TROP2高表达在EBV阳性胃癌中的普遍性：TROP2靶向抗体药物偶联物（ADC）的潜在适用人群

《Langenbeck's Archives of Surgery》：High prevalence of TROP2 expression identifies EBV-positive gastric cancer as a candidate for TROP2-directed antibody–drug conjugates

　　

摘要 目的：滋养层细胞表面抗原2（TROP2）是一种在上皮肿瘤细胞上表达的糖蛋白，因此是抗体药物偶联物（ADC）的既定靶点。EB病毒（EBV）阳性胃癌是一种分子特征独特的亚型，以独特的免疫学特征为特点，包括对免疫检查点抑制剂（ICIs）的频繁应答。然而，部分此类患者未能从ICI治疗中获益，留下了对非免疫治疗方案的未满足需求。缺乏TROP2的肿瘤对TROP2靶向ADC无应答。研究人员因此评估了胃癌（包括EBV阳性亚型）中TROP2表达的普遍性，该亚型迄今尚未被表征。 方法：研究人员通过免疫组织化学方法评估了525例胃癌患者的TROP2表达，这些患者按照TCGA分子亚型分类，是迄今为止评估TROP2的最大规模高加索人群队列。 结果：TROP2表达在不同分子亚型间存在显著差异（p < 0.01），其中EBV阳性肿瘤显示出最高的中位表达（H-score 150）。与治疗失败相关的TROP2完全缺失仅在3.7%的EBV阳性肿瘤中观察到，而染色体不稳定（CIN）型为18.8%，基因组稳定（GS）型为25.4%，微卫星不稳定（MSI）型为36.2%。 结论：因此，几乎所有EBV阳性胃癌均以与ADC靶向相容的水平表达TROP2。这些发现将TROP2确定为EBV阳性胃癌的一个靶点，并为在这一分子定义的群体中开展TROP2靶向ADC的临床研究提供了理论依据，特别是作为ICI治疗失败患者的非免疫治疗选择。

论文解读：TROP2在EBV阳性胃癌中的高表达及其作为抗体药物偶联物靶点的临床意义

一、研究背景与科学问题

胃癌是全球第五大常见恶性肿瘤，也是癌症相关死亡的第三大原因。尽管多模式治疗策略不断优化，晚期或复发性胃癌患者的中位总生存期仍局限在13至20个月。癌症基因组图谱（TCGA）计划通过分子分型将胃腺癌划分为四种亚型：染色体不稳定型（CIN）、微卫星不稳定型（MSI）、基因组稳定型（GS）和EB病毒阳性型（EBV）。这些分子分型推动了生物标志物导向的治疗策略发展，包括针对HER2的曲妥珠单抗、针对Claudin 18.2的佐贝妥昔单抗，以及免疫检查点抑制剂（ICIs）的应用。然而，现有方案的客观缓解率仍仅为40%至60%，中位无进展生存期仅为6.9至10.5个月，提示持续存在未满足的治疗需求。

EBV阳性胃癌约占全球胃癌的5%至10%，每年新发病例估计约8万例，是EBV相关肿瘤中发病率最高的类型。该亚型具有独特的临床病理特征，包括好发于近端胃、男性居多、发病年龄较轻（<60岁）以及复发性体细胞突变。在表观遗传层面，EBV阳性胃癌表现出实体肿瘤中最广泛的DNA超甲基化模式。然而，尽管具有这些侵袭性分子特征，EBV阳性胃癌的预后相对较好，淋巴结转移频率显著低于EBV阴性肿瘤，这主要归因于其高度免疫原性的肿瘤微环境。

滋养层细胞表面抗原2（TROP2）由肿瘤相关钙信号转导子2（TACSTD2）基因编码，已成为多种上皮恶性肿瘤的治疗靶点。TROP2是一种36-kDa的I型跨膜糖蛋白，作为钙信号转导子调节多种致癌信号通路。在胃腺癌中，约56%的病例观察到TROP2过表达，且其是疾病复发的独立不良预后标志物。然而，TROP2在EBV阳性这一特定分子亚型中的表达模式、预后意义和治疗相关性此前尚未被表征。鉴于TROP2表达本身决定ADC疗效，完全缺乏TROP2的肿瘤对TROP2靶向ADC无应答，因此明确TROP2缺失的普遍性对于确定适合TROP2靶向ADC治疗的患者比例至关重要。

二、研究设计与核心发现

研究人员开展了一项回顾性、单中心分析，纳入1997年至2016年间在德国科隆大学医院确诊的737例胃腺癌患者。根据TCGA框架，将患者分为四种分子亚型：CIN型（n=397）、GS型（n=61）、MSI型（n=47）和EBV阳性型（n=27）。研究结果显示，TROP2表达在不同分子亚型间存在显著差异（p<0.01），EBV阳性肿瘤的中位H-score最高（150），其次为CIN型（70）、GS型（70）和MSI型（30）。值得注意的是，TROP2完全缺失在EBV阳性肿瘤中仅占3.7%，而MSI型为36.2%，GS型为26.2%，CIN型为19.1%。在独立TCGA队列中，TACSTD2 mRNA表达模式在mRNA水平上重现了免疫组化结果，EBV阳性肿瘤在最高表达四分位数中富集。这一发现将TROP2确定为EBV阳性胃癌的治疗靶点，为在这一分子定义的群体中开展TROP2靶向ADC的临床研究提供了理论依据，特别是作为ICI治疗失败患者的非免疫治疗选择。

三、关键技术方法

研究采用免疫组织化学（IHC）方法，使用BOND-MAX自动化染色系统评估膜性TROP2蛋白表达，以H-score评分系统进行量化。EBV状态通过EBER原位杂交（CISH）确定，MSI状态通过错配修复蛋白（MLH1、MSH2、MSH6、PMS2）免疫组化评估。分子分型依据TCGA框架，在排除EBV阳性和dMMR/MSI后，基于既有分子谱数据区分CIN和GS亚型。验证队列来自TCGA-STAD公开数据库（n=360，EBV阳性n=30），分析TACSTD2 mRNA表达。统计分析采用Kruskal-Wallis检验、Dunn事后检验、Pearson卡方检验和Kaplan-Meier生存分析。

四、研究结果

临床病理特征：共纳入737例胃腺癌患者，中位诊断年龄65岁，67.7%为男性。肿瘤最常见于胃食管连接部（36.3%），其次为胃体（26.3%）和远端胃（22.0%）。EBV阳性肿瘤以男性为主（81.5%），且年龄<65岁的比例更高（66.7%）。

TCGA分子亚型分布与膜性TROP2表达：CIN为优势亚型（74.6%），其次为GS（11.5%）、MSI-H（8.8%）和EBV阳性（5.1%）。TROP2表达在不同分子亚型间差异显著（p<0.01），EBV阳性肿瘤中位H-score最高（150），且TROP2完全缺失率最低（3.7%），而MSI-H型缺失率最高（36.2%）。

TCGA队列中TACSTD2表达的验证：在TCGA-STAD队列中，TACSTD2 mRNA表达在不同亚型间差异显著（Kruskal-Wallis p=7.7×10??），EBV阳性肿瘤中位表达最高，半数（15/30）位于最高表达四分位数，EBV阳性的优势比（OR）为3.44（95% CI，1.49–7.96；p=0.002）。

全队列TROP2表达与总生存期的关联：TROP2高表达肿瘤患者中位OS为25.0个月，低于TROP2低表达组的32.0个月，但差异未达统计学显著（log-rank p=0.09）。

按TCGA分子亚型分层的总生存期：不同亚型间OS差异显著（log-rank p=0.005），MSI-H型中位OS最长（59个月），GS型最短（13个月），EBV阳性型为18个月。

EBV阳性肿瘤中TROP2表达与总生存期的探索性分析：在EBV阳性亚组中（n=18），TROP2表达与OS无显著关联（p=0.123），但该分析因样本量小属探索性，需谨慎解读。

五、讨论与结论

研究讨论指出，TROP2在胃癌中的临床意义主要在于其作为治疗靶点的角色，而非预后标志物。EBV阳性肿瘤中TROP2阳性率达96.3%，使该亚型成为TROP2靶向ADC的候选人群。TROP2靶向ADC（如Sacituzumab Govitecan和Datopotamab deruxtecan）通过递送拓扑异构酶I抑制剂载荷发挥抗肿瘤活性，并通过旁观者杀伤效应扩展至抗原阴性肿瘤细胞。此外，TROP2靶向ADC可诱导免疫原性细胞死亡（ICD），释放损伤相关分子模式（DAMPs），可能与该亚型预先存在的免疫许可微环境产生协同效应。研究提出两个互补的临床应用场景：近期而言，TROP2靶向ADC可作为ICI治疗失败患者的非免疫治疗选择；长期而言，ADC诱导ICD的能力为与检查点阻断联合治疗提供了理论依据。研究局限性包括回顾性单中心设计、EBV阳性亚组样本量小（n=27）、TCGA验证基于bulk mRNA表达无法反映膜性蛋白定位，以及H-score 100的截断值尚未在ADC患者筛选中得到验证。研究结论认为，这些发现支持跨分子亚型评估TROP2表达，为在EBV阳性胃癌中研究TROP2靶向ADC提供了理论依据，特别是在ICI治疗失败患者中，以及长期来看与检查点阻断的联合应用。前瞻性、多中心研究需进一步验证这些观察结果，并确定TROP2表达在该分子定义人群中是否具有ADC治疗预测价值。