摘要
Copiapoa cinerea（Phil.）Britton & Rose subsp. cinerea 是一种生长缓慢的仙人掌，原产于海岸阿塔卡马沙漠，受到栖息地丧失、气候变化和非法采集的威胁。我们开发了一套基于种子的体外繁殖方案，并测试了种子消毒、外植体位置、细胞分裂素剂量、生长素剂量、酚类反应以及驯化基质，以培养瓶或驯化箱作为实验单位。使用1%、3%或5%（v/v）商用漂白剂（有效氯含量为0.1%、0.3%和0.5%）消毒的种子，在45天后达到76%至84%的发芽率，消毒浓度对最终发芽率或发芽时间无显著影响。在一项包含基部和中部幼苗段的析因实验中，使用了0、2.22、4.44或6.66 μM的6-苄氨基嘌呤（BAP），外植体位置影响了所有生长变量（芽数、响应外植体比例、芽长和生物量）：中段外植体表现优于基部段外植体，每个外植体产生1.85 ± 0.15个芽（而基部段为1.12 ± 0.10个），50%的外植体形成新芽（而基部段仅3%）。在培养基中添加BAP使响应性中段外植体的比例从对照组的20%提高到2.22 μM BAP时的86.7%，该浓度同时也产生了最高的增殖率（每个外植体2.33 ± 0.18个芽），且在更高剂量下芽数未进一步增加。顶段外植体在无生长调节剂的情况下有47%生根，吲哚-3-乙酸（1.14至5.71 μM）显示出非显著的生根诱导趋势，最高可达93%生根率。外植体池的总酚含量范围为8.5至27.0 mg没食子酸当量/g干重，其中细胞壁结合部分占45%至86%；酚类含量对外植体位置和生长调节剂剂量的响应具有组分特异性，而组织褐变程度轻微。离体驯化存活率达到98%，珍珠岩-有机质-花岗岩混合物相较于单独使用风化花岗岩，提高了植株高度和生物量。该方案为这一受威胁物种的异地保护提供了植物材料。
