犬眼睑肿瘤细胞减灭术联合冷冻手术的临床转归与组织病理学特征

《The Veterinary Journal》：Cytoreduction combined with cryosurgery for the treatment of eyelid neoplasms in dogs: Clinical outcomes and histopathological characterization

　　

细胞减灭术（cytoreduction）联合冷冻手术（cryosurgery）为犬眼睑肿瘤提供了一种快速的治疗手段。大多数术后临床体征在72小时内消退。黑色素瘤（melanoma）是最常诊断的恶性肿瘤（30%）。白斑病（leukoderma）和白毛症（leukotrichia）是可短暂存在的术后不良效应。

**论文解读：犬眼睑肿瘤的细胞减灭术联合冷冻手术——临床转归与组织病理学特征的系统评估**

**一、研究背景与目的**

眼睑、结膜、泪器及其相关腺体结构共同构成眼附属器区域，尽管不直接参与视觉功能，但对保护眼表具有不可替代的作用。眼睑区域包含三种特化腺体：开口于睫毛根部附近的Moll顶泌腺、引流至睫毛毛囊的Zeis皮脂腺，以及沿眼睑后缘、紧邻睫毛后方开口的睑板腺（Meibomian腺）。

眼睑肿瘤是犬类回顾性研究中报道频率最高的眶周肿瘤，可起源于上皮、间充质或圆细胞谱系。多数眼睑肿瘤为良性，生长缓慢，通常累及单眼。当肿瘤显著增大时，与角膜表面的物理接触可诱发眼部分泌物、结膜充血或角膜溃疡。犬眼睑肿瘤的组织学类型广泛，包括皮脂腺腺瘤、皮脂腺癌、皮脂腺上皮瘤、黑色素瘤、肥大细胞瘤、基底细胞瘤和组织细胞瘤等。

手术切除联合眼睑成形术被广泛认为是眼睑肿瘤管理的金标准，旨在实现肿瘤完全切除并保证切缘无肿瘤细胞。然而，对于小型、浅表、非侵袭性肿瘤，或因解剖限制或饲主偏好而无法进行根治性手术的情况，冷冻手术常作为替代方案。冷冻手术也可作为手术切除或细胞减灭后的辅助治疗，尤其当完全手术切缘难以实现或存在残余肿瘤组织时。冷冻破坏的机制依赖于快速冷冻过程中细胞内冰晶的形成，导致细胞膜、线粒体和内质网的不可逆损伤；缓慢解冻和重复冻融循环通过渗透失衡和膜失稳进一步促进组织破坏。

尽管冷冻手术在眼睑肿瘤治疗中具有重要临床价值，但关于细胞减灭术联合冷冻手术治疗犬眼睑肿瘤结局的前瞻性数据仍然有限。本研究旨在评估细胞减灭术联合冷冻手术治疗犬眼睑肿瘤的有效性，描述术前和术后眼科检查结果，表征肿瘤类型，识别相关的流行病学风险因素，并评估局部瘢痕变化。

**二、研究设计与技术方法**

研究人员在巴西佩洛塔斯联邦大学（Universidade Federal de Pelotas, UFPel）兽医教学医院及一家私人兽医诊所开展研究，纳入30只不同年龄、性别和品种的犬，每只犬均表现为单个眼睑病灶，共计30个病灶。纳入标准要求肿瘤不超过眼睑长度的三分之一，且术前检查（包括血液学和生化评估）确认所有患者适合麻醉和冷冻手术。

主要技术方法包括：标准化吸入麻醉方案（美沙酮术前用药、丙泊酚诱导、异氟醚维持）；在手术显微镜下使用11号手术刀片于肿瘤基底部做切口，行宏观细胞减灭（不追求肿瘤-free切缘），随后刮除残余腺体组织；使用Cryofast CT-909?接触式探头以CO?为冷冻剂，实施两次各25秒的冷冻-解冻循环，冷冻范围约3 mm直径，较大病灶采用多重重叠冷冻点覆盖；术后创面开放二期愈合。术后采用含新霉素、地塞米松和多黏菌素B的局部眼用溶液，联合全身使用安乃近和美洛昔康。患者通过照片和视频进行远程随访，术后7天进行现场复查，并至少随访6个月以监测复发。

组织病理学检查方面，所有样本立即置于10%中性缓冲福尔马林中固定，送UFPel兽医肿瘤服务中心（SOVET）进行分类。因细胞减灭技术的性质，未进行手术切缘评估。统计学分析采用Pearson卡方检验和Fisher精确检验，计算比值比（OR）和95%置信区间（CI）。

**三、主要研究结果**

**3.1 术前眼科评估：** 80%（24/30）的病例存在眼部分泌物，以II级为主；76.7%（23/30）出现结膜和/或巩膜充血，以I级为主，无III级病例；73.3%（22/30）出现睑痉挛，同样以I级为主。10%（3/30）的患者荧光素染色阳性，证实存在浅表角膜溃疡，经术前治疗后完全消退再行冷冻手术。

**3.2 术后眼科评估：** 术后眼部改变均为暂时性，大多数患者在3天内完全消退。结膜充血的消退，无任何眼科临床体征在术后第3天后持续存在。

**3.3 局部不良瘢痕表现：** 66.67%（20/30）的犬无白斑病；白斑病I级占20%（6/30）、II级占13.33%（4/30），无III级病例，所有白斑病在30天内完全消退。白毛症方面，56.67%（17/30）无此表现，36.67%（11/30）为I级，6.67%（2/30）为II级，无III级病例。

**3.4 组织病理学类型：** 黑色素瘤是最常见的诊断（30%；9/30）。鳞状细胞癌（SCC）和皮脂腺腺瘤各占16.7%（5/30）。皮脂腺上皮瘤占10%（3/30）。Bowenoid癌和乳头状瘤各占6.7%（2/30）。较少见的类型包括黑色素细胞瘤（3.3%）、肉瘤（3.3%）、睑板腺上皮瘤（3.3%）和睑板腺腺瘤（3.3%）。

**3.5 年龄和品种分布：** 患者平均年龄为9.8岁（范围3-16岁）。西施犬和混种犬频率最高，各占26.7%（8/30），其次为拉布拉多寻回犬（13.3%）。

**3.6 肿瘤复发：** 整个研究期间仅观察1例复发（3.3%），为黑色素瘤，在手术瘢痕边缘发现小结节，采用相同的细胞减灭联合冷冻手术技术成功再治疗，后续6个月随访无复发。

**3.7 统计分析：** 混种犬与恶性肿瘤之间存在显著关联（OR = 8.400；95% CI: 1.879–80.265；p = 0.043）。年龄≤10岁与术后3天及以上持续存在不良瘢痕体征（白斑病和/或白毛症）显著相关（OR = 8.750；95% CI: 1.397–54.799；p = 0.014）。

**四、讨论与结论**

讨论部分指出，本研究中43.3%的犬以眼睑结节为主诉就诊，多数饲主关注的是眼部其他改变。平均年龄9.8岁与文献报道一致，证实眼睑肿瘤主要影响中老年犬。黑色素瘤的高比例（30%）与北美和欧洲以睑板腺腺瘤为主的研究结果不同，可能反映了区域流行病学差异、转诊偏倚或品种分布差异。研究整体复发率（3.3%）低于Zibura等人报道的15.2%，可能与冷冻设备及冷冻时间的差异有关。白斑病作为冷冻手术公认的并发症，在本研究中为暂时性且30天内完全消退。讨论还提及冷冻消融可能具有免疫调节效应，但本研究未对此进行调查。研究局限性包括样本量较小（30只）和无手术切除对照组。

结论部分翻译如下：细胞减灭术联合冷冻手术似乎是管理犬眼睑肿瘤的一种安全有效的微创方法。在本研究中，该技术与低复发率、术后眼科体征的快速消退以及主要为轻度且自限性的局部不良改变相关。包括黑色素瘤、鳞状细胞癌和皮脂腺腺瘤在内的多种肿瘤类型均通过该方法得到成功管理。这些发现表明，该技术可能代表传统手术的可行替代方案，尤其适用于小型或浅表肿瘤，因为它能保留眼睑结构和功能。