血浆磷酸化Tau181生物标志物在多种前分析及储存条件下的检测稳定性评估

《Alzheimer's Research & Therapy》：A prospective observational study measuring the stability of plasma pTau181 using the Elecsys Phospho-Tau (181P) plasma immunoassay for early detection of Alzheimer’s disease

　　

摘要

背景

血浆中在苏氨酸181位点磷酸化的tau蛋白（pTau181）是一个关键的血液生物标志物，与阿尔茨海默病（AD）中淀粉样蛋白（Aβ）病理负担相关。Elecsys^? 磷酸化Tau蛋白（181P）血浆（pT181p）免疫分析试剂盒（Roche Diagnostics International Ltd，瑞士Rotkreuz）旨在用于辅助早期检测≥55岁出现认知功能下降症状的成年人中的Aβ病理，已获得欧盟CE标志认证并获美国FDA批准用于临床应用。在此，我们评估了使用pT181p免疫分析试剂盒测量血浆pTau181在不同前分析和储存条件下的稳定性，样本来源于目标使用人群。

方法

收集了在LMU医院就诊的个体（症状严重程度从主观认知下降至中度AD痴呆）的全血样本，使用三种不同的采血管进行血浆制备（Li-肝素、K2-EDTA和K3-EDTA）。样本在冷藏（未冷冻）条件下运送至检测地点，并在采集后6小时内完成处理。血浆样本在不同温度下储存不同时长，并评估其对血浆pTau181回收率的影响。

结果

在初始队列（n = 14）中观察到的不符合规格的结果（未达到预定义验收标准），经发现是由于白膜/红细胞污染所致。对前分析程序进行了修改，以防止离心后血浆转移过程中的污染。在另一个独立队列（n = 10）的样本中，未观察到不稳定现象，且满足验收标准。在考虑安全边际后，所有样本类型的分析物稳定性确定为：25°C下2天，4°C下7天，-20°C下12周，-80°C下16周；一次冻融循环后也观察到稳定性。

结论

pT181p免疫分析试剂盒的测量结果在不同样本处理程序和储存条件下均表现出稳定和稳健性。这些发现支持将该检测方法应用于常规非专科医疗环境，以便通过实用的血液检测来排除与AD相关的Aβ病理。