含氯烷基苯酮DIF-3衍生物促自噬活性的鉴定及其与mTORC1/AMPK通路抑制、氧化应激及不稳定Fe2+稳态改变的关联

《International Journal of Molecular Sciences》：Derivatives of Dictyostelium Differentiation-Inducing Factor-3 Promote Autophagic Flux, Mitochondrial Dysfunction and Iron-Associated Oxidative Stress

　　为克服治疗耐药性，需要新型抗癌药物，而自噬是一个极具前景的靶点。含氯烷基苯酮——细胞内分化解诱导因子1和3（DIF-1和DIF-3）及其衍生物具有抗增殖和抗转移活性；然而，其分子机制尚未完全阐明。利用GFP-LC3-RFP-LC3ΔG自噬通量报告系统，我们鉴定出Bu-DIF-3和CP-DIF-3为促自噬衍生物，并主要在HeLa细胞中表征了其作用机制，同时在HAP1细胞中进行了部分自噬和AMP活化蛋白激酶（AMPK）的检测。两种化合物均抑制mTORC1信号通路，激活AMPK，并降低线粒体膜电位（MMP）。Bu-DIF-3还额外诱导活性氧物种（ROS）及氧化还原应激反应基因，包括SLC7A11和CHAC1。SLC7A11的诱导可能反映了一种代偿性抗氧化反应。与CP-DIF-3不同，Bu-DIF-3增加了FerroOrange可检测的不稳定Fe²⁺信号，且去铁胺可部分恢复降低的MTT信号，支持铁可能参与了代谢活性降低的过程。因此，DIF-3甲氧基的修饰可调节促自噬活性及相关应激反应。Bu-DIF-3与氧化应激及不稳定Fe²⁺稳态改变相关；铁死亡相关机制是否参与其中仍有待明确。这些发现为进一步评估Bu-DIF-3及相关DIF衍生物提供了细胞学依据。