M-CSF驱动的免疫微环境重塑：BRAF抑制剂耐药黑色素瘤的新机制与潜在治疗靶点

《Journal of Experimental & Clinical Cancer Research》：M-CSF–driven TAM remodelling and actomyosin reactivation underlie BRAFi resistance in melanoma

　　**摘要****背景**BRAF抑制剂耐药仍然是黑色素瘤治疗中的一大挑战，限制了长期的临床获益。越来越多的证据表明，肿瘤细胞与肿瘤微环境（尤其是免疫组分）之间的相互作用是治疗失败的重要原因。本研究旨在探讨BRAF抑制剂耐药的黑色素瘤细胞如何重塑免疫微环境，并识别驱动耐药的可干预机制。**方法**采用细胞因子谱分析、基因表达测序和功能性实验对获得性耐药的BRAF突变黑色素瘤细胞系进行分析。利用黑色素瘤细胞条件培养基诱导人单核细胞分化为巨噬细胞，以评估免疫重编程。使用同基因小鼠模型进行体内研究，评估肿瘤生长、转移及免疫浸润情况。分析患者肿瘤样本和公开数据集以评估临床相关性。统计分析包括正态性检验、单因素和双因素方差分析（含事后校正）、非参数检验、相关性分析以及Kaplan-Meier生存分析（含log-rank检验）。**结果**我们发现，耐药性黑色素瘤细胞通过协调的肿瘤内在重编程和微环境重编程共同实现免疫逃逸。BRAF抑制剂耐药细胞重新激活肌动球蛋白收缩活性，并采用改变后的分泌表型，其特征为M-CSF增加以及多种可溶性介质的表达。这种重塑后的分泌谱促进单核细胞向免疫抑制性肿瘤相关巨噬细胞分化，M-CSF在此过程中发挥作用。由此形成对治疗具有抵抗性的微环境，该微环境中富集CD206?巨噬细胞、调节性T细胞和检查点分子。在临床队列中，CD206阳性巨噬细胞浸润程度较高与较差的生存预后相关。公开队列分析显示，在BRAF抑制剂治疗进展期，M2型巨噬细胞比例增加，但巨噬细胞相关指标并不能区分抗PD-1治疗的应答者与无应答者。在机制层面，阻断M-CSF可重塑免疫微环境，减少免疫抑制性巨噬细胞浸润，并在体内增强BRAF抑制剂的疗效。**结论**这些发现确立了M-CSF驱动的免疫重塑是治疗耐药的标志性特征，并将M-CSF/CSF1R定位为预防或克服BRAF突变黑色素瘤耐药的合理靶点。