一种新型1,3-二氮杂环丁烷-2-硫酮衍生物对奇异变形杆菌的抗菌和免疫调节活性：体外、体内、ADMET、分子对接及分子动力学评估

《In Silico Pharmacology》：A novel 1,3-diazetidine-2-thione derivative with antibacterial and immunomodulatory activity against Proteus mirabilis: in vitro, in vivo, ADMET, docking, and molecular dynamics evaluation

　　1,3-二氮杂氮杂环丁-2-硫酮基团是一种四元杂环，并不是一种常见的功能基团。与羰基为C=O的β-内酰胺环不同，二氮杂氮杂环丁硫酮骨架含有一个C=S基团以及四元环内的两个氮原子。由于β-内酰胺耐药性目前是主要的药学问题，受β-内酰胺启发进行的杂环修饰可能为抗菌药物开发提供有用的骨架。本研究旨在通过计算和体外、体内实验评估一种新型1,3-二氮杂氮杂环丁-2-硫酮衍生物的生物活性。在进行实验室工作之前，进行了分子对接和ADMET分析。化合物-1以4-氨基苯甲酸为起始原料，通过Schiff碱反应制备；化合物-2通过与1-氯-4-异硫氰酸酯苯环反应环化获得。可用的结构表征基于¹H-NMR和¹³C-NMR谱图，并由所观察到的熔点和色谱行为加以佐证。琼脂扩散法进行的抗菌筛查显示，对奇异变形杆菌具有浓度依赖性的抑菌圈，在25%化合物-2时观察到最大的平均抑菌圈。未测定MIC和MBC，因此这些结果被解释为琼脂法生长的初步抑菌证据，而非抗菌活性或杀菌活性的定量指标。中性粒细胞相关的终点在受测条件下各处理组未显示出显著的不良变化。这一有限的发现未被解释为系统安全性的确认，尤其是因为ADMET模型对药物性肝损伤和致癌性产生了高度警报。吞噬活性在较高浓度下显著增强，表明先天免疫应答被激活。此外，迁移抑制试验显示MIF水平呈浓度依赖性下降，提示其在巨噬细胞介导的炎症中发挥调控作用。利用单条100 ns分子动力学轨迹考察了化合物-2在选定的2WAE参考复合物中的行为。配体在整个轨迹期间始终与模拟的结合区域保持结合，并维持了反复的接触。由于没有独立重复的轨迹或MM-PBSA/MM-GBSA计算，分子动力学结果仅作描述性解释，未用于结合亲和力的定量验证。由于2WAE并非奇异变形杆菌特异性结构，计算结果被视为参考结构的观察，而非在受试生物体中靶点结合的证明。总体而言，化合物-2在琼脂扩散试验中表现出初步的抗菌活性，在所测浓度下具有免疫调节作用，而定量抗菌敏感性和杀菌终点仍有待确定。