《Veterinary Parasitology》：Prevalence of
Echinococcus spp. in dogs in Europe – multicentre study from the MEmE project
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•研究人员对来自7个欧洲国家的犬粪样进行检测，以检出Echinococcus spp.。
•该多中心研究采用相同的分子方法。
•在犬中，E. multilocularis的检出率为0.2%，E. granulosus s.l.的检出率为1.4%。
•研究评估了
•研究人员对来自7个欧洲国家的犬粪样进行检测，以检出Echinococcus spp.。
•该多中心研究采用相同的分子方法。
•在犬中，E. multilocularis的检出率为0.2%，E. granulosus s.l.的检出率为1.4%。
•研究评估了多种参数对绦虫流行率的影响。
1. Introduction
棘球蚴病（echinococcosis，由Echinococcus spp.引起的人兽共患寄生虫病）是全球公共卫生关注的人兽共患寄生虫病，主要包括肺泡型棘球蚴病（alveolar echinococcosis, AE）和囊型棘球蚴病（cystic echinococcosis, CE），分别由Echinococcus multilocularis和Echinococcus granulosus sensu lato（E. granulosus s.l.）所致，二者在欧洲均呈地方性流行。AE若不治疗可致命，寄生虫囊泡主要发生于肝脏并可转移；CE为慢性疾病，囊肿多位于肝和肺。E. multilocularis和E. granulosus s.l.的终宿主（definitive host，成虫寄生的宿主）为野生和家养犬科动物，偶见猫科；E. multilocularis在欧洲的主要终宿主为红狐，呈涉及田鼠类啮齿动物中间宿主（intermediate host，幼虫寄生的宿主）的森林循环；E. granulosus s.l.主要为家养循环，犬是主要终宿主，家畜尤其羊为中间宿主。既往欧洲犬群研究多为局部、方法不一、目标犬群不同；仅Dyachenko et al.的大规模研究在7国2万余犬中使用同一检测方法，报告E. multilocularis为0.2%，未检出E. granulosus s.l.。欧洲犬感染率通常较低，可能与犬较少食入野生啮齿动物及感染家畜屠宰副产物有关，但犬与人密切接触及经粪污染环境、土壤、水和食物的间接暴露，使犬作为人感染来源不能排除。为此，研究人员在北部、东部、南部和西部欧洲E. multilocularis和/或E. granulosus s.l.已知地方性流行区开展MEmE多中心研究，以统一方法提供当前犬Echinococcus spp.流行率数据并评估相关参数影响，为更精确绘制潜在人兽共患风险及One Health防控提供依据。
2. Materials and Methods
研究人员于2020年2月至2022年2月在丹麦、爱沙尼亚、法国、意大利撒丁岛、拉脱维亚、挪威斯瓦尔巴群岛和波兰的Echinococcus spp.流行区采集1619份犬粪样，每份对应一只犬；通过问卷收集年龄、品种、性别、居住地、活动、驱虫频率、饲喂及啮齿动物接触等信息。实验室采用统一DNA提取和多重PCR（multiplex PCR）检测E. multilocularis、E. granulosus s.l.及其他绦虫，并对部分样品行实时PCR（qPCR）和测序验证；PCR阳性样品以漂浮法镜检Taenia样虫卵；统计采用Boschloo精确检验并以Benjamini-Hochberg（FDR）校正。
3. Results
研究人员通过多重PCR检测1619份犬粪样，得出E. multilocularis阳性4份（0.2%，95%置信区间[confidence interval, CI] 0.1–0.6）、E. granulosus s.l.阳性22份（1.4%，95% CI 0.9–2.1）、其他绦虫阳性65份（4.0%，95% CI 3.5–5.1）。E. multilocularis阳性犬来自波兰和拉脱维亚；E. granulosus s.l.仅见于意大利撒丁岛和波兰。E. granulosus s.l.与其他非Echinococcus绦虫共感染14只犬，均来自意大利。按国家，E. multilocularis阳性率为波兰0.7%、拉脱维亚0.6%；E. granulosus s.l.阳性率为意大利撒丁岛10.3%、波兰0.2%。通过测序确认所有Echinococcus阳性样品为E. multilocularis和E. granulosus sensu stricto（E. granulosus s.s.）；对法国和波兰41份其他绦虫PCR阳性产物测序，鉴定出Taenia hydatigena（13份）、T. crassiceps（6份）、T. serialis（3份）、T. pisiformis（11份）、T. krabbei（3份）、Hydatigera sp.（1份）和Mesocestoides spp.（4份）。通过qPCR，839份样品中E. multilocularis阳性3份，均来自波兰且与多重PCR结果一致；1009份样品中E. granulosus s.s.阳性19份（波兰1份、意大利18份），均亦为多重PCR阳性；多重PCR另检出3份阳性，原文提示可能与rrn
S核糖体基因靶标较qPCR所用cox1基因拷贝数更高或更保守有关。通过镜检68份Echinococcus spp.和/或其他Taeniidae阳性样品，18份（26.5%）检出Taenia样虫卵，波兰20.7%、意大利33.3%、法国30.0%、爱沙尼亚0.0%。通过问卷统计分析，农村犬绦虫阳性率6.2%显著高于城郊犬2.2%；从未驱虫犬显著高于至少每年驱虫一次者；每3个月驱虫一次与更低频率驱虫之间无差异；家庭屠宰与Echinococcus及其他绦虫感染风险显著相关。
4. Discussion
研究人员指出，犬是E. granulosus s.l.的主要终宿主，也可参与E. multilocularis生活史，但红狐仍是欧洲E. multilocularis的关键终宿主；实验感染显示犬对E. multilocularis易感。与Dyachenko et al.的大规模研究相比，本研究聚焦流行区及更易感犬类别，且DNA提取和/或PCR方法不同；国家间比较受非随机抽样、样本量不等和单次粪样可能低估真实流行率限制，不具人群代表性。E. multilocularis阳性仅见于波兰和拉脱维亚；波兰该地区狐高流行，拉脱维亚狐阳性率高，立陶宛犬0.8%接近；爱沙尼亚、丹麦、法国、挪威斯瓦尔巴和撒丁岛未检出，与各地狐、啮齿动物及地理背景相符。E. granulosus s.s.阳性主要来自撒丁岛牧羊犬，当地羊存栏约300万，粗放或半粗放放牧及非法家庭屠宰促进传播，屠宰羊囊肿和人间CE均高；波兰1只犬阳性为该国犬中首次确认E. granulosus s.l.，该犬来自东南部养羊区，当地狼和羊亦曾发现E. granulosus s.s.。其他绦虫在除丹麦外国家检出，波兰以T. hydatigena为主，法国以T. pisiformis和T. crassiceps为主，差异可能与饲喂习惯有关。镜检Taenia样虫卵比例受虫卵排出特点及漂浮法敏感性限制，故采用copro-DNA分子检测以提高分析敏感性。问卷显示农村、未驱虫或低频驱虫、家庭屠宰与绦虫阳性相关，但问卷仅示关联，不能确定不同驱虫频率的有效性。
5. Conclusions
在选定研究区域犬中检出Echinococcus DNA，提示存在潜在的局部人兽共患危害。本研究对知识状态的重要贡献是在既往未在犬中检出这些寄生虫的地点确认其存在，从而能够更精确地绘制潜在人兽共患风险。但研究聚焦犬中Echinococcus spp.的发生，未评估直接与评估人兽共患传播风险相关的参数，如虫卵活力、环境污染。所得结果强调犬主人的关键作用，其对适时驱虫和饮食控制的认识与负责任态度对限制寄生虫传播至关重要。结果突出基于统一方法的整合流行病学调查的优势，为未来研究和监测设定方向，并为采用One Health方法构建更有效的公共卫生保护工具提供基础。
