紫音化丹方通过下调PLAG1介导的VEGF-C/VEGFR-3信号通路抑制胃癌淋巴结转移

《Chinese Journal of Integrative Medicine》：Ziyin Huatan Recipe Inhibits Lymph Node Metastasis in Gastric Cancer via Downregulating PLAG1-Mediated VEGF-C/VEGFR-3 Signaling

　　

摘要

目的

探讨紫茵化痰方（ZYHT）对胃癌（GC）的抗淋巴管生成及抗转移作用，并阐明其潜在分子机制，重点聚焦多形性腺瘤基因1（PLAG1）/血管内皮生长因子C（VEGF-C）/血管内皮生长因子受体3（VEGFR-3）信号轴。

方法

采用UHPLC-Q-TOF-MS对ZYHT进行质量控制，并选取3个剂量（50、100、200 μg/mL）。使用人胃癌MGC-803细胞和人淋巴内皮细胞（HLECs）。分别通过管形成实验、Transwell实验及FITC-右旋糖酐通透性测定评估淋巴管生成、迁移和通透性。采用ELISA法检测分泌的VEGF-C。体内实验中，将MGC-803细胞注射于裸鼠足垫建立腘窝淋巴结转移模型，随后连续3周灌胃给予ZYHT（940、1,880、3,760 mg•kg^?1•d^?1）。通过RNA测序和生物信息学分析鉴定差异表达基因（DEGs）及通路。利用慢病毒转导建立PLAG1改造细胞。通过CCK-8法、集落形成实验和Western blot检测增殖及VEGF-C/VEGFR-3信号相关蛋白表达。采用双荧光素酶报告基因实验验证PLAG1驱动的VEGF-C转录。

结果

ZYHT在体外和体内均能有效抑制胃癌淋巴结转移。此外，ZYHT还能抑制VEGF-C/VEGFR-3的活性。转录组分析显示ZYHT处理后共有7,739个差异表达基因。进一步发现PLAG1是参与胃癌淋巴结转移的关键转录因子，其通过调控VEGF-C/VEGFR-3通路发挥作用。

结论

ZYHT是一种有效的复方制剂，可通过下调PLAG1介导的VEGF-C/VEGFR-3信号通路抑制胃癌淋巴结转移。此外，PLAG1可能通过调控VEGF-C/VEGFR-3通路在胃癌转移过程中作为重要生物标志物。