ZYX药物能够降低上皮性卵巢癌对化疗的耐药性

《Biochemical Pharmacology》：ZYX knockdown alleviates chemotherapy resistance in epithelial ovarian cancer

　　

摘要

上皮性卵巢癌（EOC）的高死亡率在很大程度上可归因于化疗耐药性。本研究确定了ZYX（Zyxin）是这种耐药性的关键驱动因素。在化疗耐药的EOC患者以及相应的内质素紫杉醇（A2780/PTX）和顺铂（A2780/DDP）耐药细胞系中，ZYX的表达水平过高。功能实验表明，敲低ZYX表达可以通过抑制细胞增殖和迁移、诱导细胞凋亡以及导致细胞周期停滞来逆转化疗耐药性。从机制上讲，ZYX通过与糖原合成酶激酶3β（GSK3B）相互作用来促进耐药性，而其表达下调则通过上调β-微管蛋白来提高对紫杉醇的敏感性，并通过减少微丝形成来抑制细胞迁移。此外，无论是在体外还是体内实验中，ZYX表达下调均能增强紫杉醇对化学敏感的SKOV3细胞的疗效。我们的发现确立了ZYX作为克服EOC化疗耐药性的有前景的治疗靶点。

引言

卵巢癌是女性癌症相关死亡的第五大原因，其中近50%的卵巢癌病例发生在65岁以上的女性中[1] [2]。超过70%的病例在晚期才被诊断出来，转移性卵巢癌患者的5年生存率仅为31%，这一比例几十年来几乎没有变化[3]。绝大多数卵巢恶性肿瘤起源于上皮细胞，因此被称为上皮性卵巢癌（EOC）[4]。EOC确诊后的首选治疗方法是细胞减灭手术和铂类化合物与紫杉醇（PTX）联合化疗。尽管许多患者通过一线治疗可以获得缓解，但由于肿瘤的高度异质性和化疗诱导的适应性耐药性的发展，高达80%的患者会出现复发并需要进一步治疗[5] [6]。因此，阐明驱动EOC化疗耐药性的潜在机制对于开发新的治疗策略以克服这种耐药性至关重要，从而提高治疗效果并最终改善患者的生存率。

ZYX（Zyxin）是一种LIM结构域蛋白，能够在细胞质和细胞核之间移动，参与多种细胞过程的调控[8]。近年来的研究表明，ZYX与多种癌症的发生和发展有关，如结肠癌、乳腺癌、肝癌、胃癌和非小细胞肺癌[9] [10] [11] [12] [13] [14]。ZYX不仅与肿瘤的发生有关，还与肿瘤的耐药性有关。已有报告指出，在耐药性乳腺癌细胞中ZYX表达水平升高，而在化疗耐药细胞中则降低，这表明ZYX的表达水平可能影响癌细胞对特定抗癌治疗的敏感性[15] [16]。此外，还发现ZYX在多种肺癌细胞模型中（如RA耐药的H1299和A549细胞以及RA敏感的H460细胞）中会导致视黄醇耐药性，因为它显著降低了视黄醇的毒性[17]。我们之前的研究表明，在EOC紫杉醇耐药细胞中ZYX表达显著升高[18]，这表明其在肿瘤化疗耐药性中可能起着重要作用。因此，为了探索克服治疗失败的新策略，我们评估了ZYX在EOC化疗耐药性中的治疗潜力，并阐明了其作用机制，为其临床应用提供了理论依据。

在本研究中，我们发现ZYX在顺铂耐药的卵巢癌细胞系A2780/DDP中表达水平过高。对临床样本的分析表明，ZYX可能与EOC的化疗耐药性有关。体外实验结果表明，敲低ZYX表达可以通过抑制GSK3B（糖原合成酶激酶3β）的表达并破坏微丝结构来降低耐药细胞的化疗耐药性。此外，ZYX表达下调可能通过调节β-微管蛋白的表达来增强紫杉醇的疗效。本研究为克服EOC对化疗的耐药性提供了新的靶点，并阐明了其可能的耐药机制。

章节节选

细胞系和临床样本

人上皮性卵巢癌细胞SKOV3购自中国广州苏岩生物技术有限公司。人上皮性卵巢癌细胞A2780和紫杉醇耐药的A2780/PTX细胞购自中国厦门ImmoCell生物技术有限公司。人上皮性卵巢癌细胞系顺铂耐药细胞系A2780/DDP购自中国上海奥鲁生物技术有限公司。其中，A2780和A2780/PTX细胞接受了

ZYX过表达对EOC细胞化疗敏感性的影响

我们通过Western blot检测到A2780/DDP细胞中ZYX的表达过高，并在GSE206649数据集中观察到了相同的趋势（图1A–C）。结合之前在A2780/PTX细胞中观察到的ZYX过表达现象[18]，我们的结果提示ZYX与化疗耐药性之间存在关联。在本研究中，我们在化疗耐药的EOC患者的组织样本中证实了ZYX的表达。在此之前，H&E染色切片检查显示了明显的病理变化

讨论

尽管细胞减灭手术结合围手术期化疗是EOC唯一可能的根治性选择，但其应用受到严重限制。早期EOC通常无症状，导致大多数患者在晚期才被诊断出来，此时多灶性病变或肝外扩散使得根治性手术变得不可行。因此，这种主要的治疗策略仅适用于少数患者。因此，DDP/PTX联合方案

伦理批准和参与同意

本研究已获得机构伦理委员会的批准，并遵循政府政策和《赫尔辛基宣言》进行。

出版同意

已获得患者的出版同意。

CRediT作者贡献声明

胡向云：撰写 – 原稿撰写、研究设计、数据分析、概念构建。王世娇：撰写 – 审稿与编辑、数据可视化、方法学设计、数据分析。杨瑞辉：方法学设计、研究实施、数据管理。张晓婷：方法学设计、数据分析。何瑶瑶：数据可视化、数据分析。郑长涛：数据验证、研究实施。丁颖：研究实施、数据管理。张惠年：资源协调、数据管理。陈阿里：总体监督、数据分析。杨永霞：

利益冲突声明

作者声明没有已知的财务利益或个人关系可能影响本文的研究结果。

致谢

不适用。

胡向云|王世娇|杨瑞辉|张晓婷|何瑶瑶|郑长涛|丁颖|张惠年|陈阿里|杨永霞|杨永莉