基于F8基因敲除内皮细胞多组学表征的血友病A药物重定位候选药物筛选

《Pharmaceuticals》：Integrated Multi-Omics Identifies Valproic Acid as a Candidate for Hemophilia A

　　**摘要****背景/目的：** 血友病A（HA）由凝血因子VIII（FVIII）缺乏所致，但其临床异质性提示，除止血功能受损之外的生物学改变也可能参与疾病的表现。本研究旨在表征**F8**基因敲除（**F8**-KO）相关的分子变化，并筛选具有治疗血友病A潜力的药物重定位候选药物。**方法：** 采用CRISPR/Cas9构建F8-KO人脐静脉内皮细胞模型，并通过RNA测序及数据非依赖性采集（DIA）蛋白质组学进行特征分析。整合多组学、富集及蛋白质–蛋白质相互作用分析，并利用Connectivity Map（CMap）、EpiMed和DrugBank进行药物重定位筛选。使用细胞活力检测、RT-qPCR、转录组学分析以及H3K27ac CUT&Tag评估丙戊酸（VPA）的作用。**结果：** 整合转录组学和蛋白质组学分析鉴定出113个共享基因，其变化方向以一致性为主；基于网络的分析优先筛选出与内皮稳态和炎症调控相关的基因。药物重定位在三类筛选来源中一致鉴定出丙戊酸和厄贝沙坦。丙戊酸提高了**CD274** mRNA的表达，部分逆转了**F8**-KO相关的转录改变，并重塑了涉及血管稳态和炎症相关通路的H3K27ac关联调控程序。**结论：** 丙戊酸可能调节**F8**缺乏相关的内皮分子改变，是血友病A的药物重定位候选药物。这些发现可能为探索超越传统凝血功能纠正的潜在治疗策略提供新的视角。