抑制检查点激酶1（Chk1）可通过抑制焦亡信号通路并减轻脊髓损伤小鼠小胶质细胞向M1表型的极化偏移来促进运动功能恢复

《British Journal of Pharmacology》：Checkpoint kinase 1 (Chk1) inhibition promotes motor function recovery through suppressing pyroptosis signalling and attenuating microglial polarization shift to M1 phenotype in spinal cord injury mice

　　

摘要

背景与目的

小胶质细胞极化偏移所诱发的炎症反应在脊髓损伤（SCI）的发生和进展中发挥作用。我们曾报道检查点激酶1（Chk1）参与调控SCI引起的运动功能障碍。本研究的目的是确定小胶质细胞极化偏移是否参与Chk1对SCI所诱发的运动功能障碍的作用。

实验方法

通过脊髓挫伤损伤在小鼠中建立病理SCI体内模型，体外模型则通过将培养的小鼠BV2细胞暴露于脂多糖（LPS）来建立。为分析相关基因和蛋白的表达水平，我们采用了定量实时聚合酶链反应、蛋白质印迹法和免疫荧光染色。我们使用细胞计数试剂盒-8、EdU检测和彗星实验来评估小胶质细胞增殖和DNA损伤。

主要结果

Chk1下调逆转了SCI在体内引起的小胶质细胞极化偏移和细胞焦亡，改善了运动功能障碍。Chk1上调则加重了小胶质细胞极化偏移和细胞焦亡，导致SCI后运动功能恶化。在体外实验中，BV2细胞中γ-H2AX和Chk1的激活均呈剂量和时间依赖性增加以响应LPS刺激。选择性Chk1抑制剂SCH900776或DNA损伤修复激动剂AV-153的实验结果表明，LPS诱导的小胶质细胞极化从M2型转向M1型，且该转变与细胞焦亡信号通路的抑制相关。

结论与意义

我们的结果表明，Chk1通过细胞焦亡信号通路调控的小胶质细胞极化偏移可能是未来治疗SCI所致运动功能障碍的一个有前景的药物靶点。

图形摘要

利益冲突声明

无。

数据可用性声明

支持本研究结果的数据可在合理要求下向通讯作者索取。