与低级别假黏液瘤相比，高级别假黏液瘤的免疫谱失调

《Pathology - Research and Practice》：Immune profile dysregulation of high grade- compared to low grade-pseudomyxomas

　　

摘要

背景

腹膜假黏液瘤是一种罕见且知之甚少的癌症。用于将腹膜假黏液瘤分类为低级别或高级别的组织学特征是主要的预后因素。本研究旨在利用转录组分析鉴定低级别和高级别腹膜假黏液瘤中的差异表达基因，从而加深对其病理生理学的理解。

方法

选取了两个腹膜假黏液瘤FFPE样本队列，分别由13例低级别和11例高级别肿瘤组成。通过免疫组化分析多种生物标志物（CK7、CK20、MUC2、MUC5AC、Ki67）的表达。利用Nanostring?技术检测基因表达谱，包括肿瘤信号360^TM面板（760个肿瘤信号相关基因和20个内部参考对照）和炎症v2面板（249个炎症相关人类基因和6个内部参考对照）。

结果

本研究揭示了低级别和高级别腹膜假黏液瘤在免疫反应方面具有不同的转录组谱，表明免疫细胞迁移和/或趋化作用失调，以及细胞代谢活性和细胞信号转导的调节。此外，在高级别腹膜假黏液瘤中，与脂多糖和细菌分子反应相关的基因和信号通路也呈下调。我们的结果进一步证实了免疫反应和细菌感染在腹膜假黏液瘤病理生理学中的作用。

引言

腹膜假黏液瘤（PMP）是一种罕见而特殊的恶性腹膜疾病，影响每百万患者中的3例[1]。PMP的特征是腹腔内弥漫性黏液积聚和腹膜表面的黏液性肿瘤种植。在80%的病例中，它源于黏液性阑尾肿瘤，如果不进行治疗，疾病会因黏液积聚而进展为明显的腹部肿大。这会导致疼痛、营养不良和肠梗阻，这些都是PMP患者的主要死因。根据2019年WHO分类，原发性黏液性阑尾肿瘤根据组织病理学细胞和组织特征分为低级别或高级别。腹膜种植采用相同的组织病理学定义进行分类。PMP的最终分级（低级别：LG PMP或高级别：HG PMP）由高级别与低级别病变总比例决定[2]。因此，PMP是一种异质性疾病，患者同时表现出低级别和高级别腹膜内病变，以及高度的瘤内和瘤间变异性。

自20世纪80年代以来，完全细胞减灭术（CRS）联合高温腹腔内化疗（HIPEC）已成为PMP的预后改善的标准治疗方案[3]、[4]。得益于这种治疗方式，无病生存率达到68%，5年总生存率达到80%[5]、[6]，但尚无替代疗法。由于疾病的罕见性、黏液环境中细胞成分稀少以及腹膜产黏液细胞增殖率低，PMP的研究发展仍然困难，这阻碍了适应性可重复细胞模型的开发。因此，PMP的病理生理学仍然知之甚少。因此，对PMP进行生物分子研究和基因组表征对于更好地分类肿瘤、理解其病理生理学、鉴定参与PMP致癌的新基因改变以及发现可能导致创新治疗选择的新分子靶点至关重要。迄今为止，一些学者研究了人类腹膜黏液性癌变的遗传谱和分子亚型[7]。这些研究鉴定了一些突变基因，特别是KRAS、GNAS和TP53，但没有相关的统计结果或生物应用，这可以归因于若干局限性，包括：i) 样本量小，ii) 样本来源于异质性诊断（真正的PMP、无癌变的阑尾肿瘤或未知），iii) 使用敏感性较差和/或全局检测的方法（NGS、PCR或"手动方案"），iv) 缺乏临床数据或临床数据与最佳手术治疗不符，无法与预后正确关联。此外，所使用的PMP分类未完全描述或经常过时，导致结果难以解释[8]、[9]、[10]、[11]、[12]、[13]、[14]、[15]、[16]、[17]、[18]。

关于PMP转录组谱的文献较少。Levine 等人研究了PMP的转录组谱，提出了一种具有预后意义的分子分类，描绘了三个簇：低风险PMP、高风险PMP和结直肠癌[19]。最近，这些作者鉴定了一个17基因特征，该特征富含与较差预后相关的致癌通路，以及一个与较好预后相关的免疫富集特征[20]、[21]。Isella 等人分析了24例接受细胞减灭术和HIPEC治疗的PMP患者的转录组谱。他们证明整合基质成分（癌相关成纤维细胞）的转录组谱有助于改善疾病预后预测[22]。2024年，Pretzsch 等人表明与非转移性LG PMP相比，上皮-间充质转化标志物在结直肠癌和LAMN中上调[23]。最近，一篇出版物揭示了PMP与黏液性阑尾肿瘤相比，具有增加脂质代谢、炎症、JAK-STAT和RAS信号通路的独特基因表达特征[24]。

据我们所知，尚无基于LG PMP和HG PMP比较的转录组分析。本研究旨在利用NanoString?技术在现有分子亚型的框架内鉴定这两种实体之间的差异表达基因[20]，从而评估这些发现是否支持、完善或挑战当前的分类范式。研究结果提供了新数据，将有助于鉴定维持PMP发展的信号通路，从而更好地理解PMP的病理生理学。

章节摘要

患者样本

接受低级别或高级别PMP（WHO 2019分类）手术治疗的患者在法国圣厄布莱的西部癌症研究所（ICO癌症中心）接受治疗。手术用于首次诊断为PMP或复发时的患者。患者队列在2023年1月至2024年4月期间接受手术治疗。手术治疗采用上述不同的数据指标：PCI（腹膜癌变指数）评分、完全

PMP患者队列的临床特征

从ICO临床数据库中选择24个FFPE样本：13例LG PMP和11例HG PMP（表1）。诊断时LG组的中位年龄为66岁，HG组为62岁；LG组和HG组的中位腹膜癌变指数评分分别为24/39和30/39。

在LG组中：11例患者患有低级别黏液性阑尾肿瘤，2例患有高级别黏液性阑尾肿瘤。66%的患者（8/12）实现了完全细胞减灭

讨论

转录组分析在肿瘤学领域已有助于更好地了解某些癌症的病理生理学，并产生了新的治疗选择。然而，对于腹膜假黏液瘤（PMP），虽然有关其基因组谱的文献丰富，但有关其转录组谱的数据有限。因此，PMP的病理生理学仍然知之甚少，治疗手段有限。

本转录组分析揭示了

伦理声明

已获得所有参与者或其法定代表签署书面知情同意书，同意参与本研究并发表文章。已遵守参与者的隐私权。

本研究包括器官或组织捐赠者。本研究包括人类生物材料，已获捐赠者或其直系亲属或法定代表同意在本研究中使用并发表文章。本研究使用的样本并非来源于被处死的

利益冲突声明

作者声明不存在利益冲突。

资助方未参与研究设计、发表决定或稿件撰写。

所有作者均已阅读并批准本稿件。本稿件中呈现的工作未提交至其他期刊。

Charlotte Bourgin|Maxime Golias|Emilie Ollivier|Romain Levergeois|Denis Cochonneau|Emilie Thibaudeau|Frédéric Dumont|Timothée Vignaud|Marie-Fran?oise Heymann|Dominique Heymann