新型敲入UCP1-IRES-Cre小鼠模型忠实重现内源性UCP1表达并显著降低异位活性

《Scientific Reports》：A UCP1-IRES-Cre knock-in mouse enables specific brown adipocyte targeting without CNS off-target expression

　　

摘要

解偶联蛋白1（UCP1）主要在棕色脂肪细胞中表达，在产热和能量代谢中发挥核心作用。BAC转基因UCP1-Cre小鼠品系被广泛用于靶向产热性脂肪细胞，但其在下丘脑和外周器官中的异位Cre活性引发了对特异性的担忧。在此，我们表征了一种新型敲入UCP1-IRES-Cre小鼠模型，该模型由内源性UCP1启动子驱动Cre表达。将UCP1-IRES-Cre小鼠与Ai14报告鼠杂交，以可视化脂肪库、脑区及外周组织中Cre依赖的tdTomato表达，并将其与UCP1蛋白定位进行比较。雄性及雌性UCP1-IRES-Cre小鼠中的报告基因表达在棕色和白色脂肪库中紧密镜像了内源性UCP1的表达，与先前报道的BAC转基因模型相比，异位活性显著降低。在下丘脑和外周器官中仅观察到极有限的报告信号，尽管缺乏UCP1蛋白染色，但在脉络丛中检测到稳健的报告基因表达。对多种脂肪库的表面图像分析表明，报告基因标记总体上比UCP1免疫反应性更为广泛，这与发育期或成年期内UCP1启动子的瞬时或既往激活一致。总之，这些发现表明UCP1-IRES-Cre模型忠实地重现了内源性UCP1的表达，同时将脱靶Cre活性降至最低，为产热性脂肪细胞的基因靶向提供了一种敲入替代方案。