DNMT3A介导的表观遗传重编程通过CCL5-CCR5自分泌环路驱动肺结核免疫抑制性肉芽肿微环境形成

《Respiratory Research》：CCL5? macrophages promote pulmonary tuberculosis progression by epigenetically remodeling an immunosuppressive microenvironment

　　**摘要****背景**表观遗传重塑日益被认为是肺结核中免疫失调的驱动因素，但其如何塑造肉芽肿免疫微环境的机制仍未得到充分阐明。尤其是慢性炎症如何引发长期的表观遗传重编程以建立抑制性网络并促进疾病进展，尚需深入探究。**方法**本研究整合单细胞RNA测序、空间转录组学、宏转录组学和亚硫酸氢盐测序技术对人肺结核病变进行表征。多重免疫荧光在人和小鼠组织中验证了空间细胞相互作用。采用结核分枝杆菌感染的巨噬细胞-T细胞共培养体系、药理学抑制、基因敲低/过表达以及髓系特异性Dnmt3a敲除小鼠进行机制和功能验证。**结果**多组学分析揭示了肺结核中DNA甲基化-趋化因子耦合特征。DNMT3A主要在病变巨噬细胞中上调表达，并富集于CCL5?巨噬细胞中，该细胞群集中于炎症活跃的肉芽肿区域，且与T细胞和NK细胞浸润呈负相关。机制上，DNMT3A与PPARGC1B高甲基化、PPARγ抑制、NF-κB激活及CCL5表达增加相关。功能上，DNMT3A抑制或敲低可降低胞内细菌负荷，而外源性CCL5可逆转这一抗菌效应。关键在于，CCL5?巨噬细胞通过CCL5-CCR5自分泌信号促进M2样极化及T细胞耗竭样表型；CCR5阻断可逆转CCL5驱动的PD-1?TIM-3? T细胞耗竭样表型，并拮抗CD206?CD68?巨噬细胞的增加。CCL5?巨噬细胞还形成了涉及APOE-TREM2和HLA-E-CD94/NKG2A信号的免疫抑制交互网络。**结论**DNMT3A通过PPARγ/NF-κB轴和CCL5-CCR5自分泌环路驱动CCL5?巨噬细胞介导的免疫抑制，从而促进肺结核进展。重要的是，长期炎症相关的表观遗传重编程可能是免疫稳态失衡及有利于T细胞耗竭的抑制性微环境建立的关键决定因素。靶向该表观遗传通路及CCL5-CCR5轴可能为肺结核提供一种有前景的宿主导向治疗策略。