采用三重PCR进行宿主特异性真菌靶标检测并同步开展EBV与HCMV检测

《Diagnostic Microbiology and Infectious Disease》:Host-specific fungal target detection by triplex PCR with contemporaneous EBV and HCMV testing

【字体: 大 中 小 】 时间:2026年10月25日 来源:Diagnostic Microbiology and Infectious Disease 1.8

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   •共描述了5,724次检测事件中全院的真菌三重实时PCR使用情况。•真菌靶标检测结果因病原体和宿主类别不同而有所差异。•艾滋病和器官移植与肺孢子菌检测相关。•HCMV的关联在多重性校正后不再具有统计学显著性。•仅凭分子检测无法确诊活动性真菌病。引言机会性真菌病是艾滋病患者、移

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    共描述了5,724次检测事件中全院的真菌三重实时PCR使用情况。
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    真菌靶标检测结果因病原体和宿主类别不同而有所差异。
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    艾滋病和器官移植与肺孢子菌检测相关。
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    HCMV的关联在多重性校正后不再具有统计学显著性。
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    仅凭分子检测无法确诊活动性真菌病。

引言

机会性真菌病是艾滋病患者、移植受者、恶性肿瘤患者以及接受免疫抑制治疗患者的发病和死亡的主要原因[1,2]。疾病谱因基础免疫缺陷的不同而异。肺孢子菌肺炎与细胞介导免疫受损密切相关,但也发生于非HIV感染的免疫抑制人群[3,4]。侵袭性曲霉病影响更广泛范围的免疫抑制和重症宿主[2],而隐球菌病仍然是艾滋病进展期患者的主要疾病负担[5]。潜伏疱疹病毒的再激活,包括EB病毒(EBV)和人巨细胞病毒(HCMV),也见于免疫抑制和重症患者中[6][7][8]。
分子检测可直接检测真菌和病毒DNA,但仅凭分子阳性结果并不能确立活动性感染。根据当代真菌病定义和诊断指南,分子结果必须结合宿主因素、临床和影像学特征、标本类型以及其他真菌学证据进行综合判断[9,10]。这一区分对于肺孢子菌尤为重要,因为它既可能在肺炎中检测到,也可能在肺部定植中被发现[11]。曲霉属在呼吸道标本中的检测意义同样取决于宿主状态和检测标本类型[10]。不同靶标的分子阳性结果不应被视为同等程度的疾病证据。
以往关于疱疹病毒检测与真菌检测结果关系的研究主要集中于特定高危人群,且所使用的临床终点异质性较大。在同种异基因造血干细胞移植受者中,移植后HCMV感染与侵袭性真菌感染相关[12]。这一关联可能反映了共同的免疫抑制状态、HCMV相关的免疫效应或其他临床复杂性的标志物[13]。在一项回顾性呼吸道队列研究中,EB病毒DNA在肺孢子菌肺炎患者和肺部定植患者中均被检出,其中EBV检出频率最高[14]。这些发现支持分别分析EBV和HCMV,但未能确立在常规临床实践中考虑宿主状态后,这两种病毒是否分别与真菌靶标检测相关。
因此,我们开展了一项单中心回顾性研究,包含两项互补分析。全院检测分析评估了真菌三重实时PCR检测的使用情况及检测事件层面的真菌靶标检出情况。患者层面的队列纳入了332例同时接受真菌、EBV和HCMV检测的成人患者,用于评估不同免疫抑制类别中至少一种真菌靶标的检出情况,分别评估EBV和HCMV DNA,并描述靶标特异性发现。

章节摘要

研究设计与伦理

我们在武汉大学中南医院开展了一项单中心回顾性观察性研究,使用2025年1月至2026年6月间常规收集的实验室数据和电子病历数据。研究内容包括全院真菌三重PCR检测事件分析,以及同时接受真菌、EB病毒(EBV)和HCMV DNA检测的成人患者层面的临床队列。武汉大学中南医院医学伦理委员会

全院检测与患者层面临床队列的构建

全院检测事件分析纳入了2025年1月至2026年6月间3,558例患者的5,724次真菌三重PCR检测事件。在真菌PCR检测前后7天内同时具有EBV和HCMV DNA结果的有358例患者的517次检测事件。在每例患者保留最早符合条件的真菌PCR检测事件后,排除了3名年龄小于18岁的患者和23名电子病历数据不完整无法进行计划分析的成人患者(358例匹配患者;355例成人

讨论

我们描述了全院真菌三重PCR的使用情况,并在一项332例同时具有EBV和HCMV DNA结果的患者层面临床队列中评估了真菌靶标的检出情况。检出情况因真菌靶标和宿主类别不同而有所差异:肺孢子菌在艾滋病或移植患者中检出最为频繁,而曲霉属则与其他免疫抑制状态相关。这些宿主特异性关联在敏感性分析中持续存在,尽管有28例

作者贡献

Yi Wang(王毅):概念设计、方法学、调查研究、数据整理、形式化分析、可视化、撰写—初稿、撰写—审阅与修改、项目管理。
Xin Jin(金鑫):调查研究、数据整理、方法学、撰写—审阅与修改。
Lihua He(何丽华):调查研究、数据整理、撰写—审阅与修改。
Na Gao(高娜):概念设计、方法学、监督指导、撰写—审阅与修改、项目管理。
Anling Li(李安玲):概念设计、方法学、监督指导,

伦理声明

作者未获得参与者或其法定代表人的知情同意。由于本研究的回顾性设计,武汉大学中南医院医学伦理委员会免除了知情同意的要求。
本研究遵循研究所在地的相关法律、监管框架和指南。
本研究已获得武汉大学中南医院医学伦理委员会批准。
(批准号:

CRediT作者贡献声明

Yi Wang(王毅):撰写—审阅与修改、撰写—初稿、可视化、项目管理、方法学、调查研究、形式化分析、数据整理、概念设计。Xin Jin(金鑫):撰写—审阅与修改、方法学、调查研究、数据整理。Lihua He(何丽华):撰写—审阅与修改、调查研究、数据整理。Na Gao(高娜):撰写—审阅与修改、监督指导、项目管理、方法学、概念设计。Anling Li(李安玲):撰写—审阅与修改、监督指导、项目
Yi Wang(王毅)| Xin Jin(金鑫)| Lihua He(何丽华)| Na Gao(高娜)| Anling Li(李安玲)

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