免疫原性细胞死亡诱导剂的制备浓度与免疫-攻瘤间隔共同调控濒死细胞疫苗的保护效果

《Molecules》：Vaccination Efficacy of Mitoxantrone-Treated CT-26 Cells Under Different Drug Concentrations and Vaccination Intervals

　　免疫原性细胞死亡（ICD）可将濒死肿瘤细胞转化为抗癌疫苗，但保护效果是否取决于这些细胞的制备方式及给药时机，迄今鲜有研究。本研究以临床批准的ICD诱导剂小分子米托蒽醌（MTX）为工具，在小鼠CT-26结肠癌模型中考察了上述两个变量。MTX呈浓度依赖性降低细胞活力，并诱导胞外ATP释放。然而，不同浓度下细胞总死亡率相近，表明活力随浓度升高而下降并未伴随细胞死亡的等比例增加。实际差异在于濒死细胞群体的构成：随浓度升高，细胞从早期凋亡向晚期凋亡转变。使用MTX处理细胞进行预防性免疫可保护BALB/c小鼠：在1 μM浓度免疫后，独立实验中75.0–87.5%的动物未发生肿瘤；3 μM浓度下则为37.5–62.5%。免疫保护效果随免疫与攻瘤之间的间隔延长而增强：同时注射时0%动物无瘤，间隔3天时50.0%无瘤，间隔7天时87.5%无瘤。经冻融彻底杀死的细胞作为疫苗无活性；顺铂处理细胞仅带来轻微延迟；而MTX处理细胞免疫应答者则在整个观察期剩余时间内均抵抗再次攻瘤。综上，这些结果表明，仅使用ICD诱导药物不足以实现有效的濒死细胞免疫，保护效果受疫苗制备方式及免疫与攻瘤间隔的影响，而非单纯由细胞死亡程度决定。