一般人群中循环 NOX2 与心血管事件风险：Moli-sani 研究的结果

《Atherosclerosis》：Circulating NOX2 and risk of cardiovascular events in the general population: results from the Moli-sani study

　　

摘要

氧化应激在动脉粥样硬化中起着核心作用，但目前尚缺乏前瞻性人群证据将特定酶源性活性氧与心血管疾病（CVD）联系起来。NADPH氧化酶2（NOX2）是血管氧化应激的主要来源，但其在一般人群中的预后价值仍不明确。

我们在Moli-sani前瞻性队列研究内嵌套进行了一项病例-队列研究，纳入1,648名随机亚队列参与者和1,283例新发CVD病例。采用ELISA法测定基线血清NOX2衍生肽（sNOX2-dp）水平。使用针对病例-队列设计改良的Cox模型评估其与CVD发病的关联，并校正主要心血管危险因素。采用限制性立方样条评估剂量-反应关系，并通过额外分析考察对低度系统性炎症标志物的校正是否减弱了该关联。

在校正主要心血管危险因素后，较高的循环NOX2水平与CVD风险增加相关。与最低五分位数相比，NOX2各五分位数的风险估计值逐渐升高，Q5的HR达到1.70（趋势P值 = 0.0033）。额外校正INFLA评分或C反应蛋白并未实质性减弱该关联。在这项大规模人群队列研究中，校正传统危险因素后，循环NOX2升高与新发心血管事件相关。该关联未因额外校正本研究测量的炎症标志物而实质性减弱，支持NOX2相关氧化应激作为心血管风险标志物的潜在价值。

引言

氧化应激在动脉粥样硬化形成过程中发挥着关键作用。当LDL胆固醇穿越动脉壁时，会发生氧化，这是触发炎症过程的初始步骤，导致单核细胞和中性粒细胞浸润至内皮下¹。

氧化应激在人体动脉粥样硬化过程中的重要作用已得到一项干预研究的支持——该研究对接受颈动脉内膜切除术的严重颈动脉狭窄患者使用抗氧化剂维生素E，结果显示氧化型LDL（oxLDL）被动脉粥样硬化斑块摄取显著受到抑制²。与此假说一致，若干循环氧化应激生物标志物，如oxLDL和异前列腺素，在一般人群的前瞻性研究中均与心血管事件相关[3]、[4]、[5]。在其他嵌套病例对照研究中，单核细胞髓过氧化物酶（MPO）——一种氧化应激的酶源——也在一般人群中进行了调查，证实了其与心血管事件的关联[6]、[7]、[8]。然而，MPO对人类动脉粥样硬化的影响在其他研究中得出了相互矛盾的结果[9]、[10]，因此这些发现应谨慎解读。

NADPH氧化酶2（NOX2）是最重要的细胞活性氧（ROS）产生来源之一，并与人类动脉粥样硬化相关¹¹。我们课题组在慢性肉芽肿病（CGD）患者中开展的研究显示，该病以NOX2遗传性缺乏为特征，女性携带者的动脉粥样硬化程度明显低于对照组。这一发现随后被Gallin等人确认¹²、¹³，支持了NOX2在动脉粥样硬化形成过程中的作用。在此基础上，我们认为循环NOX2可能是一个重要的生物标志物，用于识别有心血管事件风险的患者。为探索这一假说，我们在意大利Moli-sani研究的大规模队列中前瞻性地分析了循环NOX2水平与心血管事件之间的关联。

章节摘要

研究人群

本研究采用嵌套于Moli-sani研究中的病例-队列设计，该研究是一项人群基础的前瞻性队列研究，于2005至2010年间在意大利南部莫利塞地区建立。该队列纳入24,325名男性和女性（48%），年龄≥35岁，从一般人群中随机招募。研究的主要目标是调查导致心血管、脑血管、神经和肿瘤疾病发生的遗传和环境危险因素。

结果

Moli-sani队列中共有1,648名参与者被纳入亚队列，随访期间发生血管疾病或心力衰竭的1,283名参与者被确定为病例，其中123人也属于亚队列。与亚队列相比，病例组年龄更大（分别为63±11岁和54±11岁），男性比例更高（58.6%对45.9%），且具有更高的已知心血管危险因素患病率，包括受教育程度较低。

讨论

本研究提供了证据表明，在一般人群中，循环NOX2水平与心血管事件呈正相关，提示NOX2衍生氧化应激可能是参与动脉粥样硬化相关心血管疾病的潜在因素。NOX2浓度越高，风险估计值越高，Q5中观察到最高估计值。主要三节点样条提供了该关联的更平滑表征。在探索性五节点敏感性分析中

结论

本研究表明，循环sNOX2-dp水平与心血管事件呈正相关，支持其作为一般人群中心血管风险增加生物标志物的潜在作用。需要进一步的前瞻性和机制研究以明确sNOX2-dp的临床相关性，并确定其在心血管风险评估中的潜在价值。

作者贡献

RC、LI、ADiC、GF、SS、PP、GdG、CC、MBD、FV：概念构思、项目管理、撰写——审阅与编辑；SC、MPers、CN、SB、TP、FB、BF、VCam、ADM、VCas、AB、AS：调查研究、数据整理；ADeC和SM：数据整理、方法论；ADiC：形式化分析；RC、GF：资金获取。所有合著者均批准了本手稿的最终版本。

数据共享声明

本文背后的数据将在合理请求下由通讯作者共享。数据存储在机构知识库中（https://repository.neuromed.it），访问受伦理审批和欧盟立法限制。

利益冲突声明

部分作者（C.R、P.P.和F.V.）是本研究中使用的NOX2 ELISA检测方法的专利发明人，该方法由Biogem公司商业分销。

生成式AI披露声明

使用了AI工具辅助图形摘要中示意图的创建。

资金支持

取得这些成果的研究获得了欧盟"下一代欧盟"计划通过意大利大学与研究部在PNRR—M4C2-I1.3项目PE_00000019"HEAL ITALIA"（CUP B23D22000580004和CUP B53C22004000006）以及IRCCS Neuromed Pozzilli（IS）和罗马大学的资金支持，还获得了罗马科技园区旗舰4（FP 4）健康医疗和非医疗设备开发、创新和认证项目的资助（MUR部长令第105号，2022年6月23日）；

致谢：

我们感谢Moli-sani研究的参与者们热情加入本研究，并感谢健康之心协会ETS（意大利坎波巴索）对传播研究活动的支持。作者感谢Neuromed生物样本库中心的同事们对生物样本的管理以及他们宝贵的支持与合作。Moli-sani研究的入组阶段（2005?2010年）由辉瑞的无限制研究拨款支持。

Roberto Carnevale|Augusto Di Castelnuovo|Amalia De Curtis|Sara Magnacca|Simona Costanzo|Teresa Panzera|Francesca Bracone|Cristina Nocella|Simona Bartimoccia|Vittoria Cammisotto|Valentina Castellani|Alessio Borrelli|Antonio Scarà|Alessandra D'Amico|Pasquale Pignatelli|Federico Bizzarri|Sebastiano Sciarretta|Valentina Valenti|Mariangela Peruzzi|Chiara Cerletti|Americo Bonanni