从渗出到诊断：FIP渗出液指数与细胞管块免疫组化在老年猫诊疗中的整合应用

《Animals》：From Effusion to Diagnosis: Integrating the FIP Effusion Index and Cell Tube Block Immunohistochemistry in a Geriatric Cat

　　

猫传染性腹膜炎（feline infectious peritonitis, FIP）在具有其他积液病因的老年猫中可能被忽视。一只患有甲状腺功能亢进和肥厚型心肌病表型的老年雌性家养短毛猫于2023年12月出现腹腔积液。初始积液总蛋白为5.46 g/dL，白蛋白/球蛋白比值（albumin-to-globulin ratio, A/G ratio）为0.48，Δ总核细胞比值（delta total nucleated cell ratio, ΔTNC）为60.58，由此回顾性计算的FIP渗出液指数（FIP Effusion Index）为126.2。冠状病毒逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测到猫冠状病毒（FCoV）RNA，且M1058L突变阳性，细胞管块免疫组化（cell tube block immunohistochemistry, CTB-IHC）显示巨噬细胞内有病毒抗原。在GS-441524治疗开始后9天，从少量残余腹腔积液中采集的第二个样本ΔTNC为2.15，FIP渗出液指数为7.17，尽管总蛋白浓度更高且白蛋白/球蛋白比值更低。GS-441524治疗于2023年12月20日开始，2024年3月22日结束。在1月25日的评估中，腹腔积液不再被检出。在2026年1月心肺失代偿死亡之前，未记录到确诊的FIP复发。本病例展示了FIP渗出液指数与CTB-IHC的互补贡献，以及FIP渗出液指数系列变化的探索性观察。阈值比较为回顾性。治疗期间观察到较低的指数，同时积液显著减少，但该观察并不能确立治疗效果或验证治疗监测。

论文解读：FIP渗出液指数与细胞管块免疫组化在老年猫诊断中的互补价值

猫传染性腹膜炎（feline infectious peritonitis, FIP）是由猫冠状病毒（feline coronavirus, FCoV）感染引起的系统性炎症性疾病，以单核/巨噬细胞参与、血管损伤和多灶性化脓性肉芽肿性炎症为特征。FIP常见于幼猫，但老年猫亦可发病。当老年猫同时患有其他可导致积液的疾病时，FIP的诊断容易被延误或忽视。积液标本相对易于获取，可用于生物化学、细胞学和病原学检测。自动化血液分析仪提供的Δ总核细胞比值（delta total nucleated cell ratio, ΔTNC）与积液白蛋白/球蛋白（albumin-to-globulin, A/G）比值结合构成FIP渗出液指数（FIP Effusion Index），可作为辅助诊断指标。细胞管块免疫组化（cell tube block immunohistochemistry, CTB-IHC）能够在细胞学标本上定位病毒抗原。本病例旨在探讨这两种方法在老年猫FIP诊断中的互补价值。

研究人员报告了一只14岁雌性家养短毛猫，患有甲状腺功能亢进和超声心动图证实的肥厚型心肌病表型，于2023年12月出现腹腔积液。初始积液分析显示总蛋白5.46 g/dL，A/G比值0.48，ΔTNC为60.58，计算出的FIP渗出液指数为126.2，远高于2024年提出的阈值7.54。FCoV RT-PCR检测到病毒RNA，M1058L突变阳性，CTB-IHC显示巨噬细胞胞浆内有FCoV抗原。开始GS-441524治疗9天后，从少量残余积液中采集的第二份样本ΔTNC降至2.15，FIP渗出液指数降至7.17，尽管该样本总蛋白浓度更高（8.14 g/dL）且A/G比值更低（0.30）。GS-441524（15 mg/kg，每日一次）治疗于2023年12月20日开始，持续约13周，至2024年3月22日结束。腹腔积液在治疗开始后36天（2024年1月25日）消失。在长期随访中，尽管有合并症的进展，但未记录到确诊的FIP复发；猫咪于2026年1月因心肺失代偿死亡，未进行尸检。

本研究使用的关键技术方法包括：使用Sysmex XN-1000V血液分析仪（Sysmex Corporation，日本神户）以全血模式分析积液，获取WDF通道和WNR通道的总核细胞计数并计算ΔTNC；按已发表方法计算FIP渗出液指数；积液生化检测采用Beckman Coulter AU680e分析仪；Rivalta试验采用醋酸沉淀法；细胞学采用May–Grünwald–Giemsa染色；细胞管块制备采用CEDIVET方案，离心后经毛细管浓缩并石蜡包埋；免疫组化使用VENTANA BenchMark ULTRA平台和抗FCoV单克隆抗体FIPV3-70；FCoV RT-PCR和突变分析由IDEXX Laboratories（西班牙巴塞罗那）完成；血清FCoV抗体检测采用商业ELISA。本病例为单例报告，无队列来源。

研究结果按病例展示小标题简述如下。

2.1 临床病史与初步评估：一只14岁雌性家养短毛猫，因腹腔积液就诊，合并甲亢和肥厚型心肌病表型。既往有呼吸困难及胸腔积液，曾被描述为非脓性渗出液。超声未见明显肿块，胸片示支气管间质型。腹水被再次分类为非脓性渗出液，促使进行FCoV检测。12月17日因积液增多行治疗性腹腔穿刺，抽出约250 mL液体。12月19日住院，血液学显示贫血和淋巴细胞减少。

2.2 积液生化与细胞学：初始积液为清亮至黄色液体，总蛋白5.46 g/dL，白蛋白1.78 g/dL，球蛋白3.68 g/dL，A/G比值0.48。Rivalta试验阳性。细胞学显示以活化巨噬细胞为主，伴有非变性中性粒细胞和少量成熟小淋巴细胞，蛋白性背景。未见微生物或肿瘤性细胞。该表型支持进一步FIP检查。

2.3 自动化细胞计数与FIP渗出液指数：Sysmex XN-1000V分析显示TNCC-WDF为7267 cells/μL，TNCC-WNR为120 cells/μL，ΔTNC为60.58。FIP渗出液指数按ΔTNC除以A/G比值计算，初始值为126.2。治疗开始后9天的第二份样本ΔTNC为2.15，A/G比值为0.30，FIP渗出液指数为7.17，落入2024年文献中“高度提示”范围（5.06–7.54）。但该指数为回顾性计算，且两个时间点不足以验证治疗监测。

2.4 分子分析与细胞管块免疫组化：FCoV RT-PCR检出FCoV RNA，M1058L突变阳性，S1060A阴性，实验室报告为FIPV生物型。血清FCoV抗体滴度≥1:12,800。CTB-IHC切片显示巨噬细胞-中性粒细胞性炎症，巨噬细胞胞浆内可见颗粒状FCoV免疫染色。这些结果支持渗出性FIP的诊断。

2.5 治疗与随访：GS-441524以15 mg/kg每日一次给药，自2023年12月20日开始，至2024年3月22日结束，约13周。治疗初期皮下注射，后因猫抵抗暂时改为口服，再改回皮下。同时使用糖皮质激素、镇痛和支持治疗。治疗开始后36天，超声评估未检出腹腔积液。1月20日红细胞比容恢复至37.1%，但淋巴细胞减少持续。血清电泳A/G比值从0.74逐步升至0.93（参考范围0.79–1.52），γ-球蛋白曾升高后波动。FCoV抗体滴度在随访期间波动，但无临床复发。后续出现体重下降，2024年10月复查血清α₁-酸性糖蛋白（α₁-acid glycoprotein, AGP）在参考范围内。2026年1月，猫因反复心搏骤停死亡，终末期血清A/G比值为0.7，未尸检，不能确认与FIP有关。

讨论部分总结如下：老年猫FIP诊断需结合积液表型和病原证据；Rivalta试验的敏感性和特异性有限；ΔTNC反映分析仪通道间不一致，而非病毒载量；不同平台之间ΔTNC数值不可互换；FIP渗出液指数阈值需要谨慎解释，不能作为治疗目标；RT-PCR和M1058L突变虽支持但不能确认FIP；CTB-IHC能将病毒抗原定位于炎性细胞，与渗出液指数互补；系列指数下降主要因ΔTNC降低，但单猫两时间点观察不能确立治疗效应或验证疗效监测。并发利尿剂和糖皮质激素治疗限制了对疗效的归因。长期无复发与治疗成功一致，但缺乏尸检证据。

研究结论翻译：在一只患有心脏和甲状腺疾病的老年猫中，初始显著升高的FIP渗出液指数与渗出性FIP一致，而CTB-IHC将FCoV抗原定位于巨噬细胞，补充了病毒RNA分子检测的发现。在GS-441524开始后9天，从少量残余腹腔积液获得的第二份样本中观察到较低的FIP渗出液指数，提供了一个值得进一步研究的探索性纵向观察。经GS-441524治疗后腹腔积液消退，长期随访中未记录到确诊的FIP复发。本病例凸显了整合常规积液分析、分析仪衍生参数和细胞FCoV抗原检测的多模式诊断价值。尽管FIP渗出液指数可能提供额外纵向信息，但其在监测治疗反应、定义缓解或指导治疗持续时间方面的作用仍有待确立。