MyeloTrak：一种无需测序即可从血浆中识别多发性骨髓瘤克隆型肽的检测方法

《Clinical Proteomics》：MyeloTrak: a sequencing-independent mass spectrometry assay for blood-based residual M-protein monitoring in multiple myeloma

摘要背景随着多发性骨髓瘤治疗进展，当疾病负荷低于传统检测方法的检测限时，高灵敏度疾病监测变得至关重要。尽管基于骨髓的微小残留病评估是金标准，但其侵入性限制了频繁纵向监测的可行性。自下而上蛋白质组学通过检测外周血中患者特异性克隆型肽提供无创且高灵敏度的替代方案，但大多数方法需要骨髓RNA或全长抗体测序来鉴定克隆型肽。因此，我们开发了MyeloTrak检测方法，这是一种不依赖测序的方法，通过利用M蛋白的固有生物标志从血浆中鉴定克隆型肽。方法单克隆抗体加标样本和患者队列被用于验证克隆型肽的选择，并以已知抗体和骨髓RNA序列为基准。结果克隆型肽从多克隆背景中富集约1,000倍，使23例不同M蛋白水平和同种型的患者能够可靠地鉴定。在单克隆抗体加标样本的系列稀释实验中，选定的克隆型肽在1–4 mg/L浓度下仍可检测到（idotp ≥ 0.9）。19例患者的纵向跟踪显示，其趋势与传统检测方法总体一致，但有4例患者呈现不一致的轨迹。结论MyeloTrak支持通过利用M蛋白的固有生物标志直接从血浆中鉴定患者特异性克隆型肽的可行性。由于其发现流程不需要骨髓RNA或全长免疫球蛋白测序，显著降低了基于血液的残余M蛋白监测的复杂性。图形摘要背景随着多发性骨髓瘤治疗进展，当疾病负荷低于传统检测方法的检测限时，高灵敏度疾病监测变得至关重要。尽管基于骨髓的微小残留病评估是金标准，但其侵入性限制了频繁纵向监测的可行性。自下而上蛋白质组学通过检测外周血中患者特异性克隆型肽提供无创且高灵敏度的替代方案，但大多数方法需要骨髓RNA或全长抗体测序来鉴定克隆型肽。因此，我们开发了MyeloTrak检测方法，这是一种不依赖测序的方法，通过利用M蛋白的固有生物标志从血浆中鉴定克隆型肽。方法单克隆抗体加标样本和患者队列被用于验证克隆型肽的选择，并以已知抗体和骨髓RNA序列为基准。结果克隆型肽从多克隆背景中富集约1,000倍，使23例不同M蛋白水平和同种型的患者能够可靠地鉴定。在单克隆抗体加标样本的系列稀释实验中，选定的克隆型肽在1–4 mg/L浓度下仍可检测到（idotp ≥ 0.9）。19例患者的纵向跟踪显示，其趋势与传统检测方法总体一致，但有4例患者呈现不一致的轨迹。结论MyeloTrak支持通过利用M蛋白的固有生物标志直接从血浆中鉴定患者特异性克隆型肽的可行性。由于其发现流程不需要骨髓RNA或全长免疫球蛋白测序，显著降低了基于血液的残余M蛋白监测的复杂性。图形摘要