DNA突触通过结构抑制短程切除，RPA在连接失败后促进切除并将DSB修复导向HR途径

《Nature Communications》：NHEJ-mediated DNA synapsis and RPA-driven MRX exonuclease balance DNA end resection to control DSB repair

　　DNA双链断裂（DSBs）通过Ku依赖的非同源末端连接（NHEJ）或DNA末端切除依赖的同源重组（HR）进行修复。此前研究表明，MRX-pSae2介导的短程切除可以移除DSB上的Ku并启动切除过程，这表明DSB修复途径选择具有灵活性。然而，哪些NHEJ中间产物会被切除因子破坏仍不清楚。利用纯化的酿酒酵母蛋白质进行重组反应，我们在此表明，MRX-pSae2介导的短程切除并未直接被任何核心NHEJ因子抑制。相反，我们发现MRX-pSae2受到结构上的抑制。DNA突触——一种连接DSB的动态NHEJ中间产物——强烈抑制切除。一旦形成突触，不可连接的末端便对MRX-pSae2产生抗性，而携带DNA连接酶IV催化突变体的NHEJ复合物（允许突触形成但不允许连接）同样抑制切除。我们进一步证明，从DSB上移除Ku需要RPA，RPA与MRX和pSae2相互作用，协同刺激MRX 3′→5′外切核酸酶活性，从而产生游离的3′悬突。我们的数据支持一种模型：DNA突触暂时阻止切除，使NHEJ得以完成连接。若连接失败且突触解离，MRX-pSae2和RPA则促进切除，移除无效率的NHEJ复合物，并将DSB修复导向HR途径。这些数据有助于解释此前遗传实验中观察到的RPA对NHEJ的抑制现象。