综述：寄生虫重组蛋白表达综述：表达系统比较、构建体设计策略与质量控制

《Current Issues in Molecular Biology》：Recombinant Expression of Difficult-to-Express Parasite Proteins: Strategies for Functional and Structural Characterization and Translational Applications

　　摘要重组蛋白用于表征寄生虫酶、膜蛋白、抗原和蛋白复合物，但某些靶标难以以可溶性且有功能的形式回收。表达可能受密码子使用、内在无序或低复杂度区域、跨膜片段、二硫键形成、翻译后加工以及多结构域组织的影响。本综述比较了细菌、酵母、昆虫细胞、哺乳动物细胞、利什曼原虫（Leishmania tarentolae）和无细胞表达系统，并考察了构建体设计、密码子优化与协调、融合伴侣、分子伴侣、表达调控以及计算工具。它区分了寄生虫蛋白的已报道结果与基于一般重组蛋白研究的建议。实验确定的恶性疟原虫（Plasmodium falciparum）结构说明了X射线晶体学、溶液NMR和冷冻电子显微镜的使用；核糖体示例被确定为寄生虫衍生的复合物而非重组产物。分子对接、分子动力学模拟和结合能计算被讨论为开发和优先化假设的工具，而非实验测试的替代品。本综述将靶标特征与初始构建体和宿主选择联系起来，并确定了在得出结构或功能结论前所需的蛋白质量检查。