《Current Microbiology》：Molecular Characterization of Feline Leukemia Virus from Cats in Shelters in the Metropolitan Region of Recife, Pernambuco, Northeast Brazil
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本研究旨在对巴西伯南布哥州累西腓大都市区收容所猫的猫白血病病毒（FeLV）感染进行流行病学-分子研究。研究人员分析了来自MRR内5个市镇18个收容所的260只猫的血样。对外周血DNA样本进行聚合酶链反应（PCR）以检测FeLV前病毒DNA。PCR阳性样本经测序
本研究旨在对巴西伯南布哥州累西腓大都市区收容所猫的猫白血病病毒（FeLV）感染进行流行病学-分子研究。研究人员分析了来自MRR内5个市镇18个收容所的260只猫的血样。对外周血DNA样本进行聚合酶链反应（PCR）以检测FeLV前病毒DNA。PCR阳性样本经测序并使用BLAST软件进行系统发育树分析。猫的感染流行率为9.6%（25/260）。在18个抽样收容所中，33.3%（6/18）有FeLV阳性猫。观察到60%（3/5）的调查市镇有FeLV阳性的猫科动物。在阳性猫中，雄性占52%（13/25），雌性占48%（12/25）。在22个测序样本中，18个序列被用作在线BLAST搜索的查询序列以构建数据集。本研究在伯南布哥州具有开创性，证明了累西腓大都市区收容所猫科动物中FeLV感染的流行率。基于这些结果，研究人员建议在研究区域内任何有户外活动的猫都应接种疫苗。了解伯南布哥州的FeLV流行率有助于了解当地情况，并帮助制定MRR猫收容所有效的卫生防疫计划，从而提高负责任养宠意识并减少社区猫科动物间的FeLV传播。
研究背景与目的
猫白血病病毒（Feline Leukemia Virus, FeLV）是一种全球分布的逆转录病毒，属于γ逆转录病毒属，可导致猫出现血液学异常、免疫抑制和肿瘤等多方面病理变化，显著影响家猫和野生猫科动物的寿命。病毒主要通过唾液和体液（如乳汁、尿液、粪便）的直接接触以及输血传播，尤其在群居猫中，通过咬伤、梳理或共用污染物传播的风险更高。收容所中的猫群因持续接触和高感染压力，增加了传染病风险。FeLV主要分为四个亚群：FeLV-A（优势毒株，致病性较弱）、FeLV-B（与造血系统肿瘤相关）、FeLV-C（与非再生性贫血相关）和FeLV-T（导致T淋巴细胞严重免疫抑制）。尽管北美、南美、亚洲、非洲、大洋洲和欧洲等地已有FeLV流行率数据，但对病毒亚群的研究仍然较少。在巴西，FeLV流行率研究显示出较大的地域差异，且仅在少数州开展过相关调查。因此，研究人员旨在通过检测前病毒DNA确定巴西伯南布哥州累西腓大都市区猫群中FeLV的感染流行率，并对阳性样本进行分子鉴定，明确循环的病毒亚群及其系统发育关系。
研究方法与技术路线
研究人员从累西腓大都市区的5个市镇（累西腓、奥林达、保利斯塔、卡马拉吉贝、雅博阿唐-杜斯瓜拉拉皮斯）的18个收容所中采集了260只未接种疫苗且年龄超过六个月的猫的外周全血样本。采用商业试剂盒提取DNA，并针对FeLV外源性病毒所有亚型共有的gag基因序列设计引物进行常规PCR扩增，产物大小为450 bp。阳性扩增产物经纯化后进行测序，共获得22条部分gag基因序列，其中18条高质量序列用于后续分析。研究人员利用BLAST在线搜索获取参考序列构建数据集，通过ModelFinder选择K2P+G4进化模型，并分别使用IQtree和MrBayes v.3.2.7a软件进行最大似然法和贝叶斯推断法构建系统发育树。贝叶斯分析在CIPRES科学网关平台上运行，设置马尔可夫链蒙特卡洛链运行5000万代，老化期为125万代，采样间隔为1000代，并通过Tracer软件评估链收敛性。
研究结果
FeLV感染的流行率
研究人员通过PCR检测发现，累西腓大都市区猫群中FeLV前病毒DNA的总体流行率为9.6%（25/260）。在18个收容所中，33.3%（6/18）检出阳性猫；在5个市镇中，60%（3/5）有阳性猫只。在阳性个体中，雄性占52%（13/25），雌性占48%（12/25）。
系统发育分析
基于gag基因的系统发育树显示两个主要分支，后验概率均为99%。第一个主要分支包含研究中17条序列以及1条对应于FeLV-A亚群的参考序列。第二个主要分支包含研究中1条序列（样本178）以及9条参考序列，其中8条属于FeLV-A亚群，1条为未分类FeLV。样本178与哥伦比亚分离株MT229942.1的相似性达95%，表明其属于同一分组。其余研究序列虽表现出不同程度的相似性，但未在遗传数据库中匹配到高度同源的已知序列，提示可能存在物种形成或新的变异。
讨论与结论
本研究表明，伯南布哥州的FeLV流行率（9.6%）高于巴西东北部其他州（巴伊亚州3%、马拉尼昂州5%、塞阿拉州5.8%），也高于北美（3.1%）、大洋洲（1%）和欧洲（3.4%）的报道。这种差异可能归因于地理区域、宠物主人教育水平、疫苗接种实践、经济条件、管理方式、诊断技术以及抽样群体密度等因素。值得注意的是，收容所的高密度环境促进了病毒传播，这与其他在高密度环境中进行的研究结果一致。关于性别分布，阳性猫中雄性与雌性比例相近，但鉴于收容所猫只来源和病史不明，此结果需谨慎解读。此外，与某些研究不同，本研究中收容所的种群密度并未显著影响流行率，表明卫生管理和感染压力可能是更重要的局部影响因素。
研究结论：本研究在伯南布哥州具有开创性，证实了累西腓大都市区收容所猫科动物中存在FeLV感染，并主要鉴定出FeLV-A亚群的循环，同时提示可能存在FeLV变异的物种形成。研究结果强调了检测以识别感染猫的重要性，并为兽医在猫收容所制定治疗和疫苗接种计划提供了数据支持，有助于减少社区猫群间FeLV的传播。
