重组EgAgB8/2通过抑制cGAS/STING/TBK1/IRF3信号通路促进M2巨噬细胞极化减轻心肌缺血-再灌注损伤

《Parasites & Vectors》：Echinococcus granulosus antigen B regulates the macrophage cGAS–STING pathway to mitigate myocardial ischemia–reperfusion injury

　　

摘要

背景

心肌缺血-再灌注（IR）损伤是心肌梗死患者在冠状动脉血流恢复后出现的一种关键并发症。细粒棘球绦虫囊液蛋白抗原B（EgAgB）已知能够调节宿主免疫反应。本研究探讨重组抗原B亚基2（rEgAgB8/2）是否能够通过抑制炎症和促进心肌组织修复来减轻IR损伤。

方法

通过结扎左前降支（LAD）冠状动脉1小时，随后进行24小时再灌注，建立IR损伤模型。在再灌注开始时腹腔注射大肠杆菌表达的重组EgAgB8/2蛋白，以评估其治疗潜力。再灌注24小时后，采用超声心动图、TTC/伊文思蓝染色和组织病理学分析评估心功能及损伤情况。分别采用ELISA和RT-qPCR定量检测血清和心肌组织中的细胞因子（TNF-α、IL-6、IL-10和TGF-β）蛋白和mRNA水平。体外研究中，采用ELISA检测骨髓来源巨噬细胞（BMDMs）培养上清中的细胞因子分泌情况。通过流式细胞术鉴定M1（CD86?）和M2（CD206?）表型的表面标记物来评估巨噬细胞极化情况。采用Western blot检测心肌组织和BMDMs中cGAS/STING/p-TBK1/p-IRF3信号通路蛋白的表达水平。

结果

rEgAgB8/2处理显著改善了IR损伤小鼠的心功能，降低了心肌损伤标志物（LDH、CK-MB）和梗死面积。与未治疗的IR对照组相比，rEgAgB8/2处理显著降低了血清和心肌组织中促炎细胞因子（TNF-α、IL-6和IL-1β）的水平，并下调了心肌组织中M1巨噬细胞标志物iNOS的表达。同时，它增加了血清和心肌组织中抗炎细胞因子（IL-10和TGF-β）的表达，并上调了心肌组织中M2巨噬细胞标志物Arg-1的表达。IR损伤心肌组织中炎症反应的减轻与向M2巨噬细胞表型的极化增强相关。体外研究进一步表明，rEgAgB8/2促进M2巨噬细胞极化，与cGAS/STING/TBK1/IRF3信号通路激活减少相关。

结论

rEgAgB8/2以与抑制cGAS/STING/TBK1/IRF3信号通路相关的方式促进巨噬细胞向M2表型极化，从而减轻心肌IR损伤及相关炎症。它为解决缺血-再灌注损伤及相关炎症性疾病提供了一种新型治疗策略。

图形摘要

背景

心肌缺血-再灌注（IR）损伤是心肌梗死患者在冠状动脉血流恢复后出现的一种关键并发症。细粒棘球绦虫囊液蛋白抗原B（EgAgB）已知能够调节宿主免疫反应。本研究探讨重组抗原B亚基2（rEgAgB8/2）是否能够通过抑制炎症和促进心肌组织修复来减轻IR损伤。

方法

通过结扎左前降支（LAD）冠状动脉1小时，随后进行24小时再灌注，建立IR损伤模型。在再灌注开始时腹腔注射大肠杆菌表达的重组EgAgB8/2蛋白，以评估其治疗潜力。再灌注24小时后，采用超声心动图、TTC/伊文思蓝染色和组织病理学分析评估心功能及损伤情况。分别采用ELISA和RT-qPCR定量检测血清和心肌组织中的细胞因子（TNF-α、IL-6、IL-10和TGF-β）蛋白和mRNA水平。体外研究中，采用ELISA检测骨髓来源巨噬细胞（BMDMs）培养上清中的细胞因子分泌情况。通过流式细胞术鉴定M1（CD86?）和M2（CD206?）表型的表面标记物来评估巨噬细胞极化情况。采用Western blot检测心肌组织和BMDMs中cGAS/STING/p-TBK1/p-IRF3信号通路蛋白的表达水平。

结果

rEgAgB8/2处理显著改善了IR损伤小鼠的心功能，降低了心肌损伤标志物（LDH、CK-MB）和梗死面积。与未治疗的IR对照组相比，rEgAgB8/2处理显著降低了血清和心肌组织中促炎细胞因子（TNF-α、IL-6和IL-1β）的水平，并下调了心肌组织中M1巨噬细胞标志物iNOS的表达。同时，它增加了血清和心肌组织中抗炎细胞因子（IL-10和TGF-β）的表达，并上调了心肌组织中M2巨噬细胞标志物Arg-1的表达。IR损伤心肌组织中炎症反应的减轻与向M2巨噬细胞表型的极化增强相关。体外研究进一步表明，rEgAgB8/2促进M2巨噬细胞极化，与cGAS/STING/TBK1/IRF3信号通路激活减少相关。

结论

rEgAgB8/2以与抑制cGAS/STING/TBK1/IRF3信号通路相关的方式促进巨噬细胞向M2表型极化，从而减轻心肌IR损伤及相关炎症。它为解决缺血-再灌注损伤及相关炎症性疾病提供了一种新型治疗策略。

图形摘要