《Archives of Microbiology》：Zhuhuang Granules alleviate psoriatic inflammation via restoring gut microbiota balance and enhancing intestinal barrier integrity
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银屑病是一种以角质形成细胞过度增殖、免疫失调和全身性炎症为特征的慢性炎症性皮肤病。新出现的证据强调了肠-皮肤轴（gut-skin axis）是将肠道菌群失调与银屑病发病机制联系起来的关键调控机制。本研究探讨了竹黄颗粒（Zhuhuang Granules，ZH）
银屑病是一种以角质形成细胞过度增殖、免疫失调和全身性炎症为特征的慢性炎症性皮肤病。新出现的证据强调了肠-皮肤轴（gut-skin axis）是将肠道菌群失调与银屑病发病机制联系起来的关键调控机制。本研究探讨了竹黄颗粒（Zhuhuang Granules，ZH）对银屑病的治疗作用，重点关注皮肤炎症、肠道屏障完整性和肠道菌群稳态。研究采用咪喹莫特（imiquimod，IMQ）诱导的银屑病样皮炎小鼠模型，ZH治疗显著降低了银屑病面积和严重程度指数（Psoriasis Area and Severity Index，PASI）评分、表皮增生和炎症浸润，其中中剂量和高剂量ZH治疗后观察到显著改善。ZH还通过降低脾脏重量、抑制角质形成细胞增殖以及下调促炎细胞因子（包括IL-22、IL-1β、TNF-α和CCL20）来抑制全身免疫激活。此外，ZH通过上调关键紧密连接蛋白（TJP1、Occludin和Claudin-1）增强肠道屏障功能，从而降低肠道通透性和全身性内毒素血症。16S rRNA测序显示，ZH部分逆转了IMQ诱导的肠道菌群失调，部分恢复了几种IMQ相关微生物类群，包括毛螺菌科FCS020群（Lachnospiraceae FCS020 group）、毛螺菌科UCG-001（Lachnospiraceae UCG-001）和拟杆菌属（Bacteroides）。功能预测分析表明，ZH改变了与免疫调节和脂质代谢相关的微生物功能通路的预测丰度。重要的是，抗生素介导的肠道菌群耗竭削弱了ZH对IMQ诱导的银屑病样炎症的保护作用，为肠道菌群对ZH治疗作用的贡献提供了功能性证据。这些发现表明，ZH通过抑制全身性炎症、改善肠道屏障功能和恢复菌群来缓解银屑病样炎症，支持其在银屑病管理中的治疗潜力。
竹黄颗粒治疗银屑病的机制解读：基于肠-皮肤轴的整合研究
一、研究背景与科学问题
银屑病是一种常见的慢性炎症性皮肤病，以角质形成细胞过度增殖、异常分化和免疫失调为主要特征，临床上表现为边界清晰的红色鳞屑性斑块，严重影响患者生活质量。目前常规治疗手段如甲氨蝶呤（MTX）、靶向IL-17和TNF-α的生物制剂以及外用糖皮质激素虽能缓解症状，但存在副作用、费用高昂和无法完全缓解等局限性。鉴于银屑病具有慢性和复发的特性，临床亟需疗效更佳且安全性更高的替代治疗策略。
银屑病的发病机制主要由涉及IL-23/IL-17轴的过度免疫反应驱动，IL-22、IL-1β和TNF-α等促炎介质水平升高与表皮增生和持续炎症相关。越来越多的证据表明，肠道菌群在调节全身免疫稳态中发挥关键作用，并可能影响银屑病的发病。银屑病患者的肠道菌群失调以微生物多样性降低和有益菌与致病菌比例失衡为特征，可能通过多种机制加剧全身性炎症。银屑病中常见的肠道通透性增加可促进脂多糖（LPS）等微生物源性内毒素易位，进一步放大全身免疫激活。
中药复方在炎症性疾病中显示出治疗潜力，竹黄颗粒（ZH）作为银屑病的潜在干预手段受到关注。既往随机临床试验表明ZH治疗能显著改善银屑病症状，有效率高于复方靛蓝胶囊，并有效降低血浆P物质和血管活性肠肽水平。此外，ZH治疗显著降低PASI评分并调节外周血单个核细胞中miRNA表达水平。然而，ZH改善银屑病的机制及其对肠道菌群稳态的影响仍需进一步研究，特别是ZH的治疗作用是否与银屑病背景下肠道菌群和肠道屏障的协同调控相关尚不清楚。因此，本研究旨在系统评估ZH在IMQ诱导的银屑病样小鼠模型中对皮肤炎症和肠道改变的影响，并探讨其治疗作用是否伴随肠道微生物稳态和肠道屏障完整性的恢复。
二、研究设计与主要结论
研究人员利用IMQ诱导的银屑病样皮炎BALB/c小鼠模型，将小鼠随机分为对照组、IMQ组、IMQ+MTX组、IMQ+低剂量ZH组、IMQ+中剂量ZH组和IMQ+高剂量ZH组，通过宏观皮损观察、PASI评分、组织病理学分析、免疫组化、qRT-PCR、ELISA、肠道通透性评估、16S rRNA测序及抗生素介导的菌群耗竭实验等综合手段，系统评估了ZH对皮肤炎症、肠道屏障和肠道菌群的影响。
研究发现ZH治疗显著减轻了IMQ诱导的银屑病样皮肤病变，降低了PASI评分、表皮厚度和炎症细胞浸润，中剂量和高剂量ZH效果与MTX相当。ZH还抑制了全身免疫激活，降低了脾脏重量、Ki67阳性细胞数和IL-22、IL-1β、TNF-α、CCL20等促炎细胞因子的表达。在肠道方面，ZH通过上调TJP1、Occludin和Claudin-1等紧密连接蛋白，降低肠道通透性和血清LPS水平，改善肠道屏障功能。16S rRNA测序显示ZH部分逆转了IMQ诱导的肠道菌群失调，部分恢复了毛螺菌科FCS020群、毛螺菌科UCG-001和拟杆菌属等IMQ相关菌群的丰度。功能预测分析表明ZH改变了与免疫调节和脂质代谢相关的微生物功能通路。关键的是，抗生素耗竭肠道菌群后，ZH的保护作用被显著削弱，为肠道菌群参与ZH治疗作用提供了功能性证据。
三、主要技术方法
本研究采用了以下关键技术方法：高效液相色谱法（HPLC）用于竹黄颗粒的质量控制，定量检测其中黄芩苷、盐酸小檗碱和栀子苷三种标志性成分；IMQ诱导的银屑病样皮炎小鼠模型用于评估ZH的体内治疗效果；PASI评分和H&E组织病理学分析用于评估皮损严重程度；免疫组织化学染色（IHC）检测Ki67及紧密连接蛋白表达；qRT-PCR和ELISA分别检测mRNA和蛋白水平的炎症因子表达；FITC-Dextran肠道通透性实验评估肠道屏障功能；16S rRNA基因测序（V3-V4区，Illumina NovaSeq PE250平台）结合QIIME2和DADA2流程分析肠道菌群组成；随机森林分析用于识别关键菌群标志物；PICRUSt2功能预测分析推断微生物功能通路变化；抗生素（ABX）混合物介导的肠道菌群耗竭实验验证菌群的功能贡献。实验动物为6-8周龄雌性BALB/c小鼠，购自湖南中医药大学动物实验中心。
四、研究结果
HPLC质量控制结果：HPLC分析确认ZH中含有盐酸小檗碱、栀子苷和黄芩苷三种标志性化合物，含量分别为4.3507、7.3050和16.6315 mg/g，为ZH的质量控制提供了化学依据。
ZH显著缓解IMQ诱导的银屑病样皮肤炎症：ZH治疗剂量依赖性地减轻了背部皮肤的红斑、鳞屑和增厚，显著降低PASI评分和表皮厚度，中剂量和高剂量效果与MTX相当。高剂量ZH短期给药未引起体重、肝功能（ALT、AST）、肾功能（BUN、Cr）指标及主要脏器组织病理学的明显异常，提示初步安全性良好。
ZH降低IMQ诱导的炎症反应并改善角质形成细胞异常增殖：ZH显著降低脾脏重量，抑制Ki67阳性角质形成细胞增殖，下调皮肤组织中IL-22、IL-1β、TNF-α和CCL20的mRNA和蛋白水平，表现出剂量依赖性的免疫调节作用。
ZH改善IMQ诱导银屑病小鼠的肠道屏障完整性：ZH显著降低血清FITC-Dextran浓度和LPS水平，上调结肠组织中Tjp1、Ocln和Cldn1的mRNA及TJP1、Occludin和Claudin-1蛋白表达，表明ZH改善肠道屏障功能并减少全身性内毒素血症。
ZH通过改善微生物多样性和恢复群落组成缓解IMQ诱导的肠道菌群失调：16S rRNA测序显示IMQ组α多样性指数（ACE、Chao1、Simpson、Shannon、Faith's PD）显著降低，ZH治疗部分恢复了这些指标；PCA分析显示IMQ+M-ZH组的微生物群落结构向对照组方向偏移，表明ZH部分恢复了肠道菌群组成。
ZH部分恢复IMQ相关肠道菌群失调并改善银屑病样炎症：随机森林分析鉴定出毛螺菌科FCS020群、毛螺菌科UCG-001和拟杆菌属在IMQ组中富集，ZH治疗后丰度降低并趋于正常；这些菌群与皮肤炎症因子IL-22、IL-1β、TNF-α和CCL20呈显著正相关，而GCA-900066575、Muribaculum和Ruminiclostridium与这些细胞因子呈负相关。
肠道菌群耗竭削弱ZH对IMQ诱导银屑病样炎症的治疗效果：ABX处理显著降低粪便细菌丰度，证实菌群耗竭成功。在菌群耗竭条件下，M-ZH对皮肤病变、PASI评分、脾脏肿大、表皮增厚、Ki67表达及炎症因子的改善作用均被显著削弱，为肠道菌群参与ZH治疗作用提供了功能性证据。
ZH调节IMQ诱导小鼠的预测微生物代谢和功能通路：PICRUSt2功能预测分析鉴定出10条显著改变的KEGG通路，其中α-亚麻酸代谢、香叶醇降解、己内酰胺降解、醚脂代谢和亚油酸代谢在IMQ组中下调，ZH治疗后显著恢复。
五、讨论与结论
讨论部分指出，银屑病相关炎症由相互关联的细胞因子网络介导，而非孤立的炎症介质，ZH同时下调IL-22、IL-1β、TNF-α和CCL20符合这一网络视角。与既往主要针对皮肤或药物的干预研究不同，本研究进一步考察了多草药中药复方对肠道屏障和肠道菌群的影响，将ZH的评估从局部皮肤炎症扩展到全身系统层面。ZH中多种草药或其活性成分已被报道可纠正肠道菌群失调以改善炎症性皮肤病，如黄芩中的黄芩苷可恢复特应性皮炎小鼠肠道中有益菌的丰度，黄连解毒汤可富集产短链脂肪酸菌群，为ZH的菌群调节作用提供了合理基础。
研究也存在局限性：7天IMQ模型为急性炎症模型，不能完全模拟人类银屑病的慢性、复发和多因素特性；样本量较小可能限制统计效能；MTX组未纳入16S rRNA测序分析，无法直接比较ZH与常规治疗引起的菌群变化异同；PICRUSt2功能预测为计算推断，需宏基因组学、宏转录组学和代谢组学进一步验证；抗生素耗竭实验为广谱干预，不能确定具体菌群类群的因果作用；高剂量ZH的短期安全性观察仅为初步证据，不能替代全面毒理学评价。
研究结论：ZH治疗与IMQ诱导小鼠皮肤和全身炎症反应减轻、肠道屏障相关参数改善以及肠道菌群组成部分恢复相关，提示ZH可能通过抑制全身炎症、改善肠道屏障功能和恢复菌群稳态来缓解银屑病样炎症，支持其在银屑病管理中的治疗潜力。
