《Pathogens》:First Serosurvey of Porcine Circovirus Type 3 in Central Luzon, Philippines
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猪圆环病毒3型(porcine circovirus type 3, PCV3)是一种新发圆环病毒,已在全球范围内于有或无临床症状的猪中检出,包括繁殖障碍和全身性疾病。然而,菲律宾猪群中PCV3暴露的基线信息仍然有限。研究人员于2025年5月至6月在菲律宾中央
猪圆环病毒3型(porcine circovirus type 3, PCV3)是一种新发圆环病毒,已在全球范围内于有或无临床症状的猪中检出,包括繁殖障碍和全身性疾病。然而,菲律宾猪群中PCV3暴露的基线信息仍然有限。研究人员于2025年5月至6月在菲律宾中央吕宋部分省份开展了一项横断面血清学调查。使用基于重组PCV3开放阅读框2(open reading frame 2, ORF2)衣壳抗原的间接酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)检测了337份屠宰猪血清样本。样本与阳性对照比值(sample-to-positive, S/P)≥0.5的样本被判定为血清阳性。总体而言,337头猪中有143头为血清阳性,对应表观血清阳性率(apparent seroprevalence)为42.4%(95%置信区间[confidence interval, CI]:37.1–47.9%)。省份层面表观血清阳性率在Bulacan为46.1%,Nueva Ecija为38.0%,Pampanga为42.2%,各省间无显著差异(p = 0.470)。然而,Bulacan不同屠宰场间血清阳性率存在显著差异(Malolos为66.1%,Meycauayan为27.3%;p < 0.0001)。这些发现提供了菲律宾中央吕宋部分省份屠宰猪中存在PCV3暴露的首个血清学证据。由于未进行分子检测,结果应解释为对PCV3的抗体应答证据,而非活动性感染的确认。有必要开展整合血清学、定量聚合酶链反应(quantitative polymerase chain reaction, qPCR)、测序、农场层面流行病学数据和临床病理学调查的扩展监测。
研究背景方面,猪圆环病毒为小、无包膜、共价闭合环状单链DNA病毒,归类于圆环病毒科。已识别的猪圆环病毒中,猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2, PCV2)是明确的猪病原,与猪圆环病毒相关疾病及养猪生产经济损失相关;菲律宾已有PCV2抗体和感染报道。PCV3于2016年首次在具有多系统炎症、繁殖失败及猪皮炎与肾病综合征样疾病(porcine dermatitis and nephropathy syndrome-like disease)的猪中报道,此后在全球家猪和野生猪科动物中检出,既见于临床受影响动物也见于外观健康动物。尽管PCV3与若干临床状况相关,但仅病毒检出不足以确立疾病因果关系;血清学监测有助于估计群体暴露,尤其在PCV3记录不足的地区。检测PCV3特异性免疫球蛋白G(immunoglobulin G, IgG)提示抗体应答,但不能确立活动性感染或PCV3相关疾病。亚洲多地已有PCV3检出,但菲律宾猪群PCV3暴露基线信息仍缺乏,因此研究人员开展本研究,以估计菲律宾中央吕宋Bulacan、Nueva Ecija和Pampanga部分屠宰场屠宰猪PCV3抗体表观血清阳性率,并检查省级和屠宰场层面差异;该研究为菲律宾首个PCV3血清学调查,为未来分子和流行病学调查提供基线信息。
关键技术方法方面,研究人员于2025年5月至6月在Bulacan、Nueva Ecija和Pampanga的7家屠宰场开展横断面血清学调查;样本队列来源为337头常规屠宰猪(Bulacan 128头,Nueva Ecija 100头,Pampanga 109头),按屠宰线系统选择并记录可获得的动物层面信息。采集屠宰前颈静脉血约5 mL,冷链运输后分离血清并?20 °C保存。采用基于重组PCV3 ORF2衣壳抗原的间接ELISA检测PCV3特异性抗体,以S/P比值≥0.5判定血清阳性。统计采用精确二项95%置信区间(confidence interval, CI)计算总体及省级表观血清阳性率,卡方检验比较省份和屠宰场差异,必要时Fisher精确检验,R 4.4.1分析。
研究结果方面,3.1. 总体与省际血清阳性率:通过三省337份屠宰猪血清的间接ELISA检测,143份为PCV3抗体血清阳性,总体表观血清阳性率为42.4%(95% CI:37.1–47.9%);省级表观血清阳性率从Nueva Ecija的38.0%至Bulacan的46.1%,各省间无显著差异(卡方=1.51,自由度=2,p = 0.470)。3.2. 屠宰场层面血清阳性率:通过屠宰场层面比较,Bulacan的Malolos表观血清阳性率66.1%高于Meycauayan的27.3%(p < 0.0001);Nueva Ecija(p = 0.660)和Pampanga(p = 0.967)未观察到显著屠宰场层面差异。3.3. 省级流行病学模式:通过可获得的动物层面特征进行探索性总结,Bulacan血清阳性率按报告来源地存在显著差异,来自Pandi和San Ildefonso的猪高于参照组;性别或年龄组无显著差异。Nueva Ecija或Pampanga评估的动物层面特征未见显著差异;Pampanga母猪较肥育猪、后院来源较商业来源的血清阳性率数值更高,但差异无统计学意义;相关动物层面数据见补充材料。3.4. S/P比值分布:通过S/P比值分布观察,三省多数S/P比值位于预设阳性判定阈值0.5之下或之上,接近阈值者相对较少。
讨论部分总结:研究人员认为本研究提供菲律宾屠宰猪PCV3暴露的首个血清学证据;42.4%总体表观血清阳性率表明相当比例采样猪具有可检测PCV3抗体,但PCV3特异性IgG检测提示抗体应答,不能确立活动性感染、病毒排毒或PCV3相关疾病。三省均检出PCV3抗体与既往全球分布报道一致;中央吕宋表观血清阳性率与中国临床健康猪42.87%相近,并处于中国其他血清学研究报道的较宽范围(如Hunan省20–84%)内;墨西哥回顾性研究和哥伦比亚、阿根廷研究显示PCV3 DNA和抗体检测及遗传多样性,但采样群体、试验和诊断方法差异限制直接比较,尤其分子检测频率不应与血清阳性率直接比较。菲律宾PCV3循环起源和路径仍未知;动物移动、种猪交换和区域连通性为可能引入或传播途径;系统地理学分析提示PCV3跨亚洲、欧洲和美洲移动,东南亚国家涉及部分推断迁移路线,但无分子检测和菲律宾PCV3序列比较无法评估这些路径。欧洲和亚洲野猪中亦检出PCV3;本研究未调查野生动物,但未来监测应考虑家猪—野生猪科动物界面,尤其自由放养生产系统。各省表观血清阳性率无显著差异,但该发现不能确立区域暴露等同;Bulacan的Malolos与Meycauayan屠宰场显著差异提示局部异质性,可能反映进入各屠宰场猪只地理来源或组成差异;报告来源地关联支持进一步调查动物来源网络,但屠宰场采样和农场层面信息不完整妨碍识别差异潜在决定因素。Pampanga母猪数值较高的血清阳性率无统计学意义,应谨慎解释;PCV3与繁殖障碍相关并已在生殖组织、流产胎儿、死胎和精液中检出,但缺乏来源猪群临床和繁殖记录,无法评估血清阳性与繁殖疾病关联;母猪抗体检测较高也可能反映随年龄累积暴露。未来研究应包括繁殖猪群、繁殖史和临床相关样本分子检测。重组衣壳间接ELISA为检测PCV3特异性IgG提供实用方法;衣壳和病毒样颗粒血清学试验已有报道;接近预设阈值样本相对较少并不能独立确立诊断敏感性或特异性;IgG检测不能确定感染时间或证明活动性病毒复制;因目标群体可靠诊断敏感性和特异性估计不可得,结果报告为表观而非真血清阳性率;补充血清学方法和分子检测将加强未来流行病学调查。尽管猪生产已有PCV2疫苗,PCV3交叉保护尚未证实;因此改进监测和诊断能力对评估PCV3暴露及田间潜在临床意义仍重要。研究局限性包括:采样限于选定屠宰场,限制代表性且不能外推至更广泛菲律宾猪群;农场层面、管理和临床信息不完整,妨碍正式风险因素分析和PCV3相关疾病评估;未进行分子和病理学调查,无法确认活动性感染或表征循环毒株;采样设计亦不能评估时间或季节模式。研究结论(译):总体而言,这些发现为菲律宾中央吕宋部分省份屠宰猪中PCV3暴露建立了初步血清学基线。这些发现支持开展整合血清学、qPCR、测序、农场层面流行病学数据和基于病变的诊断学的扩展监测,以表征PCV3循环并阐明其在菲律宾猪群中的临床意义。