胆木浸膏片通过促进 SIRT3 介导的 SOD2 去乙酰化及线粒体氧化还原稳态减轻牙周炎

《Journal of Ethnopharmacology》:Danmu Jingao Tablet attenuates periodontitis by promoting SIRT3-mediated SOD2 deacetylation and mitochondrial redox homeostasis

【字体: 大 中 小 】 时间:2026年10月24日 来源:Journal of Ethnopharmacology 6.8

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   •丹木精膏片(DMJGT)通过促进M2巨噬细胞极化改善牙周炎。•DMJGT通过触发SIRT3-SOD2通路促进M2巨噬细胞极化。•通过SIRT3抑制剂3-TYP和siRNA干扰验证了SIRT3依赖性机制。引言牙周炎影响近10%的世界人口,是一种广泛存在的慢性炎症性疾病(Che

  
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    丹木精膏片(DMJGT)通过促进M2巨噬细胞极化改善牙周炎。
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    DMJGT通过触发SIRT3-SOD2通路促进M2巨噬细胞极化。
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    通过SIRT3抑制剂3-TYP和siRNA干扰验证了SIRT3依赖性机制。

引言

牙周炎影响近10%的世界人口,是一种广泛存在的慢性炎症性疾病(Chen et al., 2025; Frencken et al., 2017)。在中医理论中,牙周炎归属于"牙痈"(牙脓肿)和"牙宣"(牙龈萎缩)范畴(Jin et al., 2026; Li, 2021),被视为一种痈疮和脓肿类型。临床上,牙周炎表现为牙龈炎症、牙周袋形成以及牙槽骨进行性吸收(Cui et al., 2023)。其发病机制由口腔微生物群失调和宿主免疫反应驱动(López-Valverde et al., 2024),致病菌的蓄积引发过度的持续性炎症,进而破坏牙周组织稳态(Chen et al., 2023; Zhang et al., 2026)。这种失调的免疫反应会引发组织破坏与氧化应激的恶性循环,浸润的免疫细胞释放大量活性氧(ROS)和蛋白水解酶,进一步加重牙周组织破坏(Sczepanik et al., 2020)。目前的治疗手段很少能够实现牙周结构的完全恢复(Hashim et al., 2026)。因此,探索能够调节宿主免疫反应并促进组织修复的新型治疗策略具有重要的临床意义。
巨噬细胞作为关键的免疫哨兵细胞,在牙周炎的进展与消退过程中发挥双重作用(Mo et al., 2024),并通过清除病原体和碎片来维持组织稳态(Alvarez-Argote and O'Meara, 2021)。在牙周炎中,M1型极化的巨噬细胞依赖糖酵解途径,产生大量ROS、NO和促炎细胞因子(Wang et al., 2021b; Zhang et al., 2024),从而促进破骨细胞的分化与活化,驱动牙槽骨吸收(AlQranei and Chellaiah, 2020)。相反,M2巨噬细胞极化对正常骨形成至关重要(Ren et al., 2023),巨噬细胞极化的失衡是决定牙周炎预后的关键因素(Peng et al., 2024; Zhou et al., 2019)。因此,通过将巨噬细胞平衡从M1向M2表型转移的策略被认为是牙周炎治疗的一种有前景的方法。
Sirtuin 3(SIRT3)是一种线粒体NAD+依赖性去乙酰化酶,调控多种线粒体蛋白的乙酰化状态(Diao et al., 2021; Li et al., 2020; Liu et al., 2024; Wang et al., 2021a)。在氧化应激或炎症状态下,SIRT3活性受到抑制,导致下游靶蛋白(包括SOD2)过度乙酰化,从而降低其抗氧化活性,导致线粒体ROS累积和功能障碍(Huang et al., 2025; Kim et al., 2017; Wei et al., 2025)。在牙周炎中,SIRT3缺乏会损害SOD2活性和骨细胞分化(Huang et al., 2025),并加重以牙槽骨吸收增加、氧化损伤和线粒体功能障碍为特征的牙周疾病(Chen et al., 2021)。此外,在牙周炎中,SIRT3的激活可增强去乙酰化作用并缓解线粒体功能障碍(Tang et al., 2025),抑制巨噬细胞M1极化及炎症细胞因子的分泌,从而减轻牙周炎症和牙槽骨吸收(Bian et al., 2026)。上述研究表明,SIRT3在牙周炎的发病机制中发挥着关键作用。
Nauclea officinalis(Pierre ex Pit.)Merr. & Chun(学名已与世界植物在线核对,https://wfoplantlist.org/,访问日期:2026年9月8日),中文通称"丹木",是海南黎族的一种传统药用植物,有着悠久的清热、解毒应用历史(Liu et al., 2022; Wu et al., 2019; Zhai et al., 2016)。N. officinalis的最早记载见于《中草药手册》(Guangzhou Military Region Logistics Department Health Division, 1969)。根据该手册记载,N. officinalis味苦,性寒,具有清热解毒、消肿止痛的功效,用于治疗痈肿疔疮。《中药大辞典》(Nanjing University of Chinese Medicine, 2006)中同样记载了其相同的传统用途。《中草药汇编》记载N. officinalis可治疗痈毒、疔疮和脓肿(National Compendium of Chinese Herbal Medicines Compilation Committee, 1975)。因此,N. officinalis用于治疗痈疮疔肿的传统用法与"牙痈"(牙周炎的表现之一)的治疗直接相关。N. officinalis富含吲哚类生物碱、喹诺酮类生物碱、五环三萜皂苷、酚酸和类黄酮等多种生物活性植物化学物,其提取物具有抗炎、抗氧化、抗菌和免疫调节活性(Liu et al., 2022; Zhai et al., 2016; Zhang et al., 2009)。丹木精膏片(DMJGT)是由N. officinalis茎皮水提物制成的单味药薄膜衣片,其制剂已被收录于《中华人民共和国药典·中成药卷》。根据该标准,DMJGT中原料药与磷酸氢钙与滑石粉的重量比为640:1:3(每批次分别源自16000 g: 25 g: 75 g)(State Food and Drug Administration, 2002)。DMJGT临床上用于上呼吸道感染、急性扁桃体炎和泌尿道感染的治疗,临床前和临床研究已充分证实其抗炎疗效(Fu et al., 2002),并已有报道指出丹木提取糖浆作为辅助治疗可提高牙龈炎患者的总体有效率(Yang and Sun, 2016)。鉴于钩藤属(Uncaria)和丹木属(Nauclea)同属于茜草科(Rubiaceae)钩藤族(Naucleeae)。研究表明,钩藤属植物中的生物活性成分可作为SIRT3的选择性激动剂,通过SIRT3/SOD2通路抑制线粒体氧化损伤和细胞凋亡(Hu et al., 2024; Lin et al., 2025)。基于N. officinalis已知的抗炎和抗氧化活性以及SIRT3在牙周炎中已确立的作用,我们假设DMJGT可能通过SIRT3-SOD2通路发挥抗牙周炎作用。
在本研究中,我们使用UPLC-Q-TOF-MS系统研究了DMJGT的化学组成,并通过分子对接预测其主要活性化合物与SIRT3的相互作用。随后,我们使用结扎诱导的牙周炎小鼠模型和LPS暴露的RAW264.7巨噬细胞对DMJGT的保护作用进行了广泛评估,特别考察了SIRT3-SOD2去乙酰化轴、线粒体稳态、巨噬细胞表型转换和炎症级联反应。此外,为了确证SIRT3的因果作用,我们同时采用了药理学抑制(在体内使用特异性SIRT3抑制剂3-TYP,即3-(1H-1,2,3-三氮唑-4-基)吡啶)和基因敲低(在体外使用siRNA)两种方法。通过整合这些研究手段,我们旨在确定SIRT3是否是介导DMJGT治疗作用的关键且不可替代的靶点。我们的研究结果可能为DMJGT的抗牙周炎活性提供新的机制见解,并为其作为牙周炎有前景的宿主导向治疗策略的再开发提供合理依据。

章节摘录

化学品和试剂

DMJGT(批号:20230701)由海南制药厂有限公司(中国海南)生产。LPS购自北京索莱宝科技有限公司(中国北京);甲硝唑片(批号:JX25051201)购自石药集团石家庄第四制药厂有限公司(中国河北);3-TYP购自MedChemExpress LLC(美国新泽西州蒙茅斯镇);CCK-8试剂盒购自北京兰杰科科技有限公司(中国北京);APC标记的抗小鼠CD206抗体和FITC标记的抗小鼠CD86抗体购自Elabscience Biotechnology Co., Ltd.

DMJGT中化学成分的鉴定

基于内部化合物数据库,通过UPLC-Q-TOF-MS/MS从DMJGT中初步鉴定出83种化学成分。详细的化学信息列于表S3,ESI正离子和ESI负离子模式的代表性基底峰色谱图(BPC)分别示于图1A。其中,strictosamide、vincosamide和naucleofficine A的响应强度最高。
DMJGT中strictosamide和vincosamide的含量为

讨论

本研究证明DMJGT通过调节SIRT3-SOD2去乙酰化轴对牙周炎发挥治疗作用。我们发现,在结扎诱导的牙周炎小鼠模型中,DMJGT治疗可减轻牙槽骨吸收、减少破骨细胞数量并抑制炎症浸润。在机制上,DMJGT似乎可上调SIRT3和SOD2的表达,同时降低Ac-SOD2(K68)水平,恢复全身氧化还原稳态,并通过

结论

总之,本研究结果表明,丹木精膏片(DMJGT)通过增强SIRT3-SOD2去乙酰化轴减轻牙周炎。在机制上,DMJGT增强SIRT3的表达,促进SOD2去乙酰化(表现为Ac-SOD2(K68)水平降低),恢复线粒体氧化还原平衡,抑制氧化应激,促进线粒体生物发生,并抑制巨噬细胞从M1促炎状态向M2抗炎表型的转变。重要的是,siRNA介导的

CRediT作者贡献声明

刘红飞(Hongfei Liu):撰写初稿、可视化、调查研究、形式分析、概念化。王家锋(Yanfeng Wang):调查研究、形式分析。余家燕(Yihan Yu):软件。张南(Nan Zhang):软件。王刚(Gang Wang):可视化。刘元哲(Yuanzhe Liu):可视化。陈荣凯(Rongkai Chen):软件。贾安(An Jia):撰写与修改编辑、研究设计、概念化。何小宁(Xiaoning He):撰写与修改编辑、研究设计、概念化。李永辉(Yonghui Li):撰写与修改编辑、项目管理、研究设计,

伦理声明

本研究按照ARRIVE(动物研究:体内实验报告规范)指南开展。本研究已获得海南医科大学伦理委员会批准。(批准号:HYALL-2026-124)

发表同意

不适用。

资金支持

本研究得到了海南省自然科学基金(编号:826ZD0997)和海南医科大学大学生研究创新项目(编号:RZ2500002138)资助。

利益冲突声明

作者声明不存在可能影响本文所报告工作的已知竞争性经济利益或个人关系。
Hongfei Liu|Yanfeng Wang|Yihan Yu|Nan Zhang|Gang Wang|Yuanzhe Liu|Rongkai Chen|An Jia|Xiaoning He|Yonghui Li
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