## 中文标题 韩国济州岛搁浅自由放养短吻真海豚（Delphinus delphis）全身性猪红斑丹毒丝菌（Erysipelothrix rhusiopathiae）感染伴菱形皮肤病变：死后计算机断层扫描、病理学及多组织分子检测

《Veterinary Sciences》：Systemic Erysipelothrix rhusiopathiae Infection with Rhomboid Skin Lesions in a Free-Ranging Short-Beaked Common Dolphin (Delphinus delphis) Stranded in Jeju, Republic of Korea: Post-Mortem Computed Tomography, Pathology and Multi-Tissue Molecular Detection

　　

## 摘要专业翻译

猪红斑丹毒丝菌（Erysipelothrix rhusiopathiae）可在鲸目动物中引起散发性、常为致死性的败血症；已发表的病例几乎完全依赖培养分离物确诊，且均未包含死后影像学检查。研究人员利用冷冻尸体的死后计算机断层扫描（post-mortem computed tomography, PMCT）、尸检、组织病理学及分层分子检测，调查了一头搁浅于韩国济州岛的未成年雄性短吻真海豚（Delphinus delphis）。菱形皮肤病变穿透皮肤延伸至鲸脂层。PMCT记录了重力依赖性肺部混浊、气管和支气管内液体、腹膜积液、无分解气体及一个胃内鱼钩，上述发现均在尸检中得到确认。由于尸体曾冷冻保存，未尝试细菌培养。广谱16S rRNA测序在12个组织中的11个检出Erysipelothrix属DNA；种特异性PCR及扩增子测序在全部12个组织中鉴定出E. rhusiopathiae，获得一条完全一致的356-bp序列。组织病理学显示表皮凝固性坏死伴间隔性脂膜炎（septal panniculitis），病变内见大量革兰氏阳性菌，并有肺出血和水肿、间质性肾炎及反应性淋巴结炎，与致死性败血症相符。该病例提供了丹毒的影像学对应表现、适用于冷冻尸体的免培养诊断框架及逐组织分子数据集；该菌株与其他韩国鲸目动物分离株的关系仍有待基因组学层面确定。

## 论文解读

### 研究背景与科学问题

猪红斑丹毒丝菌（Erysipelothrix rhusiopathiae）是一种兼性厌氧、不产芽孢的革兰氏阳性杆菌，宿主范围广泛，可引起猪丹毒，也可感染接触患病动物或鱼类的人员导致类丹毒（erysipeloid）。在鲸目动物中，该菌感染呈现急性败血型与亚急性皮肤型两种形式，后者以特征性的菱形皮肤斑块（rhomboid skin plaques）为标志。已发表的鲸目动物丹毒病例几乎完全依赖细菌培养分离物确诊，且均未包含死后影像学检查。搁浅鲸类尸体常因自溶、冷冻或死后过度生长而无法进行可靠培养，广谱16S rRNA测序又无法区分E. rhusiopathiae与密切相关的E. tonsillarum等菌种。此外，短吻真海豚（Delphinus delphis）在韩国济州岛搁浅记录中占比很低，2016至2023年间455具鲸类尸体中仅7具（1.5%）为该种，其病原暴露情况几乎为空白。因此，建立适用于冷冻尸体的免培养诊断流程并拓展该病的宿主与地理记录，是搁浅应急网络的实际需求。

### 研究内容与结论

研究人员对2026年1月11日在韩国济州岛西归浦市昌川里搁浅的一头未成年雄性短吻真海豚（编号SL26-0209A）冷冻尸体进行了系统调查。线粒体细胞色素b（cytochrome b）与D-loop控制区测序确认为短吻真海豚，与韩国水域标本完全一致。研究人员整合了PMCT、尸检、组织病理学与分层分子检测。PMCT显示重力依赖性肺部混浊、气管与支气管内液体、腹膜积液、无分解气体及胃内金属异物。尸检见典型菱形皮肤病变贯穿皮肤进入鲸脂层，胸腔与腹腔含血性液体，胃内鱼钩伴胃壁增厚。组织病理学证实表皮凝固性坏死、间隔性脂膜炎、肺出血水肿、间质性肾炎及反应性淋巴结炎。广谱16S rRNA测序在12个组织中的11个检出Erysipelothrix属序列，种特异性PCR与扩增子测序在全部12个组织中鉴定出E. rhusiopathiae，获得完全一致的356-bp序列，并经与全部230个公开基因组比对确认其独特性。该病例为西北太平洋地区短吻真海豚首例确诊，也是鲸目动物丹毒首次获得死后影像学描述。

### 关键技术方法

研究人员使用16排32层螺旋CT（Aquilion Lightning，佳能医疗）对冷冻尸体行全身PMCT，分三次重叠采集（100 kVp、250 mA、0.75 s旋转时间、1.0 mm层厚重建）；随后行常规尸检及组织病理学检查（苏木精-伊红染色、革兰染色）；分子检测采用分层策略：广谱16S rRNA PCR（引物91E/13B）、Erysipelothrix属内PCR（MO101/MO102）及E. rhusiopathiae种特异性PCR（ER1F/ER1R，靶向rRNA操纵子5S rRNA基因下游非编码区），扩增产物经Sanger双向测序、BLASTn比对及最大似然系统发育分析；胃内线虫经线粒体rrnS基因测序鉴定。样本为同一头搁浅个体的12种组织，因尸体冷冻保存未尝试细菌培养。

### 研究结果

**搁浅经过与尸体处理**：尸体于2026年1月11日被发现，由济州大学搁浅团队接管，?20°C冷冻保存；2月9日行PMCT扫描，2月13日解冻后在韩国水产资源公团（FIRA）济州分社尸检。

**物种鉴定与形态学测量**：1143-bp细胞色素b序列与韩国水域D. delphis有角线粒体基因组完全一致，480-bp D-loop序列匹配东海KH14单倍型；雄性，体长214.3 cm，体重92 kg，未成年，大体新鲜至轻度自溶状态（Smithsonian代码2）。

**死后计算机断层扫描**：PMCT记录双肺广泛重力依赖性混浊，重力依赖区实变，非依赖区呈斑片状磨玻璃影；气管与主支气管内见液体密度；胃内见约30 mm弧形高密度金属异物，符合鱼钩；气体仅限于胃肠腔内，无血管、皮下或器官内气体。这些影像表现与尸检和镜下所见相关联。

**大体所见**：体表共7处边界清晰的四方形至菱形皮肤病变（左胁、尾柄两侧、背脊两处、腹胸两处），中心溃疡、边缘隆起，对应鲸脂层灰褐色方形变色区贯穿皮肤全层；颈淋巴结肿大，胸腹腔血性积液，肺弥漫湿重；胃内鱼钩嵌于黏膜伴周围胃壁显著增厚及黏液附着，提示慢性异物性胃炎；前胃壁内嵌大量线虫。

**组织病理学**：皮肤病变呈表皮与真皮乳头层全层凝固性坏死，伴大量退化中性粒细胞及核碎裂；真皮深层胶原束坏死伴密集炎症浸润；溃疡边缘表皮与真皮间见含球菌团的表皮下裂隙；炎症延伸至真皮下浅层鲸脂，呈坏死性间隔性脂膜炎。革兰染色显示大量革兰氏阳性杆菌分布于坏死表皮及真皮全层。肺见肺泡间隔充血、出血及蛋白性水肿液；肾见多灶性间质性肾炎；淋巴结呈急性反应性淋巴结炎；脾充血伴中性粒细胞增多。冷冻-解冻人工产物中度影响镜下评估，但病变可判读。

**E. rhusiopathiae分子检测**：广谱16S rRNA测序在11/12组织中以Erysipelothrix序列为最优匹配，肌肉样本为混合信号；属内与种特异性PCR在全部12个组织（含骨骼肌）均阳性，对照均阴性；ER1扩增子测序获得完全一致的356-bp序列，与模式株ATCC 19414有3个位点差异（99.2%同源性），与2018年韩国糙齿海豚分离株KC-Sb-R1最为接近（99.4%），但与所有230个公开E. rhusiopathiae基因组比对仍属独特。胃线虫rrnS测序鉴定为Anisakis simplex（sensu lato）。

### 讨论与结论

讨论部分指出，特征性菱形皮肤病变、血性体腔积液、肺充血出血水肿、反应性淋巴结炎及12个组织（包括心血）中E. rhusiopathiae DNA的系统性检出，共同支持致死性败血性丹毒合并皮肤受累的诊断。由于未获得培养分离物且未行免疫组化或原位杂交确认，该诊断界定为可能的死因而非最终证实。多项证据排除了死后污染或携带污染：实验室内从未处理过该菌培养物、分离株或阳性对照DNA；提取空白、未感染海豚组织、大肠杆菌DNA及无模板对照均为阴性；同一序列在解剖学独立的多个部位重复检出。由于16S rRNA基因无法区分E. rhusiopathiae与E. tonsillarum，物种判定基于种特异性ER1位点序列，该位点可与E. tonsillarum、E. piscisicarius及新近描述的海洋哺乳动物相关种E. enhydrae和E. amsterdamensis明确区分。菌株与2018年韩国分离株的关系仅凭单一356-bp位点的一个共有替换无法确立，需全基因组或多位点比较。PMCT虽不能建立病原学诊断，但提供了冷冻鲸类尸体败血性肺水肿的原始影像参照，并可在解剖前识别腹膜积液与胃内异物；其局限性包括无法区分水肿、出血与肺炎，亦无法清晰分辨淋巴结。胃内鱼钩提示长期渔业互作，前胃线虫附着可能为细菌入侵提供途径，但单病例无法确立因果关联。济州岛周边短吻真海豚尸体占比近年上升，是否反映分布变化或监测力度变化尚无法确定。

研究结论：该病例是韩国海域自由放养短吻真海豚首例确诊的全身性E. rhusiopathiae感染伴典型菱形皮炎，败血性丹毒为可能死因，为鲸目丹毒文献增添三方面内容：一是该病的PMCT影像学描述，并与尸检和组织病理学关联；二是适用于冷冻尸体的免培养分层分子诊断流程，通过对12个组织的扩增子测序确立菌种并排除其他Erysipelothrix菌种；三是逐组织分子数据集，其直接来自组织的序列与所有可用基因组比较后显示独特，但无法单独确立与先前韩国鲸类分离株的关系。作者建议该区域海豚突然死亡与几何形皮肤病变的鉴别诊断应纳入丹毒；在培养不可行时应采用能区分E. rhusiopathiae与其他Erysipelothrix菌种的分子方法；搁浅应急人员因该菌的人畜共患风险应采取适当生物安全防护措施。