改良凝血酶生成检测（TGA_int）在血友病因子及非因子疗法功能性评估中的应用

《Biomedicines》：A Modified Intrinsic Thrombin Generation Assay for Functional Assessment of Factor and Non-Factor Therapies in Hemophilia

　　

摘要

背景/目的： 传统的凝血因子VIII（FVIII）和凝血因子IX（FIX）检测可能对现代血友病治疗提供依赖于产品和试剂的结果。我们开发了一种改良的凝血酶生成检测（TGA_int），旨在增强FVIII/FIX依赖性凝血酶生成，并评估其对因子疗法和非因子疗法的反应。方法： TGA通过省略外源性组织因子、使用分离的血小板作为磷脂表面、并使用米尔韦辛（milvexian）抑制凝血因子XI（FXI）活性进行改良。优化后的检测使用10 × 10⁹/L血小板和约20%的FXI活性。使用Advate、Adynovi、Altuvoct、Alprolix和依替巴肽（emicizumab）对TGA_int进行评估。结果： 与标准TGA_ext相比，TGA_int显示更长的滞后期（+10.4分钟；p = 0.0078）、更低的峰值凝血酶（?155.8 nM；p = 0.0156）和更低的曲线下面积（AUC）（?2559 nM；p = 0.0156）。增加因子浓度通常可增加峰值凝血酶和AUC，尽管各产品的反应存在差异。因子回收率也存在显著差异。浓度为55 μg/mL的依替巴肽产生独特的凝血酶生成谱，无法以单一的FVIII等效活性表达。结论： TGA_int能够对FVIII/FIX依赖性凝血酶生成进行功能性评估，并可能补充传统因子检测，通过评估因子疗法和非因子疗法的整体止血潜力来发挥作用。仍需进一步的临床验证。