《Journal of Chromatography A》：Rapid Ultrasound-Assisted Enzymatic Hydrolysis Coupled with LC-MS/MS for Sensitive Detection of Tyrosine Adducts in OPNAs-Exposed Plants
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•建立了一种快速超声辅助酶解法（RUEH），用于植物源性有机磷神经性毒剂（OPNAs）-酪氨酸加合物分析，将样品制备时间缩短至 20 分钟。•该方法适用于冻干叶片（FDL）和新鲜叶片（FL）样品，且不影响性能。•在拟南芥和大米等真实植物样品中，经控制暴露后成功检测到 OPNA
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建立了一种快速超声辅助酶解法（RUEH），用于植物源性有机磷神经性毒剂（OPNAs）-酪氨酸加合物分析，将样品制备时间缩短至 20 分钟。
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该方法适用于冻干叶片（FDL）和新鲜叶片（FL）样品，且不影响性能。
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在拟南芥和大米等真实植物样品中，经控制暴露后成功检测到 OPNAs 酪氨酸加合物。
章节摘要
引言
有机磷神经性毒剂（OPNAs）是高毒性的胆碱酯酶抑制剂，历史上曾作为化学武器使用，并在多次冲突和恐怖袭击中被部署，对公共安全和人类健康构成持续威胁 [[1], [2], [3], [4]]。尽管《化学武器公约》（CWC）明确禁止其生产和使用，但由于其合成相对简单且毒性极强，滥用的风险依然存在 [5,6]。沙林（GB）曾在叙利亚期间被释放
实验安全
OPNAs 是致命性毒剂，可抑制乙酰胆碱酯酶活性，导致中枢和外周胆碱能神经系统严重功能障碍，严重时可致死。因此，所有涉及 OPNAs 的实验必须在专业实验室中进行。操作人员应佩戴防毒面具和橡胶手套（双层），所有实验操作应在通风橱下进行。被 OPNAs 污染的容器和一次性耗材
样品制备条件优化
如图 1 所示，整个实验工作流程如下：植物样品经 OPNA 暴露后，立即在液氮中速冻、冻干并研磨成粉末，然后进行 RUEH 处理和固相萃取（SPE）净化，最后进行 LC-MS/MS 分析。为优化制备参数，采用每片暴露 10 μg GD 的真实拟南芥样品作为测试材料。使用真实暴露样品而非加标空白样品
结论
本研究成功建立了一种基于 RUEH-SPE-LC-MS/MS 的快速灵敏方法，用于分析植物中的 OPNAs-Tyr 加合物。系统优化了酶用量、超声消解时间和振幅等关键参数，实现了 20 分钟内的高效酶切，显著缩短了样品制备流程。GD-Tyr、VX-Tyr 和 GA-Tyr 的检出限（LOD）分别为 0.5、5 和 10 ng/mL。在建立的线性范围内，
写作过程中使用生成式人工智能和人工智能辅助技术的声明
在撰写本文期间，作者仅使用生成式人工智能工具进行语言编辑和提高可读性。作者已仔细审查和修改。作者对所有人工智能辅助输出负责，并对稿件内容承担全部责任。
作者贡献
稿件由所有作者共同贡献撰写。所有作者均已批准稿件的最终版本。
CRediT 作者贡献声明
Hongqian Mo: 撰写 – 原始草稿，数据整理。 Linlin Kong: 撰写 – 审阅与编辑，数据整理。 Jinjuan Xue: 方法论，数据整理。 Yongqi Li: 数据整理。 Yongcun Yang: 数据整理。 Jia Chen: 方法论，数据整理。 Qin Liu: 验证，方法论。 Yulong Liu: 资源。 Yanqin Liu: 资源。 Jianfeng Wu: 资源，资金获取。 Zhiyong Nie: 数据整理。 Bin Xu: 形式分析，概念化。 Zhi Li: 形式分析。 Bo Ma: 数据整理。 Yiling Liu:
Hongqian Mo|Linlin Kong|Jinjuan Xue|Yongqi Li|Yongcun Yang|Jia Chen|Qin Liu|Yulong Liu|Yanqin Liu|Jianfeng Wu|Zhiyong Nie|Bin Xu|Zhi Li|Bo Ma|Yiling Liu|Lei Guo|Hua Xu|Jianwei Xie
