacement, DR）则通过改变宏量营养素构成实现减重。然而，减重后体重反弹极为普遍，约半数个体在12个月内恢复全部减重，仅11%能在5年后维持5公斤减重。体重循环或“悠悠球节食”与糖尿病和不良心血管事件风险增加相关。目前比较这些策略在减重后体重维持期对代谢、氧化和炎症结局影响的研究不足。因此，研究人员旨在比较ADF、CCR和DR对体重反弹及代谢和细胞反应的影响，并假设ADF可能部分保护免受体重反弹相关的代谢功能障碍。
研究人员采用雄性Wistar大鼠（n=32，约233±32 g）开展三阶段实验。所有动物来自巴西Regional University of the Northwestern Rio Grande do Sul State（UNIJUI）动物设施，在标准条件下饲养。第一阶段给予高脂饮食（HFD）八周诱导肥胖；第二阶段随机分为四组进行六周干预：ad lib-HFD（持续HFD）、R-HFD（HFD重量减少30%，w/w）、ADF-HFD（24 h禁食与24 h自由摄食HFD交替）和ad lib-LFD（自由摄食低脂饲料）；第三阶段所有组恢复自由摄食HFD四周。结果显示，所有干预均延缓体重增加但停止后快速反弹；CCR和DR增加血脂异常和葡萄糖不耐受易感性，损害肝脏和附睾白色脂肪组织（eWAT）的抗氧化和抗炎反应，而ADF未产生有害代谢效应，可能更好地维持代谢稳态。
主要关键技术方法：采用三阶段饮食干预的动物模型；记录食物摄入计算能量摄入；通过腹腔注射葡萄糖耐量试验（GTT）评估糖耐量；使用比色法测定血清总胆固醇、甘油三酯、HDL-C和LDL-C及肝酶；肝脏组织经苏木精-伊红染色评估脂肪变性；以硫代巴比妥酸反应物质（TBARS）法测定脂质过氧化；分光光度法检测超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化氢酶（CAT）活性；酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血浆和组织HSP70水平；Western blot检测淋巴结iHSP70表达。
饮食干预延缓体重增加，但增加自由获取致肥胖饮食下体重反弹的易感性。通过每周测量体重和Lee指数发现，HFD喂养八周成功诱导肥胖和葡萄糖不耐受。第二阶段各干预组体重增加减缓，但第三阶段恢复HFD后，所有干预组体重反弹幅度大于对照组，其中R-HFD组在第三阶段Lee指数显著增加，提示其体重反弹最明显。
先前CCR和DR使动物在自由获取致肥胖饮食下易发生代谢损伤。通过GTT和血脂检测发现，DR组在第三阶段30分钟血糖高于对照组，提示葡萄糖不耐受倾向；CCR和DR组在第三阶段胆固醇和甘油三酯升高，且体重反弹程度与血脂紊乱严重程度呈正相关。
先前CCR和DR降低体重反弹后肝脏细胞防御。肝脏组织学显示所有组均有脂肪变性和肝细胞气球样变，但无纤维化或慢性炎症；CCR和DR组肝脏CAT活性降低，SOD和脂质过氧化无组间差异；肝脏iHSP70水平无组间差异，但与肝酶存在相关性，提示热休克反应（HSR）与肝细胞应激的关联。
先前CCR和DR降低eWAT细胞保护。通过检测eWAT中iHSP70含量，发现R-HFD和ad lib-LFD组显著降低，但SOD、CAT活性和脂质过氧化无组间差异；eWAT iHSP70与体重反弹呈负相关，尤其在DR组，提示脂肪组织应激反应耗竭可能参与代谢异常。
CCR和DR改善体重反弹后白细胞炎症指标。通过血细胞计数计算中性粒细胞与淋巴细胞比值（NLR）、单核细胞与淋巴细胞比值（MLR）和血小板与淋巴细胞比值（PLR），发现R-HFD和ad lib-LFD组NLR和MLR降低，R-HFD组PLR也降低；淋巴结iHSP70在R-HFD组升高，并与淋巴细胞比例正相关、与NLR和PLR负相关，表明局部HSR上调可能影响全身炎症状态。
讨论总结：本研究表明，ADF在体重反弹期间未引起有害代谢后果，而CCR和DR与代谢紊乱、氧化防御受损及脂肪组织应激耗竭相关。可能机制涉及减重干预后下丘脑POMC神经元调控改变、体重循环中脂肪细胞肥大和脂质合成增强，以及HSP70介导的细胞保护功能降低。体重反弹程度与代谢和免疫炎症严重程度密切相关。结论：所有干预措施均有效延缓体重增加并改善身体成分指数，但停止干预后均导致快速体重反弹。尽管存在反弹，ADF未引发不良代谢结局，可能提供更有利的代谢特征；相比之下，在重新自由摄食HFD下，DR和CCR较ADF可能增加葡萄糖不耐受和血浆甘油三酯升高的易感性，并损害肝脏和eWAT的抗氧化和抗炎反应，加剧淋巴结应激。因此，ADF可能比CCR和DR在体重反弹期间更好地维持代谢稳态。
