绵羊卵泡液细胞外囊泡改善卵母细胞成熟并表现出核糖体相关货物特征

《Biology of Reproduction》：Ovine follicular fluid extracellular vesicles improve oocyte maturation and exhibit ribosome-related cargo signatures

　　卵母细胞的发育能力对于家畜辅助生殖的效率至关重要。体外成熟（IVM）通常是体外胚胎生产的第一步，因此提高卵母细胞质量成为一个重要目标。我们通过在IVM培养基中补充来源于绵羊卵泡液的细胞外囊泡（oFF-EVs），评估了卵母细胞的成熟及后续胚胎发育情况，并表征了囊泡的货物内容。分离得到的oFF-EVs表现出典型的小细胞外囊泡特征。在所检测的浓度中，30 μg/mL产生了最高的平均成熟率和最大的颗粒细胞团扩张。PKH67标记显示颗粒细胞对囊泡的摄取呈时间依赖性。补充oFF-EVs降低了活性氧水平，增加了谷胱甘肽含量，并维持了线粒体膜电位。此外，它改善了皮质F-肌动蛋白的组织、皮层颗粒的分布、染色体分布和纺锤体形态，同时总AKT含量增加。体外受精后，卵裂率以及囊胚的总细胞数和内细胞团细胞数增加，但囊胚率未发生显著变化。小RNA测序鉴定出84个microRNA，主要由let-7家族主导，而蛋白质组学鉴定出4,730个蛋白质，富集于RNA加工、核糖核蛋白复合物、细胞内运输和蛋白质稳态方面。整合分析揭示了一个以FAU泛素样与核糖体蛋白S30融合蛋白（FAU）为核心的核糖体蛋白模块，提示核糖体相关的货物特征。这些发现支持oFF-EV补充作为提高绵羊卵母细胞成熟和后续发育能力的策略，并为进一步的功能研究确定了货物特征。