犬巨噬细胞对不同利什曼原虫感染株的转录组与细胞因子表达差异研究

《Scientific Reports》：Transcriptomic profiling and immune gene expression analysis of canine DH82 cells (co)infected by Leishmania infantum, Leishmania tarentolae and their hybrid

　　

摘要

杜氏利什曼原虫 和 塔兰托利什曼原虫 在同域地理区域的共存引发了关于它们在脊椎动物宿主中免疫相互作用的问题，表明后者在犬利什曼病进程中具有保护作用。本研究旨在表征体外被 杜氏利什曼原虫、塔兰托利什曼原虫、它们的杂交株（即 Linf/Ltar）以及两种 利什曼原虫 物种共同感染的犬 DH82 巨噬细胞的转录组谱和细胞因子基因表达。感染细胞的转录谱在感染后 72 小时通过 RNA-seq 分析和 RT-qPCR（逆转录实时定量 PCR）测定进行评估。所有菌株都建立了细胞感染，随着时间点的推移，寄生虫负荷率逐渐下降。转录组分析表明，杜氏利什曼原虫（即 padj < 0.01；基因计数 = 19）和 Linf/Ltar 杂交株（即 padj < 0.01，基因计数 = 16）诱导了涉及炎症通路基因的转录变化，而 塔兰托利什曼原虫 引发了较弱的反应，与代谢过程相关（即 padj > 0.05），反映了与巨噬细胞和炎症反应相关的基因转录变化较少。两种 利什曼原虫 物种的共同感染导致了最多的差异表达基因数量和炎症通路的最强富集（即 padj < 0.01，基因计数 = 21）。这些发现进一步得到了中等至强 IL-6 基因表达的支持，该表达由 杜氏利什曼原虫（高达 1.13 倍相对变化）、Linf/Ltar 杂交株（高达 1.30 倍相对变化）以及两种 利什曼原虫 物种的共同感染（高达 2.26 倍相对变化）诱导，此外 塔兰托利什曼原虫 也引起了相对较高的 IL-12 基因表达（高达 1.74 倍相对变化）。总体而言，结果提供了证据，表明 杜氏利什曼原虫 和 塔兰托利什曼原虫 可能在犬巨噬细胞中诱导不同的转录反应，特别是在与免疫和炎症过程相关的基因中。