超声辅助月桂精油纳米乳的制备、表征及其抗菌、抗生物膜、细胞毒性与促伤口愈合活性评价

《Gels》：Laurus nobilis Essential Oil Nanoemulsion as a Natural-Product Phase for Gel-Based Delivery: Antimicrobial, Antibiofilm, Cytotoxic and Wound-Closure Activities In Vitro

　　

摘要

Laurus nobilis L. 精油具有广泛的生物活性，但其差的水分散性、高挥发性和易氧化降解的特性限制了其在水相生物系统中的应用。本研究制备并表征了超声辅助月桂精油纳米乳（LNNO），并在同一实验框架内将其与未配方的精油进行了直接比较，评估其抗菌、抗生物膜、细胞毒性和伤口愈合反应。GC-MS分析鉴定出桉叶油醇（1,8-桉叶素；35.12%）为主要成分。LNNO的强度加权Z平均流体力学直径为77.10 nm（数量加权平均72.30 ± 0.5 nm；TEM 65.4 nm），PDI为0.231，表观Zeta电位为?31.10 mV，在60天的储存期内保持纳米尺度，未见明显的相分离。LNNO对六种受试微生物均表现出抑制作用（MIC 7.8–31.25 μg/mL），MIC值比纯精油低4至8倍，在MBC/MFC的75%浓度下，生物膜生物量减少高达96.80%（Bacillus subtilis）和96.63%（Candida albicans）；该浓度水平等于或超过MIC，而最少干扰的抗生物膜比较（25% MBC/MFC，低于MIC）仍显示45.28––72.45%的抑制率，纯精油为18.45–32.61%。在Caco-2结肠直肠腺癌细胞中，LNNO的MTT IC₅₀约为纯精油的一半（107.4与215 μg/mL），而正常HFB4成纤维细胞中的IC₅₀为368.81 μg/mL（选择性指数3.43）。在非细胞毒性浓度下，LNNO将HFB4单层细胞的划痕愈合率从28.4 ± 2.1%（未处理）和30.1 ± 2.4%（无油载体）提高至48小时的58.7 ± 3.2%（p < 0.001；n = 3次独立实验）。无油载体在所有实验中均无活性。在一项初步相容性实验中，LNNO在掺入卡波姆凝胶后仍保持纳米级分散性和抗菌活性，而空白凝胶无活性。综上所述，这些数据表明纳米乳化改善了月桂精油的体外测量反应，并为机制研究和后续体内评估提供了经过表征的平台。