《Open Forum Infectious Diseases》：Feasibility, Accuracy, and Acceptability of Self-Collected Dried Blood Spots for Hepatitis C Virus, Hepatitis B Virus, and SARS-CoV-2 Testing
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背景：丙型肝炎和乙型肝炎的筛查、诊断和治疗可能因难以获得面对面医疗服务而受到限制。本研究探索了干血斑（DBS）采集的替代方法，特别是基于邮寄的自我采集方式。方法：研究人员从多伦多肝脏疾病中心和多伦多西部家庭健康团队通过电话招募了388名患者，这些患者对丙型肝炎
背景：丙型肝炎和乙型肝炎的筛查、诊断和治疗可能因难以获得面对面医疗服务而受到限制。本研究探索了干血斑（DBS）采集的替代方法，特别是基于邮寄的自我采集方式。方法：研究人员从多伦多肝脏疾病中心和多伦多西部家庭健康团队通过电话招募了388名患者，这些患者对丙型肝炎病毒（HCV）、乙型肝炎病毒（HBV）和/或SARS-CoV-2血清阳性或血清状态未知。研究人员向参与者邮寄了采集套件、纸质说明/包含视频说明的二维码、人口统计学/可接受性问卷、回邮信封及实验室申请单。研究人员对DBS卡和静脉穿刺样本进行了乙型肝炎表面抗原（HBsAg）、HCV抗体（HCV Ab）及SARS-CoV-2抗体检测。将DBS结果与作为金标准的传统静脉穿刺结果进行比较。结果：在388名招募的参与者中，110人完成了研究，即归还了DBS卡并完成了传统静脉穿刺及问卷调查。对于乙型肝炎表面抗原，自我采集DBS检测显示出100%的敏感性和特异性，共有31例真阳性和79例真阴性。对于HCV抗体，自我采集DBS检测显示出96.2%（25/26）的敏感性和96.4%（81/84）的特异性，共有25例真阳性、81例真阴性、3例假阳性和1例假阴性。SARS-CoV-2检测也显示出100%的敏感性和特异性，共有108例真阳性和2例真阴性。可接受性较高，78.3%（101/129）的参与者认为该过程容易或非常容易。结论：基于邮寄的自我采集DBS使得非医学培训人员能够可靠地自行采集样本，从而实现远程检测。高一致性和可接受性表明，该方法对于解决医疗保健可及性挑战是可行的，特别是在有意愿寻求检测的人群中。
研究背景与目的
尽管在丙型肝炎病毒（HCV）治疗方面取得了显著进展，并且针对乙型肝炎病毒（HBV）已有有效疫苗和抑制疗法，但这些感染仍是全球重大健康威胁，每年导致约100万人死亡。为此，世界卫生组织设定了到2030年消除慢性病毒性肝炎这一公共卫生威胁的目标。然而，实现这一目标需要改进诊断和护理衔接。许多人群面临医疗保健和诊断障碍，导致病毒性肝炎的诊断不足以及护理级联中的重大缺口。传统的HCV和HBV检测通常需要静脉穿刺和面对面就诊，这在偏远地区构成了障碍。干血斑（DBS）采集是静脉穿刺的一种替代方法，通过指尖采血滴于滤纸上，干燥后洗脱血清进行病毒血清学和/或核酸检测。DBS已被充分验证可用于HCV、HBV和HIV检测，且多点DBS采集卡可实现序贯检测或多病原体同步检测。然而，DBS采集仍需医疗保健人员参与，限制了其在偏远或服务不足人群中的应用。本研究旨在评估自我采集干血斑（scDBS）样本用于检测HCV抗体（HCV Ab）、乙型肝炎表面抗原（HBsAg）和SARS-CoV-2抗体的可行性、准确性和可接受性。纳入SARS-CoV-2检测的决定是在COVID-19大流行初期做出的，因为确定抗体状态可为参与提供额外动力，且不会增加所需样本数量或影响HCV和HBV检测。
研究方法概述
研究于2022年4月至2024年3月期间进行。研究人员通过电话联系了来自多伦多肝脏疾病中心和多伦多西部家庭健康团队的18岁及以上患者。已知对HCV、HBV和/或SARS-CoV-2血清阳性的患者被选为潜在参与者，同时还包括一组血清状态未知的个体。感兴趣的参与者会收到邮寄的scDBS采集套件，内含分步说明、指导视频的二维码、同意书、血液检查申请单、人口统计学和可接受性调查问卷、DBS采集卡、酒精棉片、2个采血针（1.5×2.0 mm深度）、纱布、绷带、生物危害袋、干燥剂包和预付回邮信封。参与者需在家中独立完成DBS样本采集，并使用提供的申请单完成传统静脉穿刺，后者作为分析DBS准确性的金标准。DBS样本通过清洁手指、刺破指尖并将毛细血管血滴落在卡片上的标记圆圈内进行采集。参与者将完成的问卷、同意书和干燥的scDBS卡邮寄至多伦多总医院，血清样本则通过静脉穿刺采集后同样送至该院。样本分批运输至实验室进行分析，比较scDBS结果与传统血清学结果。研究计算了敏感性、特异性、阳性预测值（PPV）和阴性预测值（NPV），并通过Cohen κ统计量评估一致性。
研究结果
1. scDBS与传统血清学结果的一致性
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乙型肝炎表面抗原（HBsAg）： scDBS与传统血清学检测结果完全一致（Cohen κ = 1.00）。共31例阳性和79例阴性，敏感性为100.0%（31/31；95% CI, 88.8%–100.0%），特异性为100.0%（79/79；95% CI, 95.4%–100.0%），PPV和NPV均为100.0%。受试者工作特征曲线下面积（AUC）为0.999，显示两者高度一致。
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丙型肝炎病毒抗体（HCV Ab）： 在26例通过静脉穿刺检测为HCV Ab阳性的参与者中，25例经scDBS检测为阳性，出现1例假阴性；在84例阴性参与者中，81例经scDBS检测为阴性，出现3例假阳性。总体观察一致性为97.3%，Cohen κ为0.90。敏感性为96.2%（25/26；95% CI, 80.4%–99.9%），特异性为96.4%（81/84；95% CI, 89.9%–99.3%），PPV为89.3%（25/28；95% CI, 71.8%–97.7%），NPV为98.8%（81/82；95% CI, 93.3%–100.0%）。血清与DBS的信号截止比（S/Co）值的一致性总体较高（AUC = 0.991）。
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SARS-CoV-2抗体： 观察到完全一致（Cohen κ = 1.00）。共108例真阳性（通过疫苗接种或感染）和2例真阴性。敏感性为100.0%（108/108；95% CI, 96.6%–100.0%），特异性为100.0%（2/2；95% CI, 15.8%–100.0%），PPV和NPV均为100.0%。在所有三种抗原（核衣壳蛋白、刺突蛋白及其受体结合域）中，DBS样本中的免疫球蛋白G抗体水平与血清样本中的水平强相关。
2. 样本质量
根据DBS卡上填充的斑点数量和填充完整度评估样本质量。在129份样本中，61名参与者完全填满了所有5个斑点，而25名参与者部分填满了所有5个斑点。对于HCV Ab结果不一致的样本，3例假阳性中有2例来自完全填满所有5个斑点的样本，另1例则来自仅部分填满的样本。假阴性样本则仅完全填满了1个斑点。
3. 测试可接受性
在129名参与者中，90.7%（117/129）认为纸质说明极其或非常有帮助。仅有37.2%（48/129）观看了视频说明，但观看视频的参与者中58.3%（28/48）完全填满了所有斑点，而未观看者中该比例仅为39.7%（31/78）。总体上，78.3%（101/129）认为指尖采血过程容易或非常容易，90.7%（117/129）将邮寄检测策略评为优秀或良好，93.8%（121/129）表示肯定会或可能会向他人推荐使用邮寄检测。
讨论与结论
scDBS被证明是一种有效且可行的HCV Ab、HBsAg和SARS-CoV-2 Ab检测策略，参与者可接受性高。对于HBV和SARS-CoV-2，scDBS与传统血清学完全一致。对于HCV Ab检测出现的1例假阴性结果，研究人员分析认为，该参与者多年前已治愈HCV感染（2015年达到持续病毒学应答），其抗体水平较低，加之DBS处理过程中的洗脱步骤会稀释分析物，共同导致了该假阴性结果。尽管如此，在病毒血症病例中，由于抗体滴度更高，scDBS的性能预计会更佳。3例HCV Ab假阳性结果的成因尚不明确，但由于临床实践中确认HCV感染需进行HCV RNA检测，因此假阳性结果的诊断影响较小。值得注意的是，观看视频说明的参与者更有可能完全填满DBS卡，这表明优化指导材料可能提高样本质量。尽管超过半数（52.7%）的DBS卡质量并非最优，但并未导致准确性显著下降。研究也指出了局限性，例如初始感兴趣但未完成研究的参与者比例较高（252/388），这可能与研究设计（需分别进行DBS采集和静脉穿刺）及研究人群（已确诊并接受护理）有关，而非scDBS方法本身的问题。此外，研究人群并非专门针对可能受益最大的边缘化群体（如无固定住所者）。
研究结论指出，scDBS成功实现了无需面对面就诊即可进行HCV、HBV和SARS-CoV-2检测的样本采集。高诊断准确性和强一致性表明，由非医学培训人员自行采集样本是一种可行的方法，尤其对于那些因地理或后勤障碍而难以获得传统医疗模式的人群具有重要价值。
