《Theriogenology》：Influence of glucocorticoid therapy, Cushing's syndrome and hypothyroidism on the reproductive cycle and AMH levels in the bitch
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摘要专业翻译
糖皮质激素可抑制促性腺激素释放激素（GnRH）的脉冲式分泌。因此，若机体自身皮质醇持续升高（如库欣综合征）或接受外源性糖皮质激素治疗，促性腺激素的分泌可能被削弱。此外，甲状腺功能减退也可能影响女性的月经周期和生育能力。由颗粒细胞产生的抗苗勒管激素
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糖皮质激素可抑制促性腺激素释放激素（GnRH）的脉冲式分泌。因此，若机体自身皮质醇持续升高（如库欣综合征）或接受外源性糖皮质激素治疗，促性腺激素的分泌可能被削弱。此外，甲状腺功能减退也可能影响女性的月经周期和生育能力。由颗粒细胞产生的抗苗勒管激素（AMH）被描述为一种生育力标志物。本研究旨在探讨库欣综合征或外源性糖皮质激素治疗以及甲状腺功能减退对母犬生殖周期和AMH水平的影响。
研究人员对42只不同品种的母犬进行了妇科检查和AMH测定。其中28只接受可的松（泼尼松龙）治疗，剂量范围为0.1～2.1 mg/kg，每日口服一次；6只患有库欣综合征；8只患有甲状腺功能减退。28只健康母犬作为对照组。
17只接受可的松治疗的母犬表现为发情间期延长，其中8只在停药或减量后恢复发情。2只母犬出现青春期延迟。2只患有库欣综合征的母犬也表现为发情间期延长，但患有甲状腺功能减退的母犬均未出现周期改变。
各组之间的AMH值无显著差异（p = 0.14）。所有21只发情周期发生改变的母犬的AMH水平与周期未发生改变的母犬相比无显著差异（p = 0.47）。
可的松治疗可抑制母犬的发情。库欣综合征可能导致发情间期延长，而甲状腺功能减退似乎对发情周期无影响，但需更大的实验群体来评估这些效应。发情周期改变的母犬AMH水平未见变化。
论文解读
一、研究背景与目的
库欣综合征和甲状腺功能减退是老年犬最常见的两种内分泌疾病。尽管二者累及器官不同，但共同之处在于它们会影响全身多种生理过程，包括发情周期。母犬的发情周期受下丘脑-垂体-性腺轴（HPG轴）的复杂调控：下丘脑释放促性腺激素释放激素（GnRH），触发垂体前叶分泌促卵泡激素（FSH）和黄体生成素（LH）。在发情前期，FSH促进卵泡成熟和雌激素分泌，进而触发LH峰，1～2天后排卵。
库欣综合征以皮质醇过度产生为特征，可分为垂体性病变或肾上腺皮质病变。糖皮质激素（如皮质醇）参与多种代谢过程，慢性皮质醇过多可导致多食、体重增加、向心性肥胖、嗜睡、多饮多尿、肌无力及脱毛等症状。已知糖皮质激素可通过抑制下丘脑GnRH的脉冲式分泌来影响HPG轴，导致促性腺激素分泌减少，LH升高不足，进而无法刺激排卵。文献报道库欣综合征女性可出现周期不规律、发情间期延长及生育力降低。
在临床实践中，糖皮质激素因其抗炎和免疫抑制作用而被常规用于治疗多种疾病。糖皮质激素治疗可影响女性的生殖周期，在啮齿动物中可导致青春期延迟。已有报道提示糖皮质激素治疗可能影响母犬的生殖周期。
甲状腺功能减退以三碘甲状腺原氨酸（T3）和甲状腺素（T4）缺乏为特征。甲状腺激素缺乏可影响多种代谢过程，也可能影响HPG轴。甲状腺功能减退导致的下丘脑促甲状腺激素释放激素（TRH）分泌增加可引发催乳素分泌，进而导致FSH和LH分泌减少，阻止卵泡发育，使发情不出现。
抗苗勒管激素（AMH）是由成年母犬卵巢卵泡颗粒细胞产生的糖蛋白，其功能是调控卵泡成熟。AMH在兽医实践中已常规用于区分完整与绝育母犬，以及诊断卵巢残留综合征和颗粒细胞瘤。在人医中AMH被描述为生育力标志物，其水平与功能性卵巢储备相关。
本研究旨在探讨库欣综合征、甲状腺功能减退以及治疗性泼尼松龙（可的松）对母犬生殖周期的影响，并评估AMH作为母犬周期改变血清标志物的潜力。
二、研究设计与主要技术方法
研究队列共纳入42只完整的母犬：28只接受可的松治疗，6只患有库欣综合征，8只患有甲状腺功能减退，另设28只健康完整母犬作为对照组。研究时间为2024年8月至2025年11月。可的松组母犬来自19个品种及3只混血犬，平均年龄46.6个月，因神经病变（n=19）、慢性肠病（n=4）或其他原因（n=5）就诊，接受泼尼松龙每日一次口服，平均剂量0.9 mg/kg，平均治疗时长7.7个月。库欣综合征组母犬平均年龄118.6个月，其中5只为垂体性库欣综合征，1只为肾上腺肿瘤，4只接受曲洛司坦治疗。甲状腺功能减退组母犬均为原发性甲状腺功能减退，接受左甲状腺素每日两次口服，中位剂量11.5 μg/kg，平均治疗时长26.4个月。对照组母犬平均年龄45个月，均至少有两次正常发情周期。
主要技术方法包括：对所有母犬进行体格妇科检查（外阴检查、阴道细胞学检查和阴道镜检查）；通过问卷调查记录生殖周期变化，包括最近发情时间、发情频率和发情间期时长；采用化学发光免疫分析法在cobas E602分析仪上测定血清AMH浓度，检测下限为0.01 ng/ml，上限为23 ng/ml。统计分析使用R软件（版本4.5.0），采用t检验、Mann-Whitney U检验、Kruskal-Wallis检验、Fisher's ANOVA、Spearman相关和Pearson相关等方法。
三、研究结果
3.1 妇科检查结果
所有犬的外生殖器检查均正常，阴道细胞学与当前生殖周期阶段相符。28只可的松治疗母犬中，4只处于青春期前，23只处于发情间期，1只处于发情前期。所有6只库欣综合征母犬和8只甲状腺功能减退母犬在检查时均处于发情间期。对照组母犬分布于各周期阶段：6只发情前期、4只发情期、6只发情后期、12只发情间期。
3.2 问卷调查分析结果
三个试验组中共有19只母犬的犬主报告了周期异常（19/42）。28只可的松治疗母犬中，17只表现为发情间期延长（17/28），2只表现为青春期延迟（2/28）。6只库欣综合征母犬中有2只表现为发情间期延长（2/6），而8只甲状腺功能减退母犬均未出现周期改变（0/8）。
17只发情间期延长的可的松治疗母犬，发情间期持续7～44个月，而患病前为6～8个月。其中16只在检查时接受泼尼松龙每日一次治疗，平均剂量0.58 mg/kg，平均治疗时长9.79个月。8只在发情间期持续16～24个月后重新发情，其中4只在剂量减至0.09～0.5 mg/kg后恢复，4只在完全停药后恢复。其余9只至研究结束时仍处于发情间期。
4只青春期前开始可的松治疗的母犬中，2只出现青春期延迟：一只在39月龄时仍未首次发情，另一只在34月龄时首次发情。两只母犬均在停药一个月后出现发情迹象。7只成年可的松治疗母犬未出现周期改变，其中3只仅在正常发情间期接受0.5～4个月的短期治疗。
2只库欣综合征母犬表现为发情间期延长，分别持续15个月和24个月，在开始曲洛司坦治疗后6个月和9个月重新发情。其余4只周期规律。所有8只甲状腺功能减退母犬在治疗前后均未观察到周期改变。
3.3 AMH水平结果
可的松治疗组母犬AMH中位浓度为0.62 ng/ml（范围0.01～1.32 ng/ml），库欣综合征组为0.35 ng/ml（范围0.01～0.64 ng/ml），甲状腺功能减退组为0.56 ng/ml（范围0.19～1.15 ng/ml），对照组为0.73 ng/ml（范围0.1～1.69 ng/ml）。各组间AMH值无显著差异（p = 0.14）。
可的松剂量与AMH水平之间无相关性（p = 0.72），治疗时长与AMH水平之间也无相关性（p = 0.54）。所有21只周期改变母犬（17只可的松组发情间期延长、2只青春期延迟及2只库欣综合征发情间期延长）的AMH平均水平为0.58 ng/ml，与无周期改变母犬的0.66 ng/ml无显著差异（p = 0.47）。
四、讨论与结论
本研究表明，糖皮质激素治疗（每日一次口服泼尼松龙）可导致大多数母犬发情间期延长，部分青春期前母犬出现青春期延迟。较短的治疗时长和剂量减少对周期影响较小，且改变是可逆的。8只发情间期延长的母犬在减量或停药后重新发情，提示糖皮质激素对发情周期的影响具有可逆性。剂量可能是决定周期改变可能性的关键因素，但个体差异也值得注意。
库欣综合征母犬中仅2/6出现发情间期延长，且其中一只伴有严重的皮肤钙质沉着症，无法确定发情间期延长是单纯由库欣综合征引起还是与严重皮肤病相关。甲状腺功能减退母犬均接受左甲状腺素补充治疗，未观察到周期改变，但样本量较小，且无法评估未治疗状态下甲状腺缺乏对周期的影响。
AMH水平不受发情周期改变的影响，有周期异常母犬与周期正常母犬的AMH水平相当。这可能是因为发情间期延长的母犬仍有产生AMH的腔前卵泡，其AMH水平处于完整母犬的正常范围内。因此，AMH在此背景下似乎不适合作为生育力标志物。
研究局限性包括：犬主对发情周期的判断可能存在不准确；可的松组异质性较大，治疗时长从2周到44个月不等；甲状腺功能减退组和库欣综合征组样本量较小；缺乏重复AMH测定。
结论：本研究提示糖皮质激素治疗可能影响母犬生殖周期，导致发情间期延长或青春期延迟。治疗时长和剂量均可能相关，短期治疗不改变周期，减量后部分母犬周期恢复正常。库欣综合征在6只母犬中有2只与发情间期延长相关，而甲状腺功能减退不影响发情周期。发情周期异常与AMH浓度变化无关，提示AMH在此背景下不能用作生育力标志物。
