哈萨克斯坦北部成人抗Toxocara spp. IgG血清流行率及潜在风险因素：基于ELISA与Western blot确认的横断面血清流行病学研究

《Life》：Seroprevalence of Anti-Toxocara IgG and Potential Risk Factors Among Adults in Northern Kazakhstan

人类弓蛔虫病（human toxocariasis）是由Toxocara属线虫引起的全球分布人兽共患病，但哈萨克斯坦的流行病学数据仍稀缺。本研究旨在估计哈萨克斯坦北部成人抗Toxocara抗体血清流行率并评估潜在风险因素。一项横断面血清流行病学研究纳入Pavlodar和North Kazakhstan地区1000名成人居民（每区500名）。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）和免疫印迹法（Western blot，WB）检测血清抗Toxocara spp. IgG抗体。ELISA在102名（10.2%；95% CI：8.5–12.2%）中检出抗体，WB在93名（9.3%；95% CI：7.7–11.3%）中检出。ELISA与WB一致率为99.1%（Cohen’s κ = 0.949；95% CI：0.916–0.982；p < 0.001）。Pavlodar血清流行率为10.0%（50/500），North Kazakhstan为8.6%（43/500）（p = 0.514；OR = 1.18；95% CI：0.77–1.81）。单因素分析未发现血清阳性与年龄、性别、居住地（城市/农村）或所考察的任何潜在风险因素存在统计学显著关联。这些发现表明哈萨克斯坦北部人群存在Toxocara spp.暴露，并支持在血清流行病学调查中使用两种方法（ELISA和WB）。有必要开展地理覆盖更广的研究。

论文主体解读

研究背景与目的：弓蛔虫病（toxocariasis，由Toxocara canis和Toxocara cati线虫引起的人兽共患病）呈全球分布，近年被视为最被低估的人类寄生虫感染之一；全球血清流行率估计为19%，亚洲、非洲和拉丁美洲部分国家超过30%，儿童、农村居民、低社会经济地位及与狗频繁接触者感染率较高。犬猫为主要宿主并向环境排虫卵，人主要经口摄入污染土壤、水、食物、环境物体或接触动物毛上的感染性虫卵；生/半熟肉和动物内脏、卫生条件及环境接触可能参与流行病学。幼虫在人体移行可致内脏、眼、神经或隐匿型弓蛔虫病，常无症状；人非终宿主，不排虫卵，常规寄生虫学检查价值有限，因此抗Toxocara spp. IgG（免疫球蛋白G，提示暴露的血清学标志）检测重要，ELISA（酶联免疫吸附试验，抗体筛查方法）和WB（Western blot，免疫印迹法，抗体确认方法）最常用，但IgG仅提示暴露，不等同于现症感染。哈萨克斯坦数据有限：东部调查显示人11%、犬2%血清阳性；北部成人缺乏大规模研究；同时需要评估国产ELISA与WB的诊断性能。因此研究人员开展北部两区成人血清流行率及潜在风险因素初步分析。

关键技术与样本来源：采用横断面血清流行病学设计，2025年1月—2026年4月纳入Pavlodar和North Kazakhstan地区≥18岁成人1000名（每区500名），由总统事务管理局医疗中心“卫生流行病学鉴定中心”人员在门诊连续自愿招募；Pavlodar样本采集于2025年10—11月，North Kazakhstan于2026年3—4月。用标准化问卷收集人口学、动物饲养、水源、dacha（季节性乡间别墅带园地）、渔猎及生食蔬菜/生肉等信息。血清用自研ELISA筛查，以阴性对照平均OD+0.200为cut-off；商业WB确认，24和35 kDa两条带同时阳性判为阳性。统计用SPSS 31和Excel，计算率、95% CI（置信区间）、OR（比值比）、PPA/NPA/OPA及Cohen’s κ（方法间一致性统计量），并行McNemar检验。

研究结果：
3.1 研究人群特征（Characteristics of the Study Population）：1000名参与者中女733（73.3%）、男267（26.7%）；城市755（75.5%）、农村245（24.5%），3人居住信息缺失；Pavlodar城市488/农村12，North城市267/农村233；549（54.9%）养动物，猫424（42.4%）、狗318（31.8%）、其他207（20.7%）；North养动物76.4%高于Pavlodar33.4%；自来水850（85.0%），开放水体194（19.4%），North开放水体30.2%高于Pavlodar8.6%；dacha 59（5.9%）、钓鱼81（8.1%）、狩猎19（1.9%）。基于问卷描述，研究人群在流行病学相关特征上呈明显异质性。
3.2 ELISA筛查结果及地区分布（ELISA Screening Results and Regional Distribution）：ELISA检出102/1000，总血清流行率10.2%（95% CI 8.5–12.2）；Pavlodar 11.0%（8.5–14.0），North 9.4%（7.1–12.2）。ELISA筛查显示两区均有抗体阳性者。
3.3 WB确认与最终血清流行率（Western Blot Confirmation and Final Seroprevalence）：所有样本均经WB检测，确认93/1000阳性，最终血清流行率9.3%（95% CI 7.7–11.3）；Pavlodar 10.0%（50/500），North 8.6%（43/500），差异无统计学意义（p=0.514；OR=1.18；95% CI 0.77–1.81）。以WB为参考，ELISA灵敏度100.0%（96.1–100.0）、特异度99.0%（98.1–99.5）、PPV（阳性预测值）91.2%（83.9–95.9）、NPV（阴性预测值）100.0%（99.6–100.0）、总准确度99.1%（98.3–99.6）；ELISA与WB一致率99.1%，κ=0.949（95% CI 0.916–0.982；p<0.001）；McNemar检验p=0.0039，9例不一致均为ELISA阳性/WB阴性，无ELISA阴性/WB阳性；原文认为可能与方法差异或交叉反应有关，但因未做交叉反应和滴度检测不能确定原因，应视为相对WB的假阳性。WB确认结果表明两区人群存在Toxocara spp.暴露。
3.4 年龄组和性别血清流行率（Seroprevalence by Age Group and Sex）：按年龄分层，最高为30–44岁10.7%（29/271），18–29岁10.6%（12/113），≥75岁9.5%（4/42），45–59岁和60–74岁均8.4%（27/323；21/251），组间无显著差异（p=0.833）。女性63/733（8.6%），男性30/267（11.2%），男性高2.6个百分点，但无显著差异（p=0.203）。分层分析未显示血清阳性与年龄或性别显著相关。
3.5 居住地血清流行率（Seroprevalence by Place of Residence）：合并样本城市67/755（8.9%），农村26/245（10.6%），农村高1.7个百分点，但无显著关联（p=0.416）。原文指出North Kazakhstan农村居民阳性比例较高，值得在考虑混杂因素后进一步评估居住地。
3.6 合并样本中Toxocara spp.血清阳性与风险因素的关联（Association Between Toxocara spp. Seropositivity and Risk Factors in the Combined Sample）：采用单因素2×2分析，未发现任何所考察因素与WB确认血清阳性有统计学显著未校正关联（均p>0.05）。养狗9.4%（30/318）vs 9.2%（63/682），OR=1.02（0.65–1.62；p=0.921）；养猫9.0%（38/424）vs 9.5%（55/576），OR=0.93（0.60–1.44；p=0.752）；接触其他动物7.7%（16/207）vs 9.7%（77/793），OR=0.78（0.44–1.37；p=0.382）；dacha 6.8%（4/59）vs 9.5%（89/941），OR=0.70（0.25–1.97；p=0.492）；钓鱼9.9%（8/81）vs 9.2%（85/919），OR=1.08（0.50–2.31；p=0.852）；狩猎0/19 vs 9.5%（93/981），OR=0.24（0.01–4.07；p=0.246），样本小、精度有限，不能作出有无关联的可靠结论；自来水9.2%（78/850）vs 10.0%（15/150），OR=0.91（0.51–1.63；p=0.749）；开放水体9.8%（19/194）vs 9.2%（74/806），OR=1.07（0.63–1.83；p=0.792）；未洗蔬菜9.6%（10/104）vs 9.3%（83/896），OR=1.04（0.52–2.08；p=0.907）；生肉11.3%（6/53）vs 9.2%（87/947），OR=1.26（0.52–3.04；p=0.624）。原文强调无统计学显著不能解释为无关联，部分暴露样本少、CI宽。

讨论部分总结：本研究为首批在北部两区成人中联合ELISA–WB并分析潜在风险因素的综合评估之一。WB确认9.3%提示部分人群有暴露，但IgG不能确定感染时间、活幼虫或活动临床弓蛔虫病。该值在国际范围内，高于美国5.1%、意大利8%、西班牙1%，低于希腊16.0%、越南13.80%、中国12.10%；直接比较受人群、年龄结构、选择、抗原、cut-off和确认试验差异限制。与哈萨克斯坦既往研究比较：Torgerson et al.在东部3126名农村居民中报告11%，儿童及用狗粪施园土者更高；Davlyatshin et al.在Uralsk报告1000名成人中11.6%，但用实验性ELISA，本研究以WB确认，故不可直接比较。自研ELISA与WB一致性高（κ=0.949），但其对WB的灵敏度/特异度反映方法间一致性，不等于最终临床性能；WB也有局限，血清学不能可靠区分既往与活动感染。两区差异不显著不应解释为暴露相等；Pavlodar采样于2025年10–11月、North于2026年3–4月，地区与时间完全重合，不能独立评估地理和季节/时间效应，区域结果应视为两个不同时期调查样本的特征。年龄、性别、居住地及风险因素单因素均无显著关联；男性和农村稍高与国际方向一致但未达显著，阳性数少限制统计效能。生肉（OR=1.26）和开放水体（OR=1.07）方向与国际数据一致但CI宽；单纯养狗（OR=1.02）或养猫（OR=0.93）几乎无影响，原文提示具体接触条件可能比宠物拥有更重要。局限性包括自愿招募致选择偏倚、女性占73.3%、非随机样本代表性有限、两区采样期不重叠、问卷缺失、未做交叉反应和滴度检测；需概率抽样、性别年龄更均衡、同步调查、更详细暴露测量和更大样本。

研究结论（翻译）：本研究首次使用ELISA–WB血清学算法评估Pavlodar和North Kazakhstan地区成人居民抗Toxocara spp.抗体血清流行率。确认血清流行率为9.3%（93/1000；95% CI：7.7–11.3%），表明两个研究人群均有病原暴露的血清学证据。未发现统计学显著地区差异；但其解释受采样期不重叠限制。单因素分析未发现血清阳性与年龄、性别、居住地或所考察潜在风险因素有统计学显著关联。然而，缺乏统计学显著性并不排除所研究因素的可能影响，尤其对于罕见暴露且血清阳性参与者数量有限时。因此，所得数据尚不能可靠识别Toxocara spp.感染高风险组。样本代表性、血清学方法和暴露评估相关局限要求进一步开展地理覆盖更广、调查期同步并更详细研究潜在风险因素的研究。其结果可为在One Health框架下制定哈萨克斯坦弓蛔虫病流行病学监测和预防的针对性措施提供基础。